【正文】 （ C） 包含流動相傳質(zhì)阻力系數(shù)（ Cm） 和固定相傳質(zhì)系數(shù)（ Cs）， 即86 當(dāng)固定液含量一定時，液膜厚度隨載體的比表面積增加而降低，因此，一般采用比表面積較大的載體來降低液膜厚度。84 液相傳質(zhì)過程是指試樣組分從固定相的氣 /液界面移動到液相內(nèi)部，并發(fā)生質(zhì)量交換，達(dá)到分配平衡 ，然后又返回氣 /液界面的傳質(zhì)過程。這樣使得試樣在兩相界面上不能瞬間達(dá)到分配平衡，引起滯后現(xiàn)象，從而使色譜峰變寬。C1813. 傳質(zhì)阻力項 Cu 由于氣相色譜以氣體為流動相，液相色譜以液體為流動相，它們的傳質(zhì)過程不完全相同。s1） ,分子擴散項與組分在流動相中 擴散系數(shù) Dg成正比 . 7879 Dg與流動相及組分性質(zhì)有關(guān)： (a) 相對分子質(zhì)量大的組分 Dg小， Dg反比于流動相相對分子質(zhì)量的平方根，所以 采用相對分子質(zhì)量較大的流動相，可使 B項降低； (b) Dg隨柱溫增高而增加，但反比于柱壓。Dg76B/u（ 縱向分子擴散項） —— 指分子沿色譜柱軸向擴散引起的色譜譜帶展寬B分子擴散項系數(shù)為 /0。為了減少渦流擴散，提高柱效，使用細(xì)而均勻的顆粒，并且填充均勻是十分必要的。色譜峰變寬的程度由下式?jīng)Q定： A式中 u為流動相的線速度； A、 B、C、 為常數(shù)，分別代表渦流擴散系數(shù)、分子擴散項系數(shù)、傳質(zhì)阻力項系數(shù)。u/=van6968（三）速率理論 1956年荷蘭學(xué)者 van40） 216/=s， 保留時間為 400L有效板高 (/所以常用有效塔板數(shù) n有效 表示柱效：Y)2==H和 n一定時，如果色譜峰很窄，則說明 n越大，H越小，柱效能越高。(16(tR60 61 塔板理論指出 ： 第一 ，當(dāng)溶質(zhì)在柱中的平衡次數(shù)，即理論塔板數(shù) n大于 50時 ，可得到基本對稱的峰形曲線。 58根據(jù)上述假定，在色譜分離過程中，該組分的分布可計算如下： 開始時，若有單位質(zhì)量，即 m=1（ 例1mg或 1μg ） 的該組分加到第 0號塔板上，分配平衡后，由于 k=1， 即 ns=nm故 nm=ns=。L對于一根長為 L的色譜柱，溶質(zhì)平衡的次數(shù)應(yīng)為：2. 以氣相色譜為例，載氣進(jìn)入色譜柱不是連續(xù)進(jìn)行的，而是脈動式，每次進(jìn)氣為一個塔板體積（ Δ Vm）。55（ 二）塔板理論 把色譜柱比作一個精餾塔，沿用精餾塔中塔板的概念來描述組分在兩相間的分配行為， 同時引入理論塔板數(shù)作為衡量柱效率的指標(biāo) ，即色譜柱是由一系列連續(xù)的、相等的水平塔板組成。作為一個色譜理論，它不僅應(yīng)說明組分在色譜柱中移動的速率，而且應(yīng)說明組分在移動過程中引起區(qū)域擴寬的各種因素。隨著兩組分在色譜柱中移動距離的增加，兩峰間的距離逐漸變大，同時，每一組分的濃度輪廓（即區(qū)域?qū)挾龋┮猜儗挕? 濃度沿柱移動距離 50 如果兩組分的 K或 k值相等，則α=1 ， 兩個組分的色譜峰必將重合，說明分不開。/=(B)k46滯留因子 Rs 分配比 k值可直接從色譜圖測得。K3.45V?RtMM(t分配比 44例如：在分配色譜中， Vs表示固定液的體積；在尺寸排阻色譜中，則表示固定相的孔體積。 k值也決定于組分及固定相熱力學(xué)性質(zhì)。ns組分在流動相中的物質(zhì)的量 組分在固定相中的物質(zhì)的量 Cm 40 分配系數(shù)是由組分和固定相的熱力學(xué)性質(zhì)決定的，它是每一個溶質(zhì)的特征值，它僅與兩個變量有關(guān)： 固定相和溫度 。= 38（一）分配系數(shù) K和分配比 k K 分配色譜的分離是基于樣品組分在固定相和流動相之間反復(fù)多次的分配過程，而吸附色譜的分離是基于反復(fù)多次的 吸附 脫附 過程。它與標(biāo)準(zhǔn)偏差 ?的關(guān)系是 Y = 4 ?3536從色譜流出曲線中，可得許多重要信息：(i) 根據(jù)色譜峰的個數(shù) ，可以判斷樣品中所含 組分的最少個數(shù)；(ii) 根據(jù)色譜峰的保留值 ，可以進(jìn)行定性分析；(iii) 根據(jù)色譜峰的面積或峰高 ，可以進(jìn)行定量分析；(iv) 色譜峰的保留值及其區(qū)域?qū)挾?