【正文】 陽性 — 絮狀沉淀； 陰性 — 無 免疫應(yīng)用： 免疫學(xué)方法 2) 現(xiàn)代方法： a. 單免疫擴(kuò)散 (single immunodiffusion)： 將適當(dāng)濃度的已知抗體預(yù)先混在 1~% 瓊脂內(nèi)制成凝膠板，再以適當(dāng)距離在板上打孔，孔中加入待測抗原，當(dāng)抗原向周圍擴(kuò)散時(shí)，與板上的抗體相遇，并在最合適的比例處形成白色沉淀環(huán)。 常用載體有人 O型紅細(xì)胞、乳膠顆粒、活性炭等，并因載體不同而分別稱為 間接血凝試驗(yàn) 、 間接乳凝試驗(yàn) 和 間接炭凝試驗(yàn) 。 用于凝集反應(yīng)的抗原稱為 凝集原 ；用于凝集反應(yīng)的抗體稱 凝集素 2. 種類 : (1)直接凝集反應(yīng) (direct agglutination) ： 顆粒性抗原直接與相應(yīng)抗體結(jié)合所出現(xiàn)的凝集現(xiàn)象。 Chapter 3. 免疫原理及應(yīng)用 3. 定比性： 抗原與抗體需按一定的比例結(jié)合 一般情況下，抗原表面的抗原決定簇是多價(jià)的，而抗體上的抗 原受體通常是單價(jià)的或二價(jià)的，二者只有以一定比例結(jié)合才能出現(xiàn) 可見的血清學(xué)反應(yīng)。 2. 免疫學(xué)反應(yīng)： 抗原與相應(yīng)抗體在 體內(nèi) 發(fā)生的特異性結(jié)合反應(yīng) 。 免疫： 特異性免疫 4) IgD： (1) 以單體形式存在于血清中，含量低，僅占人體血清 Ig總量的 1%。 免疫： 特異性免疫 單體 3) IgA： (1) 分為血清型 IgA和分泌型 IgA(SIgA)兩種類型。 (3) IgG與補(bǔ)體結(jié)合后可通過傳統(tǒng)途徑激活補(bǔ)體； (4) IgG能與巨噬細(xì)胞、中性粒細(xì)胞和 NK細(xì)胞表面相應(yīng)受體結(jié)合， 從而發(fā)揮調(diào)理吞噬和抗體依賴的細(xì)胞毒性 (ADCC效應(yīng) )，從而殺傷耙細(xì) 胞。 5) 無脊椎動(dòng)物 ： 無 Ig 免疫： 特異性免疫 5. 各種 Ig的特性與功能 1) IgG： a. 來源與性質(zhì)： 主要由脾和淋巴結(jié)的漿細(xì)胞合成，常以單體形式存在于血清和其他血清中。 c. 其他： IgG, IgA, IgM, IgE。 重鏈可變區(qū) (VH)和輕鏈可變區(qū) (VL)都是抗原特異性結(jié)合部位。 免疫： 特異性免疫 3. Ig的化學(xué)結(jié)構(gòu) H鏈 V區(qū) Ig 分子是由一個(gè)或多個(gè)單體組成； L鏈 V區(qū) 如： IgG、 IgD和 IgE 均為單體分子 L鏈 C區(qū) 每個(gè) Ig單體呈 Y形對稱結(jié)構(gòu)。 抗體 = 免疫球蛋白？ Why? 免疫： 特異性免疫 抗體都是免疫球蛋白，但免疫球蛋白并不都是抗體。 (3)抗體 (Antibody, Ab)： 機(jī)體免疫細(xì)胞被抗原激活后，由分化成熟的終末B細(xì)（漿細(xì)胞）所合成與分泌的一類能與相應(yīng)抗原特異性結(jié)合的具有免疫功能的球蛋白。 5) 作用機(jī)制： （ 作用機(jī)制尚未完全了解，主要可能有以下原因） 主要是促進(jìn)淋巴細(xì)胞的增殖、分化，改變抗原的物理形狀，使抗原在體內(nèi)維持較長時(shí)間，易于巨噬細(xì)胞的攝取、處理并提呈給淋巴細(xì)胞，從而提高抗原的免疫原性，增強(qiáng)機(jī)體對抗原的應(yīng)答能力。 