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血清堿性磷酸酶活性測定-全文預(yù)覽

2025-06-16 18:25 上一頁面

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【正文】 病、骨軟化病、骨轉(zhuǎn)移癌和骨折修復(fù)愈合期等 。 ,一次 5min,一次 15min。 其他方法: 磷酸對硝基酚連續(xù)監(jiān)測法 在堿性條件下,堿性磷酸酶將無色磷酸對 硝基苯酚水解為黃色對硝基苯酚,在 405nm測 定對硝基苯酚生成的速率,這個速率與血清中 ALP活性成正比。磷酸苯二鈉比色法水解速度快,故保溫時間較短。 。但與磷酸對硝基酚連續(xù)監(jiān)測法相比,準(zhǔn)確度、精密度較低,操作比較繁瑣,靈敏度低;酶單位不是國際單位;受膽紅素和溶血的干擾。 實(shí)驗(yàn)小結(jié) 磷酸苯二鈉比色法水解速度快,故保溫時間較短。前者是達(dá)到最適溫度,后者是反應(yīng)時間。 思考題 1. 本次實(shí)驗(yàn)是用的什么方法?終止劑是什么?為什么加入鐵氰化鉀硼酸液后必須迅速混勻?有何影響? 答:終止法;終止劑是 鐵氰化鉀硼酸液;硼酸改變了 PH,使其不再處于最適 PH。此液應(yīng)避光保存,如出現(xiàn) 藍(lán)綠色 即作廢 。 注意事項(xiàng) ? 酚標(biāo)準(zhǔn)液開后不能久置。用 510nm波長(紅色醌物質(zhì)的最大吸收波長)比色,以蒸餾水調(diào)零點(diǎn),讀取各管吸光度。溶于水、苯和乙醇,微溶于乙醚 。 ? 實(shí)驗(yàn)原理 測定 ALP的方法主要分為兩種 ? 一是測定底物解離下的 磷酸根 來計(jì)算酶活力 ,如 β甘油磷酸鈉法,但存在血清本身有磷酸根的缺點(diǎn)
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