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20xx-20xx年葡聚糖凝膠柱的使用方法-全文預(yù)覽

2024-12-01 16:52 上一頁面

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【正文】 22 的登記,檢測不合格的壓力表堅(jiān)決報(bào)廢,不得再行使用。對(duì)項(xiàng)目部報(bào)送的工程量進(jìn)行統(tǒng)計(jì)與核實(shí),核對(duì)每個(gè)工程項(xiàng)目的報(bào)送明細(xì),按時(shí)進(jìn)行計(jì)件工資的核算,全年共結(jié)算約 1200 個(gè)單位, 16993 戶,結(jié)算工資總額達(dá)400 余萬元,無一錯(cuò)誤,無一拖延。在碰管作業(yè)過程中,對(duì)作業(yè)進(jìn)行質(zhì)量監(jiān)控,督促作業(yè)人員嚴(yán)格執(zhí)行《規(guī)范》和《作業(yè)指導(dǎo)書》,同時(shí),對(duì)作業(yè)區(qū)域的安全防護(hù)、作業(yè)人員的安全行為進(jìn)行指導(dǎo)與監(jiān)督。 對(duì)已驗(yàn)收合格的工程,在確認(rèn)工程款的全額結(jié)清后,根據(jù)項(xiàng)目部的碰管申請(qǐng),按碰管的區(qū)域、數(shù)量、時(shí)間等進(jìn)行碰管安排。查找差距及問題,制訂相應(yīng)的計(jì)劃措施。累計(jì)處罰 7 個(gè)班組, 46 人次,總計(jì)扣款 7170元。作好每一個(gè)工序的質(zhì)量管理,而提升總體的工程質(zhì)量, 312 月巡查共計(jì)約700 個(gè)單位。四、以質(zhì)量為綱,以安全為本,獎(jiǎng)懲有度,確保質(zhì)量、安全雙豐收。 312 月進(jìn)行實(shí)地踏勘庭院共計(jì) 18 個(gè)單位, 6800 余戶,主干管工程 31 個(gè)單位,共計(jì)約 27150 米。二、實(shí)地踏勘施工現(xiàn)場,創(chuàng)造良好的施工條件。因此,部門結(jié)合以往的工作模式,針對(duì)今后工作的難點(diǎn)、重點(diǎn),切實(shí)加強(qiáng)內(nèi)部管理,對(duì)工作任務(wù)與責(zé)任進(jìn)行了重新分配與落實(shí),明確工作職責(zé),現(xiàn)將 09 年部門工作總結(jié)如下:一、掌握工程動(dòng)態(tài),提前做好工 程的統(tǒng)籌安排。 完成上級(jí)臨時(shí)交給的各項(xiàng)任務(wù)。 六、 2020 年工作打算 展望 2020 年,我們有信心面對(duì)新的機(jī)遇和挑戰(zhàn),我們將繼續(xù)按照交通局黨委及有關(guān)上級(jí)領(lǐng)導(dǎo)的要求,結(jié)合我公司的實(shí)際情況,積極參加我市重點(diǎn)工程 104國道以及一系列農(nóng)村公路的建設(shè)。做好新形勢下的信訪工作,使命光榮,責(zé)任重大,樹立和維護(hù)發(fā)展穩(wěn)定大局,更加努力的做好 信訪工作。 公司在做好各項(xiàng)工作的同時(shí),非常注重信訪工作。妥善地解決職工反映的突出問題,及時(shí)解決他們的憂事、難事,有利于社會(huì)穩(wěn)定。上半年,公司在各類媒體上錄用稿件 14 篇,其中省級(jí)報(bào)刊 2 篇,鎮(zhèn)江市級(jí) 1 篇, 簡訊 11 篇。保證路面整潔、完好、暢通,真正做到了安全管理,警鐘長鳴,確保了全年安全生產(chǎn)無事故。具體措施為:第一是為每個(gè)施工標(biāo)段配備專職安全監(jiān)督員,做到警鐘長鳴,并及時(shí)做好安全臺(tái)帳。在日常安全檢查中加強(qiáng)對(duì)重要部位、危險(xiǎn)源點(diǎn)的防范工作。