【正文】
正丁醇提(普) 正丁醇提(原料) 乙醇浸提(普) 乙醇浸提(原料) 蘆丁 R2 從 表 10 可以看出: 曬青毛茶和普洱茶的不同溶劑提取物的水溶性部分及蘆丁對[DPPH﹒ ]自由基 均有一定的清除作用,反應體系中在濃度為 ~,隨著待測樣濃度的增大其抑制率逐漸增大。 177。 177。 177。 177。 水提物(原料) 177。 177。 177。 177。 177。 正丁醇提(原料) 177。 177。 177。 177。 177。 乙醇浸提(普) 177。 177。 177。 177。 表 10 不同 溶劑提取物不同濃度對 DPPH 自由基清除率的影響 Table 10 Effects of different solvents extracts of different concentrations on the effect of scavenging DPPH Radical 樣品 不同濃度下的提取物對 [DPPH﹒ ]自由基的清除率(%) (平均值ⅹ177。 曬青毛茶乙酸乙酯提取物兒茶素單體含量的分析 根據(jù)上述各樣品對羥基自由基的抑制效果的分析,可看出曬青毛茶的乙酸乙酯提取物具有較強的抑制能力。 圖2 各樣品在相同濃度下對羥基自由基的抑制F i g . 2 I n h i b i ti o n o f th e h y d r o x y l r a d i c a l o f s a m p l e i n th e s a m ec o n c e n tr a ti o n0102030405060708090100乙酸乙酯提(原料)乙酸乙酯提(普)醇沉(原料)醇沉(普)正丁醇提(普)正丁醇提(原料)醇溶液(普)醇溶液(原料)水提物(普)水提物(原料)乙醇浸提(原料)乙醇浸提(普) 氯仿提?。ㄆ眨┞确绿崛。ㄔ希¬c抑制率/% 17 由圖 2 可知,在 ,曬青毛茶的乙酸乙酯提取物抑制率達到了 177。從表 8 可以看出 各種提取物 及其對照 Vc 的清除率與濃度的關系來說,各種提取物的相關性均不是很好,曬青毛茶的 水提物與 普洱茶的正丁醇提取物 的相關性較好,相關系數(shù) 分別為 達到 和 。 普洱茶 水提物在較低濃度 , 清除能力達到 177。 OH)均具有相對較強的清除能力,且抑制率隨著各樣品濃度的增大而呈增大的趨勢。 177。 177。 177。 氯仿提(普) 177。 177。 177。 177。 177。 177。 — 醇溶液(原料) 177。 — 醇溶液(普) 177。 — 正丁醇提(原料) 177。 — 正丁醇提(普) 177。 — 醇沉(普) 177。 — 醇沉(原料) 177。 — 乙酸乙酯提(普) 177。 SD) 乙酸乙酯(原料) 177。 OH)的抑制效果,見表 7。即可看出曬青毛茶的正丁醇提取物及乙酸乙酯提取物的總抗氧化能力均大于對照蘆丁,且正丁醇提取部分的總抗氧化能力大于乙酸乙酯提取部分。由表 6 可看出 各樣品及對照的還原力與濃度之間的呈現(xiàn)良好的線性關系,相關系數(shù)基本能夠達到 以上。在濃度為 , 原料的正丁醇提取物 吸光值就達到177。 。其中,在濃度為 ~ ,氯仿提取物的還原力最低,吸光值最高只到 177。 177。 蘆丁 177。 177。 177。 177。 177。 SD) 正丁醇提(普) 177。 177。 177。 177。 醇沉(原料) 177。 177。 177。 177。 177。 乙酸乙酯提(原料) 177。 177。 177。 177。 12 表 4 不同溶劑提取物 不同 濃度還原力的評價 Table 4 Evaluation of reducing power of different solvent extraction of different concentrations 樣品 不同濃度下的吸光值(平均值 x177。各樣品水分含量的大小除了與樣本本身的結構有關外,主要與各樣品的烘干溫度和時間有關。