免疫： 特異性免疫 6. 細(xì)菌抗原 細(xì)菌是重要的病原體，其成分十分復(fù)雜，每種結(jié)構(gòu)及其代謝產(chǎn)物均有不同的抗原成分，每種細(xì)菌都是一個(gè)由多種抗原組成的復(fù)合體。 如各種微生物及其代謝產(chǎn)物、 (2) 同種異體抗原： 指來自同種而基因型不同的個(gè)體的抗原物質(zhì)， 如人血型抗原； (3) 自身抗原： 指能引起自身免疫應(yīng)答的自身組織成分， 如改變和隱蔽的自身物質(zhì)。 交叉反應(yīng)： 由共同抗原決定簇刺激機(jī)體產(chǎn)生的抗體可和兩種抗原結(jié)合發(fā)生反應(yīng)。 c. 組成： 不同類型的抗原決定簇組成不同，一般有 57個(gè)單體組成 如： Pr類抗原：其抗原決定簇有 5 個(gè)左右氨基酸 多糖類抗原：其抗原決定簇有 6 個(gè)左右單糖 核酸類半抗原：其抗原決定簇有 68 個(gè)左右核苷酸殘基 免疫： 特異性免疫 3) 抗原決定簇對抗原特異性的影響 抗原決定簇的化學(xué)組成、排列及空間結(jié)構(gòu)決定著抗原的特異性。又稱 表位 （ epitope） 具體說，抗原決定簇就是與相應(yīng)淋巴細(xì)胞上的抗原受體結(jié)合的部位，并且，只有兩者結(jié)合才能激活淋巴細(xì)胞并引起免疫反應(yīng) 免疫： 特異性免疫 2) 抗原決定簇的種類與組成 a. 種類： 一個(gè)抗原表面可以有一種或多種不同的抗原決定簇； 功能性 (抗原 )決定簇： 指位于抗原分子表面易被相應(yīng)淋巴細(xì)胞識別、啟動(dòng)免疫應(yīng)答，同時(shí)能與相應(yīng)抗體或致敏 T細(xì)胞特異性結(jié)合發(fā)生免疫反應(yīng)的決定簇。 免疫： 特異性免疫 4. 抗原的特異性與交叉反應(yīng) 抗原的特異性既表現(xiàn)在免疫原性上，也表現(xiàn)在免疫反應(yīng)性上。 4) 免疫途徑： 相同抗原因免疫途徑不同，產(chǎn)生的免疫效果也不同 多數(shù)抗原須經(jīng)非消化道 (皮下、肌肉、體表或血液等 )途徑才能產(chǎn)生良好免疫效果； 有些抗原 (如須刺激腸粘膜相關(guān)淋巴組織的抗原 )，只有口服免疫才有良好效果。 若明膠分子上連接少量酪氨酸或谷氨酸等芳香族 . ，免疫原性顯著增強(qiáng) 。 3) 大分子膠體性： 抗原的分子量較大 (1萬 Da以上 )，分子量小于 4000 Da的物質(zhì)一般不具抗原性。 4) 特殊抗原： a. 變應(yīng)原 (allergen)： 是指能夠引起人類變態(tài)反應(yīng)（過敏反應(yīng)）性疾病的物質(zhì)。 免疫原性和免疫反應(yīng)性統(tǒng)稱為 抗原性 。 8)其他體液因子： 溶血素，蛋白酶等。 免疫： 非特異性免疫 3) 溶菌酶 A. 來源與成分： 存在于粘液、血清和巨噬細(xì)胞中，是一種 水解酶（低分子堿性多肽） B. 作用： 可直接溶解殺死 G+菌等病原微生物 4) C反應(yīng)性蛋白 （ CRP） A. 來源與成分： 組織損傷、感染或炎癥所誘導(dǎo)的第一個(gè) 蛋白，需 Ca2+，如鰈、虹鱒、日本鰻等。 ② 可以增強(qiáng)腫瘤細(xì)胞表面的抗原性 , 使之易被機(jī)體免疫殺傷系統(tǒng)所發(fā)現(xiàn)并加以殺滅 。 免疫： 非特異性免疫 2) 干擾素： A. 定義： 是一類在同種細(xì)胞上具有抗病毒活性的蛋白質(zhì) . (其活性的發(fā)揮受細(xì)胞基因組的調(diào)節(jié)和控制，涉及 RNA和 DNA的合成 ) B. 