酶的生產(chǎn)與分離純化瑤瑤-全文預(yù)覽
【正文】 質(zhì)分子以雙極離子存在，總凈電荷為零 , 顆粒無電荷間的排斥作用 ,易凝集成大顆粒，因而最不穩(wěn)定，溶解度最小，易沉淀析出。 ? 保護劑： 底物、輔酶、某些抗氧化劑、 表面活性劑 等。 (4) 滲透壓法 (5) 酶消化法 46 (6) 化學(xué)破碎法 –① 有機溶劑處理 –② 表面活性劑處理 ? 與細胞膜中的磷脂及脂蛋白相互作用使細胞膜結(jié)構(gòu)破壞，增加膜的透過性。 酶濃縮 酶貯存 43 機械破碎 搗碎法 研磨法 勻漿法 物理破碎 溫度差破碎法 壓力差破碎法 超聲波破碎法 化學(xué)破碎 有機溶劑： 甲苯、丙酮 丁醇、氯仿 表面活性劑： Triton、 Tween 酶促破碎 自溶法 外加酶制劑法 通過機械運動產(chǎn)生的剪切力，使組織、細胞破碎。 38 ? 果膠酶的生產(chǎn) ? 生產(chǎn)菌種：真菌如曲霉菌、青霉菌，細菌如枯草芽孢桿菌、歐氏桿菌。打破空氣氣泡，使發(fā)酵液形成湍流，提高溶氧量，增加空氣利用。 ? 33 一般細菌為 37 ℃ ，霉菌和放線菌為 28～ 30 ℃ ，而生產(chǎn)糖化酶的最適溫度為 37～ 40 ℃ 。 重要 有你才健康！ 30 ? （ 6） 產(chǎn)酶促進劑 –產(chǎn)酶促進劑 –一是誘導(dǎo)物，二是表面活性劑。 27 ? （ 4） 無機鹽 –常以磷酸二氫鉀、磷酸氫二鉀等磷酸鹽作為 磷源 ，以硫酸鎂為硫源和 鎂源 。 α－淀粉酶生產(chǎn)用 淀粉 不用 果糖 重要 24 ? （ 2）氮源 –有機氮源和無機氮源 重要 一般來說，動物細胞、植物細胞、異養(yǎng)型微生物、自養(yǎng)型微生物。 ? 而多數(shù)胞內(nèi)酶產(chǎn)生菌的篩選：細胞破碎物做酶源，經(jīng)酶反應(yīng)后，根據(jù) 酶反應(yīng)產(chǎn)物的特點來篩選 （輔酶 NAD） 。 12 ? （ 4） 米曲霉 ? 糖化酶、蛋白酶 13 ? （ 5）根霉 ? 主要用于糖化酶、淀粉酶、轉(zhuǎn)化酶等生產(chǎn) 14 ? （ 6）毛霉 ? 蛋白酶、糖化酶、淀粉酶、脂肪酶等。 – (5) 利用以基因工程為主的現(xiàn)代分子生物學(xué)技術(shù)， 8 產(chǎn)酶微生物 ? 產(chǎn)酶種類、產(chǎn)量、發(fā)酵條件、工藝。 ? 我國 7家。 ? 國內(nèi)糖化酶、ａ 淀粉酶、蛋白酶三大類 ? 重要產(chǎn)品系列果膠酶、低溫堿性蛋白酶，國內(nèi)尚未投入生產(chǎn) 。 – (4) 微電腦，連續(xù)化、自動化，經(jīng)濟效益高。 10 ? （ 2） 大腸桿菌 ? 陰性，無芽孢 ? 菌落光滑 ? 用于谷氨酸脫羧酶，天門冬氨酸酶等 胞內(nèi)酶 11 ? （ 3）黑曲霉 ? 屬于真菌屬 ? 糖化酶、淀粉酶、酸性蛋白酶、果膠酶等。 ? 胞內(nèi)酶 ：若酶作用底物分子量小可透過細胞膜，將酶反應(yīng)的產(chǎn)物作為底物，加在培養(yǎng)基中，根據(jù)菌落顏色變化 。 重要 吃點啥？ 22 重要 ? 有機碳的主要來源有：一是農(nóng)副產(chǎn)品中 ? 二是野生的原料 ? 以石油產(chǎn)品中 12～ 16碳的成分 23 考慮 營養(yǎng)要求 、 誘導(dǎo)作用 、 分解代謝物阻遏作用 。 –淀粉酶 (包括 α－淀粉酶、糖化酶、 β－淀粉酶等 ) 高 , 在糖化酶生產(chǎn)培養(yǎng)基的碳氮比是最高的。 –某些氨基酸、維生素、嘌呤或嘧啶。 ? 添加緩沖液；調(diào)節(jié)通風(fēng)量 .調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的初始 pH； pH過高糖或淀粉來調(diào)節(jié)， pH過低氮調(diào)節(jié)。 35 ? (4) 攪拌的影響
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