即空白值。測定吸光度。由于自氧化的速率依賴于 02的濃度,消除 02則抑制自氧化反應,阻止中間產(chǎn)物的積累,從而評價受試物抑制 02的能力 [13]。 實驗原理 利用某些體系在氧化過程中有超氧陰離子自由基( 02)的生成, 02與某些化合物的作用,產(chǎn)生具有特定吸收的有色物質(zhì),利用分光光度計進行測定。將 mg/mL[DPPH ]貯備液, 現(xiàn)配現(xiàn)用 。 ]自由基的清除效果,計算其抗氧化能力。 ] 乙醇溶液中加入 待測樣液 后, 待測樣液 可以與 [DPPH ]是一種穩(wěn)定的以氮為中心的自由基,在 517nm波長處有最大吸收。吸光值越大,則清除 OH的多少,吸光度越大則 實驗原理 按 Smirnoff方法改進,用 FeSO4+ H2O2產(chǎn)生 普洱茶及其原料不同溶劑提取物對 1%鐵氰化鉀溶液 的配制:準確稱取鐵氰化鉀 ,加水溶解并定容到 250 mL即可。因部分樣品提取的量相對較少而采用此方法。 不同溶劑提取物均進行減壓濃縮 (回收溫度一般為:乙醇提取物, 65℃;水提物,75℃;乙酸乙酯提取物, 50℃;氯仿提取物, 50℃;正丁醇提取物, 70℃),經(jīng)濃縮的樣液置于 55℃烘箱中烘干備用。 6表 1 主要藥品和試劑 Table 1 Main drugs and reagants 藥品和試劑 出廠廠家 無水乙醇 天津市化學試劑三廠,分析純 乙酸乙酯 天津市北方天醫(yī)化學試劑廠 氯仿 天津市化學試劑三廠 正丁醇 天津市標準科技有限公司 濃鹽酸 上海吉象化學試劑有限公司,分析純 鄰苯三酚即焦性沒食子酸 國藥集團化學試劑有限公司 Tris即三(羥甲基)胺基甲烷 國藥集團化學試劑有限公司 FeSO4目前,國內(nèi)主要是對普洱茶藥理作用、保健功效以及普洱茶品質(zhì)與化學成分關系進行了大 量研究,而在普洱茶的抗氧化性方面,國內(nèi)外 鮮有研究報道。普洱茶渥堆的實質(zhì)是以曬青毛茶 (綠 茶 )的內(nèi)含成分為底物,在微生物分泌的胞外酶的酶促作用、微生物呼吸代謝產(chǎn) 生的熱量和茶葉水分的濕熱協(xié)同下,發(fā)生的茶多酚氧化、縮合、蛋白質(zhì)和氨基酸 的分解、降解,碳水化合物的分解以及各產(chǎn)物之間的濕熱、縮合等一系列反應, 因此普洱茶 5與綠茶組成成分及抗氧化作用方面有較大差異。 Lin, 研究表明普洱茶提取物可有效地在 Fenton反應體系中發(fā)揮自由基清除作用,保 護 DNA超螺旋結構,防止鏈斷裂 [4]。其中,以多酚類氧化產(chǎn)物為主的水溶性色素茶褐素是普洱茶湯中的最主要成分,是形成普洱茶獨特風味的重要成分。普洱茶性溫和,有解渴提神、幫助消化、清胃生津、醒酒減肥、刮腸通泄、利尿解毒、降脂健身、降壓抗癌等功效。目前國內(nèi)外有關綠茶和紅茶的抗氧化作 用及機理研究報道很多。 4追溯歷史,國人飲茶已經(jīng)數(shù)千年。羥自由基為高反應性自由基。自由基產(chǎn)生過多或清除過慢,它便會通過攻擊生命大分子物質(zhì)及各種細胞,造成機體在分子水平、細胞水平及組織器官水平的各種損傷,加速機體的衰老進程并誘發(fā)各種疾病,包括人體免疫功能的降低、衰老、癌癥、肺氣腫、老年性眼睛衰老 (特別是白內(nèi)障 )以及炎癥等。這些物質(zhì)主要包括酚類物質(zhì)、葉綠素、胡蘿卜素及維生素等。)