成立了 “ 安全生 產(chǎn)月 ” 活動(dòng)領(lǐng)導(dǎo)小組,制訂了 “ 安全生產(chǎn)月 ” 活動(dòng)計(jì)劃,做到精心部署、嚴(yán)格落實(shí)。 二、強(qiáng)化安全管理,促進(jìn)安全生產(chǎn) 安全就是效益,一年來,公司安全生產(chǎn)成效明顯。分工明確,責(zé)任到人,狠抓了單位內(nèi)部各類人員職責(zé)的制定和落實(shí),建立健全各項(xiàng)管理制度,使各崗位人員明確職責(zé)和責(zé)任,掌握各自的工作目標(biāo)和任務(wù),增強(qiáng)責(zé)任感和工作的主動(dòng)性、積極性,提高了工作效益,堅(jiān)持以前瞻的思路研究發(fā)展規(guī)律,以科學(xué)的規(guī)劃指導(dǎo)各項(xiàng)工作,提高了單位的整體管理水平。 農(nóng)村公路及扶貧路 7km,完成工程量 150 萬元。 2020 年,按照交通局《 2020 年雙文明建設(shè)目標(biāo)責(zé)任書》的各項(xiàng)工作指標(biāo)及要求,在市交通局黨委及上級(jí)有關(guān)職能部門的正確領(lǐng)導(dǎo)下 ,通過 公司全體干部、職工的共同努力取得了一定的成績,現(xiàn)將 2020 年度工作總結(jié)如下: 一、緊緊圍繞中心工作 ,快速推進(jìn)在建工程 2020 年我市交通工作總的指導(dǎo)思想是:以黨的十七大及十七屆三中全會(huì)精神為指導(dǎo),深入實(shí)踐科學(xué)發(fā)展觀,牢牢把握國家、省、市擴(kuò)大內(nèi)需政策措施,面對(duì)全球金融風(fēng)暴的形勢,我們將堅(jiān)定信心,搶抓機(jī)遇,應(yīng)對(duì)挑戰(zhàn),負(fù)重推 進(jìn)交通基礎(chǔ)設(shè)施建設(shè),依法強(qiáng)化交通行業(yè)管理,穩(wěn)步推進(jìn)交通各項(xiàng)改革,不斷提升交通隊(duì)伍整體素質(zhì),努力實(shí)現(xiàn) 交通平穩(wěn)較快發(fā)展。繼續(xù) 認(rèn)真貫徹預(yù)防為主,教育在先的原則,加強(qiáng)黨員干部教育管理;積極引入思想預(yù)警機(jī)制,做好領(lǐng)導(dǎo)干部廉潔自律工作,切實(shí)加強(qiáng)領(lǐng)導(dǎo)班子建設(shè),嚴(yán)守思想道德和黨紀(jì)國法兩道防線,堅(jiān)持勤儉辦工會(huì),堅(jiān)決反對(duì)奢侈享樂、鋪張浪費(fèi)。在三秋期間積極響應(yīng)師黨委號(hào)召,組織全體黨員干部到三十五團(tuán)參加支農(nóng)拾花勞動(dòng)。 在今年的工作中,進(jìn)一步加強(qiáng)與師機(jī)關(guān)各部門、師屬各單位的配合,努力做到互相協(xié)作、互相支持。支部黨員的先進(jìn)模范作用也在各項(xiàng)工作中得到了充分發(fā)揮和體現(xiàn)。 (三)大力實(shí)施職工素質(zhì)工程,深入開展 “ 創(chuàng)建學(xué)習(xí)型組織,爭做知識(shí)型職工 ” 活動(dòng),堅(jiān)持不懈地加強(qiáng)對(duì)職工的思想道德教育和職業(yè)技能培訓(xùn)工作,引導(dǎo)職工積極投身團(tuán)場改革實(shí)踐,進(jìn)一步關(guān)心和解決困難職工的基本生活,建設(shè)一支能夠擔(dān)負(fù)屯墾戍邊歷史使命的高素質(zhì)的新型職工隊(duì)伍。 (一)按照兵團(tuán) “1+3” 文件關(guān)于 “ 兩個(gè)擴(kuò)大 ” 的要求,不斷擴(kuò)大職工經(jīng)營自主權(quán)和基層民主政治權(quán),以堅(jiān)持和完善職工代表大會(huì)、平等協(xié)商簽訂集體合同、民主選舉、團(tuán)(連)務(wù)公開等各項(xiàng)制度為重點(diǎn),狠抓 “ 六公開、三上墻、 兩監(jiān)督和明白卡 ” 等民主管理措施的落實(shí),切實(shí)維護(hù)職工的合法權(quán)益。