來源與成分： 主要為由巨噬細(xì)胞和淋巴細(xì)胞分泌的蛋白質(zhì)； 機(jī)體產(chǎn)生干擾素的數(shù)量產(chǎn)生受溫度影響明顯。 2) 被動(dòng)免疫： 從母體獲得 抗體 或因人工注射 抗體 而獲得的免疫 免疫： 水產(chǎn)動(dòng)物免疫的基本概念 3) 自動(dòng)免疫和被動(dòng)免疫的區(qū)別： a. 發(fā)生作用時(shí)間： 自動(dòng)免疫： 慢（ 14周）； 被動(dòng)免疫： 快（立即） b. 效果： 自動(dòng)免疫： 可刺激機(jī)體持續(xù)產(chǎn)生抗體，再次接收抗原刺激 將表現(xiàn)出再次反應(yīng)或反應(yīng)增強(qiáng) 被動(dòng)免疫： 體內(nèi)抗體數(shù)量不會增多，再次接觸抗原也不出 現(xiàn)增強(qiáng)反應(yīng) c. 維持時(shí)間： 自動(dòng)免疫： 長（半年至終生）； 被動(dòng)免疫： 短（ 23周） d. 用途： 自動(dòng)免疫： 預(yù)防感染； 被動(dòng)免疫： 應(yīng)急治療 免疫： 水產(chǎn)動(dòng)物免疫的基本概念 四、水產(chǎn)動(dòng)物免疫的特點(diǎn) 1. 水產(chǎn)動(dòng)物病原與人類疾病關(guān)系不大，不易引起重視； 2. 水產(chǎn)動(dòng)物免疫機(jī)制依賴于外界環(huán)境變化較為明顯； 3. 水產(chǎn)動(dòng)物抗體與人等高等生物的已知抗體不同，其疾病的免疫學(xué)防治方法尚在探索中； 4. 水產(chǎn)動(dòng)物是變溫動(dòng)物，其免疫學(xué)研究必須在同一條件下進(jìn)行 五、水產(chǎn)動(dòng)物免疫在病害防治中的意義 1. 通過人工免疫或?qū)Σ『笥忻庖吡€(gè)體篩選，培育免疫新品種 (SPR)； 2. 通過人工免疫，可有效預(yù)防流行病的發(fā)生； 3. 免疫防治可有效避免藥物殘留及化學(xué)藥物對水體的污染； 4. 免疫防治可避免長期使用抗生素等而產(chǎn)生的耐藥性； 5. 疫苗防治可維持較長的藥效時(shí)間。 免疫： 水產(chǎn)動(dòng)物免疫的基本概念 三、免疫的主要類型 1. 天然免疫 定義： 指機(jī)體先天具有的正常生理防御功能，對各種不同的病原微生物與異物都有排斥和屏障作用，也稱 非特異性免疫 。 免疫： 水產(chǎn)動(dòng)物免疫的基本概念 （三）免疫因子 免疫因子： 由機(jī)體細(xì)胞產(chǎn)生，與免疫應(yīng)答有關(guān)的、分泌到體液中或存在于細(xì)胞膜表面的分子統(tǒng)稱為 免疫因子 。約占 5~10%。 B 淋巴細(xì)胞： 在骨髓（骨髓樣組織）中分化成熟，稱骨髓依賴淋巴細(xì)胞。 T 淋巴細(xì)胞： 它由一群功能不同的異質(zhì)性淋巴細(xì)胞組成，在胸腺內(nèi)分化成熟，為胸腺依賴性淋巴細(xì)胞 (Thymus dependent lymphocyte)的簡稱。 c. 教材中的腸道淋巴組織也屬于 MALT的范疇。 c. 硬骨魚類受免疫接種后，其 脾、腎 和 肝 等器官的黑色素巨噬細(xì)胞增多，并與淋巴細(xì)胞和抗體生成細(xì)胞聚集在一起形成黑色素巨噬細(xì)胞中心，它的作用有：參與體液免疫和炎癥反應(yīng)；對異物進(jìn)行貯存、破壞和脫毒；記憶細(xì)胞原發(fā)中心；保護(hù)組織免受自由基損傷。 c. 