流式細胞儀檢測細胞周期操作步驟-全文預覽
【正文】 8nm雙波長激發(fā)，Em.= 510 nm檢測EGFP熒光(FL1 channel)和575 nm的發(fā)射波長檢測PI?！龣z測前先渦旋使細胞混勻懸浮呈單個細胞，然后插入流式細胞儀上↓流動室內充滿鞘液，細胞排成單列由噴嘴中心噴出，形成細胞液柱↓液柱與激光束相交，細胞上的熒光染料被激發(fā)產生熒光（488nm激發(fā)光源）↓熒光信號變成電信號輸出到計算機，軟件分析（熒光染料和細胞DNA分子特異性結合，可以檢測出細胞周期各時相細胞比例）↓在用第三方軟件分析之前，將流式結果按如下所示導出結果分析——Modfit軟件分析圖片拷貝：直接Ctrl+C——Flowjo軟件分析FCMDNA 量分析 1 個細胞增殖群時，可將DNA 含量分布組方圖分為三部分，即 G0/S、G2M?！?000r/min,離心5min↓將乙醇吸除，加PBS清洗混勻↓1000r/min,5min再離心一遍，將殘留在細胞上的乙醇除去↓吸除離心管內PBS，加入200ul PBS和2ul的RNA酶（）(37
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