進(jìn)一步開展、落實(shí) “ 立黨為公,勤政為民 ” 的活動(dòng),深入開展與基層單位掛鉤活動(dòng),經(jīng)常深入基層連隊(duì)和職工家庭,詳細(xì)了解職工群眾思想狀況和實(shí)際困難,并結(jié)合工會(huì)工作開展理論研討,撰寫出了有一定指導(dǎo)意義的調(diào)研論文。黨支部認(rèn)真貫徹《關(guān)于進(jìn)一步開展 “ 創(chuàng)建學(xué)習(xí)型組織,爭做知識(shí)型職工 ” 活動(dòng)的通知》,認(rèn)真組織黨員參加學(xué)習(xí),結(jié)合部門工作具體實(shí)際,發(fā)動(dòng)黨員積極投入 “ 創(chuàng)爭 ” 活動(dòng),為我?guī)煹穆毠に刭|(zhì)工程作出積極的貢獻(xiàn)。 ,發(fā)揮先鋒模范作用。在黨的十六大四中全會(huì)召開以后,認(rèn)真學(xué)習(xí)大會(huì)的精神和文件,特別是對(duì)全會(huì)討論通過的《關(guān)于加強(qiáng)中國共產(chǎn)黨執(zhí)政能力建設(shè)的決定》,不僅在支部成員內(nèi)部認(rèn)真學(xué)習(xí)貫徹,而且還在工會(huì)全體工作人員中 傳達(dá)貫徹學(xué)習(xí)??傮w來說,較低的流速,具有較高的分辯率。 上樣前,用洗脫液平衡層析柱至少兩個(gè)柱體積直到基線變得平穩(wěn)為止,如改變?nèi)軇?yīng)該注意凝膠在新溶劑中的溶脹性質(zhì),并根據(jù)性質(zhì)確定柱高調(diào)節(jié)器的位置,如使用相同的溶劑,在以后的層析中柱平衡可以省略。在溶脹的過程中,要盡量避免過分?jǐn)嚢?,否則會(huì)破壞球形膠粒,且要避免使用磁力攪拌器。然而當(dāng)膠溶脹后就相對(duì)容易得到均一的柱床。例如:類固醇、萜類、脂類以及小分子多肽等, Pharmadex LH20 同時(shí)適用于分子類別非常相似的物質(zhì)的分離和工業(yè)規(guī)模的制備,既可用于初步純化步驟,也可用于最終精制步驟,如非對(duì)映同分異構(gòu)體的分離。 ( 4) 洗脫體積一般為 23 個(gè)保留體積,對(duì)特殊保留強(qiáng)的化合物,可洗脫 5 個(gè)保留體積。 6 分離的技巧,最后說說我的使用心得 ( 1) 流速不可太快,切切不可新急,所謂欲速則不達(dá)。這也是要有技巧的步驟。 (2) 飽和層析柱: 用洗脫劑將凝膠搖 勻,直立柱身,讓其自然沉降,此時(shí)要防止氣泡留在其中。首先你的樣品須要能溶解在盡量少量的洗脫劑中。 如果樣品極性大,這選用反相溶劑洗脫(甲醇--水),樣品用最少體積的甲醇--水(盡可能甲醇少一些)溶解,過濾后,濕法上樣(一定要濾喔!要是把 Sephadex LH20 堵啦,就得將 Sephadex LH20 的柱頭部分棄去,很心痛呀)。 看完第 2點(diǎn)后,就應(yīng)該清楚 Sephadex LH20 洗脫溶劑因分為兩類:反相和正相兩種。因?yàn)槟z過濾作用,所以大分子的化合物保留弱,先被洗脫下來,小分子的化合物保留強(qiáng),最后出柱。將各收集管中的洗脫液分別用 721型分光光度計(jì)在波長 540nm 處測定其光密度。用少量洗脫液清洗層析柱加樣區(qū),共洗滌三次,每次清洗液應(yīng)完全進(jìn)入凝膠柱內(nèi)后,再進(jìn)行下一次洗 滌。 :打開螺旋夾使柱面上的洗脫液流出,直至床面與液面剛好平齊為止,關(guān)閉下端出口。將凝膠輕輕攪動(dòng)均勻,用玻璃棒沿層析柱內(nèi)壁緩緩注入柱中,待凝膠沉積到柱床下已超過 l厘米時(shí),打開下口螺旋夾,繼續(xù)裝柱至柱床高度達(dá)到 8 厘米 ,關(guān)閉出口。 (5)葡聚糖凝膠 G25 (SephadexG25) 【實(shí)驗(yàn)操作】 :商品凝膠是干燥的顆粒,使用時(shí)需經(jīng)溶脹處理,稱取 4 克葡聚糖凝膠 G— 25,加 50 毫升蒸餾水,攪拌均勻,在室溫溶脹 6 小時(shí),或沸水浴溶脹 2 小時(shí),一般采用后一種方法。 