為 T、 B細(xì)胞移居和接受抗原刺激后發(fā)生免疫應(yīng)答、產(chǎn)生免疫效應(yīng)等重要場所。脾索主要是 B細(xì)胞集居區(qū)，也有巨噬細(xì)胞和樹突狀細(xì)胞。 b. 白髓：由小動(dòng)脈周圍淋巴鞘和鞘內(nèi)淋巴泡兩部分組成。 魚類胸腺的結(jié)構(gòu)與功能隨著季節(jié)和年齡的變化而變化。它分為頭腎（前腎）和中腎（后腎、體腎）二部分。 正常： 識別和消除突變細(xì)胞 異常： （過低）易生惡性腫瘤、病毒持續(xù)感染。 免疫缺陷癥： 指機(jī)體免疫系統(tǒng)由于先天性發(fā)育不良或后天遭受損傷所致的免疫功能降低或缺乏的系統(tǒng)綜合癥。 2) 抗體： 機(jī)體免疫活性細(xì)胞受抗原刺激后，在體液中出現(xiàn)的由漿細(xì)胞產(chǎn)生的一類能與相應(yīng)抗原發(fā)生特異性結(jié)合的球蛋白。第一節(jié) 海水魚類及其他動(dòng)物的免疫概念 一、水產(chǎn)動(dòng)物免疫及其主要功能 1 . 水產(chǎn)動(dòng)物免疫 1）免疫（ Immunis?Immune, Immunity）： 指生物機(jī)體識別自身和異己物質(zhì)，對自身物質(zhì)形成天然免疫耐受，對異己物質(zhì)產(chǎn)生清除作用的一種生理反應(yīng) . 病害角度： 免疫是機(jī)體對病原產(chǎn)生抵抗力，使其免受感染的過程。 Chapter 3. 免疫學(xué)原理 與 應(yīng)用 2. 抗原與抗體的概念 1) 抗原： 凡是能夠刺激機(jī)體產(chǎn)生抗體和致敏淋巴細(xì)胞，并能與之結(jié)合引起特異性免疫反應(yīng)的物質(zhì)，稱為抗原。 變態(tài)反應(yīng) 是由不同的免疫機(jī)理導(dǎo)致的對機(jī)體不利的生理過程。 3) 免疫監(jiān)督： 機(jī)體免疫系統(tǒng)識別、清除體內(nèi)突變、畸形的細(xì)胞和病毒感染細(xì)胞的一種生理保護(hù)作用。 真骨魚的腎臟也屬骨髓樣組織，是重要的淋巴器官，具造血功能。魚類的胸腺是 T細(xì)胞分化成熟為具免疫活性的 T細(xì)胞的場所， T細(xì)胞移至外周免疫器官后，可接受抗原刺激增殖分化產(chǎn)生免疫效能。 A. 人類 1) 脾的結(jié)構(gòu)和細(xì)胞組成： a. 脾表面由結(jié)締組織包裹， 被膜 向?qū)嵸|(zhì)內(nèi)延伸成若干 小梁 ，脾實(shí)質(zhì)由 紅髓 和 白髓 組成，兩者交界處為 邊緣區(qū) （又稱為移行區(qū)）。 c. 紅髓：分布在白髓周圍，由 脾索 和 脾竇 組成。 免疫： 水產(chǎn)動(dòng)物免疫的基本概念 2) 脾的功能： a. 在胚胎期為造血干細(xì)胞增殖分化的場所，具有造血功能； b. 是血液的濾過器，可以清除血中的病原微生物和自身衰老損傷的血細(xì)胞。 b. 與頭腎相比，脾在體液免疫反應(yīng)中處于相對次要的地位，其受抗原刺激后的增殖反應(yīng)以彌散的方式發(fā)生在整個(gè)器官上。 b. 魚類 MALT相對于其系統(tǒng)免疫系統(tǒng)有一定自主性，在其免疫接種方法選擇和改進(jìn)中有實(shí)際意義： 口服免疫 后，頭腎、血液和腸都出現(xiàn) ASC，但鰓中和皮膚粘液中無； 肛門插管 接種抗原后可誘導(dǎo)腸、皮膚粘液和膽汁中產(chǎn)生特異性抗體，但血清中無； 腹腔免疫 4周后，頭腎、血液和鰓中抗體分泌同時(shí)達(dá)到峰值，而腸只有到第 7周才有顯著反應(yīng)；顆?？乖?浸泡免疫 時(shí)