、 DPPHOH and NO2 free radical of extraces of sundried green tea by ethylacetate was very well. the strong scavenging effect of the alcohol by Puerh tea extract on [DPPH ?] radicals was of scavenging the superoxide radical(O2) of extraces of sundried green tea by water and alcoholpart more pronounced. Proved that extracts of Puerh tea and sundried green tea had good antioxidant activity . Key words: puerh tea。OH,DPPH曬青毛茶 的水提物和醇沉部分對超氧陰離子自由基( O2其中, 曬青毛茶的乙酸乙酯提取部分對 羥自由基( 普洱茶及其原料均具有一定的清除或抑制自由基的能力。 OH)、超氧陰離子自由基( O2采用不同溶劑(乙醇、乙酸乙酯、氯仿、正丁醇等)對曬青毛茶與普洱茶進行提取,得到不同的溶劑提取物,以標準蘆丁或 Vc 為對照,對不同溶劑提取物清除 DPPH 自由基、羥基自由基(還原力與濃度呈現(xiàn)良好的線性關系。在還原力及清除羥基自由基、超氧陰離子自由基方面,曬青毛茶提取物清除能力大于普洱茶提取物。自由基具有較強的清除作用。 關鍵詞 : 普洱茶; 曬青毛茶 ; 體外抗氧化活性 2Antioxidant activity assessment of the extractions from Yunnan puerh tea using different solvents He Xiang (Faculty of Food science and technology, Yunnan Agricultural University, Kunming 650201) ABSTRACT In this paper,Yunnan Puerh tea and sundried green tea for research. Evaluation of the antioxidative activity of different extracts of Puerh tea and sundried green tea,using different solvents such as ethanol, ethyl acetate, chloroform and alcohol were effects different extraces on the scavenging effects of O2, OH, O2 better than puerh results showed that the capacity of scavenging )、羥自由基( OH目前所公認的生物抗氧化劑主要是指可以清除自由基,抑制脂質(zhì)過氧化的生物活性物質(zhì)。在正常情況下,人體內(nèi)的自由基是處于不斷產(chǎn)生與清除的動態(tài)平衡之中,確保機體有效、正常的生命活動。 其中, 生物體內(nèi)氧化還原反應中,大致有 2% ~ 5%的氧會產(chǎn)生超氧自由基,超氧自由基的毒性是機體發(fā)生氧中毒的主要原因,表現(xiàn)在使核酸鏈斷裂、多糖解聚和不飽和脂肪酸過氧化作用,進而造成遺傳突變、膜損傷、酶系失靈、線粒體氧化磷酸化作用改變等 一 系列變化。羥自由基還與衰老、腫瘤、輻射損傷和細胞吞噬等有關,羥自由基抑制率是反映藥物抗氧化作用的重要指標?,F(xiàn)代研究表明:普洱茶具有一定的保健功能。 普洱茶系采用大葉種茶鮮葉制成的曬青毛茶為原料,經(jīng)渥堆后發(fā)酵、陳化等特殊工序加工而成,具有干茶色澤褐紅、條索粗壯、耐貯耐泡,茶湯紅濃明亮、陳香顯著、滋味濃厚回甘,葉底紅褐柔軟的特點。普洱茶通過其獨特的生產(chǎn)方式 — 渥堆發(fā)酵以及在貯藏陳化過程中,曬青毛茶原料中豐富的多酚類、糖類、蛋白質(zhì)等多種化合物在多種好氧和厭氧微生物以及水熱作用下發(fā)生一系列轉化。 Lin, 由基能力和抑制氧化氮自由基 (nitri