史上最強生物課件動物細胞工程-全文預(yù)覽
【正文】 體內(nèi)培養(yǎng) 體外培養(yǎng) 單克隆抗體 —— 化學性質(zhì)單一、特異性強 ?抗體 ?抗原 ?應(yīng)答 ?抗體的不純性 動物細胞受到抗原刺激 ,引起免疫反應(yīng)產(chǎn)生的球蛋白 . 不是自己的而又能引起免疫應(yīng)答反應(yīng)的物質(zhì)就是抗原 . 一種抗原有多種不同的決定簇 ,刺激的是多種 B細胞 ,作用于不同的 B細胞后 ,會產(chǎn)生多種抗體 , 這是多克隆的 , 故不純 ! 抗原 B細胞 漿細胞 抗體 刺激 ?怎么才能得到純的抗體 ? ?光純還不行 ,還要大量 .怎么辦 ? ?但，有 問題 : ?找，什么細胞能無限繁殖呢 ? ?思路就出來了 : 要想獲單一的純抗體 ,就必須從一個 B細胞出發(fā) . 讓 B細胞大量繁殖 (克隆 )就可以產(chǎn)生大量抗體了. B細胞是不能無限繁殖的 .怎么辦 ? 癌 ! 只有癌細胞 . 但它不能產(chǎn)生抗體 . 癌細胞能無限繁殖 ,但不能產(chǎn)生抗體 .B細胞能產(chǎn)生抗體 ,但不能大量繁殖 .融合呀 !只要將兩個細胞融合即可互補 . 雜交瘤細胞 HAT篩選 ? McAb 大量培養(yǎng) PEG誘導(dǎo)細胞融合 免 疫 B 脾 礦物油 骨髓瘤 瘤 問題 : 在培養(yǎng)體系中 , 有 4種細胞 . B細胞、瘤細胞 ,和雜交細胞。 你想到篩選雜交瘤細胞的方案了么？ 小資料： 在培養(yǎng)液中加入氨基蝶呤，收集增殖細胞！ 加入氨基嘌呤后，使 D 合成途徑阻斷，僅有 D 合成途徑的骨髓瘤細胞及其彼此融合的細胞就不能增殖， 但人淋巴細胞和骨髓瘤細胞融合后的雜種細胞因為可以利用淋巴細胞中的 S 途徑合成DNA而增殖。 ⑵ 如何誘導(dǎo)融合？ 加入聚乙二醇 （ PEG） ⑴ 如何得到 B淋巴細胞？ 單克隆抗體的 過程 ⑶ 細胞兩兩融合后，有哪些類型？ BB B瘤 (雜交瘤細胞 ) 瘤 瘤 ⑷ 如何篩選出雜交瘤細胞？ 單克隆抗體制備過程中，總共有兩次篩選，第一次篩選出雜交瘤細胞，第二次篩選出能產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細胞，兩次篩選的原理和方法是不相同的。 特點： 產(chǎn)量低、純度低、特異性差、反應(yīng)不夠靈敏。 各種抗原的決定簇數(shù)目不同，同一抗原的決定簇可能有多種。 融合后的雜交細胞經(jīng)過有絲分裂后仍能形成兩個完整的雜交細胞 ： ⑴突破了有性雜交的局限，使遠緣雜交成為可能； ⑵為制造 單克隆抗體 開辟了新途徑 使用相應(yīng)的抗體檢測乙肝病毒 —— 抗原 醫(yī)院一般怎樣檢測人體內(nèi)是否存在乙肝病毒？ 乙肝病毒模式圖 凡能夠引起機體產(chǎn)生特異性 免疫應(yīng)答的物質(zhì)叫做抗原 。 ⑴自然發(fā)生： 受精卵 ⑵人工誘導(dǎo)： 利用誘導(dǎo)劑誘導(dǎo)動物細胞融合 誘導(dǎo)因素：聚乙二醇、 滅活的病毒 或電激等。 動物血清 ？ 體溫和 PH都應(yīng)與 動物體內(nèi)環(huán)境 相似。 ？培養(yǎng)基中的成分有何特點？ 培養(yǎng)基是液體的，成份與 動物內(nèi)環(huán)境 相似。 人 — 鼠細胞是怎樣實現(xiàn)融合的？動物細胞融合有什么實踐意義呢？ 三、 動物細胞融合與單克隆抗體 ： 是指兩個或兩個以上的細胞融合為一個細胞的過程。 因為滅活的病毒能使細胞膜上的蛋白質(zhì)分子和脂質(zhì)分子重新排布，細胞膜打開，細胞發(fā)生融合 正在融合的 淋巴細胞
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