沉淀反應(yīng)與凝集反應(yīng)-全文預(yù)覽
【正文】 驗(yàn)是以聚苯乙烯膠乳作為載體 協(xié)同凝集反應(yīng)（ coaggoltination）是以一種金黃 色葡萄球菌作為載體（它的菌體細(xì)胞壁中含有 A蛋 白（ SPA）。 免疫學(xué)及免疫學(xué)檢驗(yàn) 根據(jù)致敏載體用的是抗原或抗體以及凝 集反應(yīng)的方式，間接凝集反應(yīng)可分為： 正向間接凝集試驗(yàn) 反向間接凝集試驗(yàn) 正向間接凝集抑制試驗(yàn) 反向間接凝集抑制試驗(yàn) 免疫學(xué)及免疫學(xué)檢驗(yàn) 1。 免疫學(xué)及免疫學(xué)檢驗(yàn) 凝集反應(yīng)可分為： 直接凝集反應(yīng) 間接凝集反應(yīng) 免疫學(xué)及免疫學(xué)檢驗(yàn) 一）直接凝集反應(yīng) 細(xì)菌、螺旋體和紅細(xì)胞等顆?？乖?，在適當(dāng)電解質(zhì)參與下可直接與相應(yīng)抗體結(jié)合出現(xiàn)凝集，稱為直接凝集反應(yīng)（ direct agglutination）?？贵w濃度保持不變，峰的高度與抗原量呈正比，用標(biāo)本中的抗原含量。 免疫學(xué)及免疫學(xué)檢驗(yàn) 對(duì)流電泳示意圖 免疫學(xué)及免疫學(xué)檢驗(yàn) 三）、火箭免疫電泳 火箭免疫電泳技術(shù)又稱作單向電泳擴(kuò)散免疫沉淀試驗(yàn)，它是由單向擴(kuò)散發(fā)展起來的一項(xiàng)定量技術(shù)，實(shí)質(zhì)上是加速度的單向擴(kuò)散。 免疫學(xué)及免疫學(xué)檢驗(yàn) 免疫學(xué)及免疫學(xué)檢驗(yàn) 免疫學(xué)及免疫學(xué)檢驗(yàn) 常用此法進(jìn)行血清的蛋白種類分析。這種技術(shù)有兩大優(yōu)點(diǎn)，一是加快了沉淀反應(yīng)的速度，二是將某些蛋白組分利用其帶電荷的不同而將其分開，再分別與抗體反應(yīng)，以此作更細(xì)微的分析。 (2) Fehcy曲線：適用于分子抗原 ， 擴(kuò)散時(shí)間較短 ， 使用半對(duì)數(shù)坐標(biāo)紙作圖 ， 抗原量的對(duì)數(shù)和擴(kuò)散圈直徑之間呈線性關(guān)系 。 免疫學(xué)及免疫學(xué)檢驗(yàn) (二 ) 操作步驟 1. 將抗體和 %瓊脂糖 50~56℃ 混合 ， 即刻傾注成平板 。常用的凝膠有瓊脂 、 瓊脂糖 、 葡聚糖或聚丙稀酰胺凝膠等 。 2) 將抗體致敏膠乳溶液和待測(cè)抗原 、 不同濃度的抗原標(biāo)準(zhǔn)品反應(yīng)一段時(shí)間 ， 測(cè)吸光度值 。 根據(jù)待檢抗原的濁度值 ， 查出抗原含量 。 復(fù)合物的濁度不再受時(shí)間的影響 ， 但反應(yīng)復(fù)合物聚合產(chǎn)生絮狀沉淀之前 (大約反應(yīng)數(shù)十分鐘 )進(jìn)行濁度測(cè)定 。 3) 以抗原標(biāo)準(zhǔn)品含量為橫坐標(biāo) ， RU值為縱坐標(biāo) ， 于普通坐標(biāo)紙上繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線 。 峰值出現(xiàn)的時(shí)間與抗體的濃度及其親和力直接相關(guān) 。 免疫學(xué)及免疫學(xué)檢驗(yàn) 1. 速率散射比濁法 (1) 原理：是一種抗原抗體結(jié)合動(dòng)態(tài)測(cè)定法 。 免疫學(xué)及免疫學(xué)檢驗(yàn) 3. 方法評(píng)價(jià) 敏感度高于單相瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn) 5~10倍，批內(nèi)、批間重復(fù)性較好，變異系數(shù)10%，操作簡(jiǎn)便快速， 1h可報(bào)告結(jié)果。 免疫學(xué)及免疫學(xué)檢驗(yàn) 2. 操作步驟 (1) 用稀釋緩沖液將待檢樣品和標(biāo)準(zhǔn)品按規(guī)定稀釋 ， 取一定量加至測(cè)定管中 。 臨床常用 3種微量免疫技術(shù) ， 即透射比濁法(transmission turbidimetry) 、 散射比濁法(nephelometry)和免疫膠乳比濁法 (immunolatex turbidimetry)， 借助多種自動(dòng)化分析儀器來完成 。只能定性，不能定量、敏感性較低 (3~20mg/L)，對(duì)含有多個(gè)抗原抗體對(duì)的反應(yīng)系統(tǒng)缺乏分辨力。 3. 置沉淀管于室溫下使其反應(yīng)， 1~5min內(nèi) 在兩界面間呈現(xiàn)乳白色沉淀環(huán)為陽性。 免疫學(xué)及免疫學(xué)檢驗(yàn) (一 ) 原理 把抗原溶液小心地加于已含抗體溶液的細(xì)試管液面上。 3. 方陣滴定法 抗原和抗體同時(shí)稀釋 ， 亦稱棋盤 (checkerboard)滴定法 ， 是前二法的結(jié)合 ， 可一次完成抗原和抗體的滴定并找出抗原 、 抗體的最適比 。 (2) 各管加入一定濃度的適量抗血清 。 曾用于測(cè)定梅毒抗體的 Kahn試驗(yàn)是絮狀沉淀的代表試驗(yàn) ， 現(xiàn)今已被更簡(jiǎn)便而敏感的USR或 RPR方法替代 。 免疫學(xué)及免疫學(xué)檢驗(yàn) 根據(jù)沉淀反應(yīng)的介質(zhì)和檢測(cè)方法的不同 ,沉淀反應(yīng)可分為 : 液相內(nèi)的沉淀反應(yīng) 凝膠內(nèi)
環(huán)評(píng)公示相關(guān)推薦
鄂ICP備17016276號(hào)-1