【實(shí)驗(yàn)材料】 驗(yàn)器材 層析柱 (120cm)附有一小段乳膠管及螺旋夾;洗脫液瓶 (帶下口的三角瓶, 250m1);試管及試管架;量筒 10m1; 721 型分光光度計(jì) (1) Tris— 醋酸緩沖液 ():取 (含 )900ml,用濃醋酸調(diào) pH 至 ,加蒸餾水至 1000m1。分子量大于允許進(jìn)入凝膠網(wǎng)孔范圍的物質(zhì)完全被凝膠排阻,不能進(jìn)入凝膠顆粒內(nèi)部,阻滯作用小,隨著溶劑在凝膠顆粒 之間流動(dòng),因此流程短,而先流出層析柱;分子量小的物質(zhì)可完全進(jìn)入凝膠顆粒的網(wǎng)孔內(nèi),阻滯作用大,流程延長,而最后從層析柱中流出。 葡聚糖凝膠是由直鏈的葡聚糖分子和交聯(lián)劑 3— 氯 1, 2— 環(huán)氧 丙烷交聯(lián)而成的具有多孔網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)的高分子化合物。 實(shí)驗(yàn) 五 . 葡聚糖凝膠層析 【實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹? 。 (5) 凝膠的再生和回收 凝膠柱使用一次后,必須反沖疏松一次,平衡后再使用。本實(shí)驗(yàn)洗脫液流出的速度應(yīng)控制在 - 。否則,必須到出重裝,裝好 后,用蒸餾水平衡 2- 3h 即可加樣品分離。柱的底部用裝有細(xì)玻璃管的橡皮塞塞緊,用洗凈的玻璃絲(約 200目尼龍布)墊底或購買類似規(guī)格的商品柱。 (2) 裝柱 凝膠層析柱的直徑與柱長之比一般為 1:15。裝柱后的凝膠必須均勻,不能有氣泡或明顯條紋。 (4) 洗脫與收集 洗脫時(shí),用蒸餾水作洗脫劑,并且要連續(xù)不斷地進(jìn)行,使凝膠柱上端保持一定的液層,防止凝膠柱表面的液體流干。但因?qū)游鲋L度的差異,管號(hào)會(huì)有變化,必要時(shí)可用紫外檢測 A260nm,找出濃度最大的管號(hào)。若實(shí)驗(yàn)完畢,將再生后的凝膠在布氏漏斗上用蒸餾水洗滌抽干,再用 95%乙醇洗兩次,在 60℃烘 箱中烘干,回收保存。層析的固定相載體是凝膠顆粒,目前應(yīng)用較廣的是:具有各種孔徑范圍的葡聚糖凝膠( Sephadex)和瓊脂糖凝膠( Sepharose) 。 葡聚糖凝膠層析,是使待分離物質(zhì)通過葡聚糖凝膠層析柱,各個(gè)組分由于分子量不相同, 在凝膠柱上受到的阻滯作用不同,而在層析柱中以不同的速度移動(dòng)。藍(lán)色葡聚糖 — 2020分子量接近 2 106, 而溴酚藍(lán)分子量為 670,二者分子量相差較大,前者完全排阻,而后者則可完全 進(jìn) 入凝膠顆粒網(wǎng)孔內(nèi),二者通過層析柱的時(shí)間不同而分開。 (4) 樣品 溶液 :取溴酚藍(lán)溶液 毫升,藍(lán)色葡聚糖 — 2020 溶液 毫升混勻后為上柱樣品 溶液 。層析柱中加入洗脫液,打開下口螺旋夾,讓溶液流出,排除殘留氣泡,最后保留約 2厘米高度的洗脫液,擰緊螺旋夾。平衡后,擰緊下端螺旋夾。當(dāng)樣品溶液恰好流至與凝膠表面平齊時(shí),關(guān)閉下端出口。仔細(xì)觀察樣品在層析柱內(nèi)的分離現(xiàn)象,收集洗脫液,每收集 3 毫升即換一 支 收集管 (試管預(yù)先編號(hào) ),收集約 20 管左右,樣品即可完全被洗脫下來。 Sephadex LH20 的分離原理主要有兩方面:以凝膠過濾作用為主,兼具反相分配的作用(在反相溶劑中)。 3 Sephadex LH20 洗脫溶劑。 4 Sephadex LH20 樣品的處理和洗脫溶劑的選擇。 (1) 選擇條件: 梯度洗脫在 Sephadex使用中并不象在正相柱層析中那么重要。我們實(shí)驗(yàn)室常用正己烷二氯甲烷甲醇系統(tǒng),用了很多年,效果較好。 (4) 濕法上柱。 再生以備下次使用。 ( 3) 餾分一定要接的細(xì)
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