，是評價色譜柱分離效能的依據(jù)；(v) 色譜峰兩峰間的距離 ，是評價固定相（或流動相）選擇是否合適的依據(jù)。表示色譜峰區(qū)域?qū)挾韧ǔＳ?三種方法 。?tR//= 僅適用于氣相色譜 ，不適用于液相色譜 。V0當(dāng)后兩項很小可忽略不計時， 死體積可由死時間與色譜柱出口的載氣流速 Fco（ cm3 由于組分在色譜柱中的保留時間 tR包含了組分隨流動相通過柱子所需的時間和組分在固定相中滯留所須的時間， 所以 tR實際上是組分在固定相中保留的總時間。試樣從進(jìn)樣到柱后出現(xiàn)峰極大點時所經(jīng)過的時間，稱為保留時間，如下圖。=1920（二）基線 在實驗操作條件下， 色譜柱后沒有樣品組分流出時的流出曲線稱為基線 ，穩(wěn)定的基線應(yīng)該是一條水平直線。流出曲線如下圖 該法在分離多組分混合物時，除第一組分外，其余均非純態(tài)，因此僅適用于從含有微量雜質(zhì)的混合物中切割出一個高純組分（組分 A）， 而不適用于對混合物進(jìn)行分離。 很明顯，吸附或溶解能力最弱的組分最先流出，最強的最后流出。此外，除去沖洗劑后，可獲得純度較高的物質(zhì)。 洗脫法也稱沖洗法 。216。9216。216。超臨界流體為流動相的色譜為 超臨界流體色譜（ SFC） 。根據(jù)固定相是固體吸附劑還是固定液（附著在惰性載體上的一薄層有機化合物液體），又可分為 氣固色譜（ GSC） 和氣液色譜（ GLC） 。6從不同角度，可將色譜法分類如下：s31941 Martin和 Synge提出液 液色譜理論；1952 James和 Martin發(fā)展了氣相色譜；1956 Van Deemter提出速率理論；1967 Kirkland等研制高效液相色譜法； 他在研究植物葉的色素成分時，將植物葉子的萃取物倒入填有碳酸鈣的直立玻璃管內(nèi)，然后加入石油醚使其自由流下，結(jié)果 色素中各組分互相分離形成各種不同顏色的譜帶 。1 色譜法早在 1903年由俄國植物學(xué)家 茨維特 分離植物色素時采用。2t5n當(dāng)流動相中樣品混合物經(jīng)過固定相時，就會與固定相發(fā)生作用，由于各組分在性質(zhì)和結(jié)構(gòu)上的差異，與固定相相互作用的類型、強弱也有差異，因此在同一推動力的作用下，不同組分在固定相滯留時間長短不同，從而按先后不同的次序從固定相中流出。216。利用組分在吸附劑（固定相）上的吸附能力強弱不同而得以分離的方法，稱為 吸附色譜法 。利用組分在離子交換劑（固定相）上的親和力大小不同而達(dá)到分離的方法，稱為 離子交換色譜法 。固定相裝于柱內(nèi)的色譜法，稱為 柱色譜 。167。流出曲線下圖12A B 這種方法能使樣品的各組分獲得良好的分離，色譜峰清晰。 頂替法是將樣品加到色譜柱頭后 ，在惰性流動相中加入對固定相的吸附或溶解能力比所有試樣組分強的物質(zhì)為頂替劑（或直接用頂替劑作流動相），通過色譜柱，將各組分按吸附或溶解能力的強弱順序，依次頂替出固定相。 迎頭法是將試樣混合物連續(xù)通過色譜柱 ，吸附或溶解能力最弱的組分首先以純物質(zhì)的狀態(tài)流出，其次則以第一組分和吸附或溶解能力較弱的第二組分混合物，以此類推。 如果進(jìn)樣量很小，濃度很低，在吸附等溫線（氣固吸附色譜）或分配等溫線（氣液分配色譜）的線性范圍內(nèi)，則色譜峰是對稱的。信號 進(jìn)樣tM23ū=tM27 V0 指色譜柱在填充后，柱管內(nèi)固定相顆粒間所剩留的空間、色譜儀中管路和連接頭間的空間以及檢測器的空間的總和。tMFcoFco為扣除飽和水蒸氣壓并經(jīng)溫度校正的流速。 VR?V0tR??VR2?=tR 33 (五 ) 區(qū)域?qū)挾? 色譜峰的區(qū)域?qū)挾仁巧V流出曲線的重要參數(shù)之一，用于衡量柱效率及反映色譜操作條件的動力學(xué)因素。它與標(biāo)準(zhǔn)偏差的關(guān)系為 Y1/2=? Y即色譜峰兩側(cè)拐點上的切線在基線上截距間的距離。因此， 要從熱力學(xué)和動力學(xué)兩方面來研究色譜行為。/即 k =它是衡量色譜柱對被分離組分保留能力的重要參數(shù)。 Vs為柱中固定相的體積 ， 在各種不同的類型的色譜中有不同的含義。=tt/=0=k . ?例如，對填充柱，其β值一般為 635；對毛細(xì)管柱，其 β值為 60600。及分配比 t?R(A)k（ B）=K（ A） 通過選擇因子 α把實驗測量值 k與熱力