糠醛與5-羥甲基糠醛對蘋果酸發(fā)酵抑制的耐受性探究畢業(yè)論文-全文預(yù)覽
【正文】 蘋果酸發(fā)酵的影響，在相同的發(fā)酵液中分別添加等梯度 濃度 的糠醛 或 5羥甲基糠醛，在 恒溫?fù)u床中 以 200 r/min， 30℃ 條件 下發(fā)酵相同時間 。2H2O g/L、 FeSO4在超凈工作臺上，用劃線分離法在培養(yǎng)皿中分離出寄生曲霉，放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。脫毒優(yōu)化條件如表 21 表 21 脫毒優(yōu)化條件 分組 分組 優(yōu)化參數(shù) 1 2 3 4 5 活性炭濃度（ %） 1 2 \ 溫度（ ℃ ） 30 40 50 60 \ 時間（ min） 20 30 40 50 60 根據(jù)表 21 的方案 對小麥麩皮酸解液脫毒，并 測出脫毒后酸解液中糠醛與 5羥甲基糠醛的含量，制作出糠醛與 5羥甲基糠醛的活性炭吸附性曲線。然后將配置好的酸解液在 100℃ 下，酸解 3 個小時 [4]。 經(jīng)測量不同濃度梯度的蘋果酸相對應(yīng)的 OD 值如圖 23 圖 23 蘋果酸的標(biāo)準(zhǔn)曲線 從該標(biāo)準(zhǔn)曲線可以看出，蘋果酸濃度在 ～ mg/L 之間對應(yīng)的吸光度基本呈線性相關(guān)，得到蘋果酸 標(biāo)準(zhǔn)回歸方程為： y = + ； R = ，其中 y 為吸光度， x 為蘋果酸濃度。 = 0120 5 10 15 20OD284 5羥甲基糠醛（ mg/L） 合肥師范學(xué)院 2021 屆本科生畢業(yè)論文（設(shè)計） 5 準(zhǔn)確稱取蘋果酸標(biāo)準(zhǔn)樣品 mg， 用蒸餾水定容于 100 mL 容量瓶 ， 所得到濃度為 mg/L 的標(biāo)準(zhǔn)液。 蘋果酸標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備與測定方法 蘋果酸的檢測利用的是 Goodban 法 [12]。 樣品測定方法：吸取樣品 1 mg/L 樣品，用 50%乙醇溶液稀釋（稀釋后糠醛含量在~ mg/L 之間） ,混勻， 分光光度法測定 OD276處吸光值，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)回歸曲線方程計算出樣品中糠醛含量。7H2O 分析純（ AR） 西隴化工股份有限公司 MnSO4 分析純（ AR） 上海上浦化工有限公司 合肥師范學(xué)院 2021 屆本科生畢業(yè)論文（設(shè)計） 3 實(shí)驗(yàn)用具與設(shè)備 實(shí)驗(yàn)用具： 500 mL 燒杯， 250 mL 錐形瓶， 100 mL 容量瓶，培養(yǎng)皿， 研缽 ，滴定管， 移液槍 實(shí)驗(yàn)設(shè)備： 實(shí)驗(yàn)設(shè)備 型號 生產(chǎn)廠商 電熱恒溫培養(yǎng)箱 DNP90 82BSⅢ 上海新苗醫(yī)療器械制造有限公司 恒溫水浴鍋 HH1 金壇市杰瑞爾電器有限公司 低速離心機(jī) TDL5A 上海楚柏實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司 可見分光光度計 722S 上海精密科學(xué)儀器有限公司 紫外分光光度計 UV762 上海精密科學(xué)儀器有限公司 氣浴 恒 穩(wěn)振蕩器 THZ82B 江蘇金壇市醫(yī)療儀器廠 立式壓力蒸汽滅菌鍋 LDZX50FB 上海申安醫(yī)療器械廠 電子分析天平 FA1604 上海衡平儀器廠 實(shí)驗(yàn)方法 糠醛、 5羥甲基糠醛與蘋果酸標(biāo)準(zhǔn)曲線制備與測定方法 糠醛 標(biāo)準(zhǔn)曲線制備與測定方法 標(biāo)準(zhǔn)曲線制備：準(zhǔn)確稱取 1 g 糠醛標(biāo)準(zhǔn)品，用 95%乙醇定容于 100 mL 容量瓶中，得到 1%糠醛標(biāo)準(zhǔn)貯備液 。 酸解小麥麩皮過程中 會產(chǎn)生糠醛、 5羥甲基糠醛等物質(zhì)，這些物質(zhì)會對后期菌種發(fā)酵蘋果酸利用糖化液有 抑制 影響，本文研究的是 酸解小麥麩皮過程中 糠醛、 5羥甲基糠醛含量特點(diǎn)，并且利用曲霉發(fā)酵制備蘋果酸的特性，在發(fā)酵過程中分別添加糠醛、 5羥甲基糠醛兩種物質(zhì)，研究這些物質(zhì)對曲霉發(fā)酵蘋果酸的影響及適應(yīng)濃度等。 其中，制備 L蘋果酸的微生物法有兩種，即 “ 一步發(fā)酵法 ” 和 “ 兩步發(fā)酵法 ” [2]。之后在此方面，日本進(jìn)行了大量的研究，并領(lǐng)先于世界水平，他們將生產(chǎn)的 L蘋果酸主要用于醫(yī)藥行業(yè) [5]。這種方法產(chǎn)量極低，后來發(fā)展有化學(xué)合成法，發(fā)酵法，酶催化法等多種方法 [2]。 根據(jù)研究所得的結(jié)果可以對發(fā)酵制備蘋果酸的條件進(jìn)行改善，可以提高曲霉發(fā)酵蘋果酸 產(chǎn)酸 率，使得蘋果酸生產(chǎn)量得到提升。有文獻(xiàn)指出可以對小麥麩皮進(jìn)行烯酸處理 ， 在高溫條件下酸解小麥麩皮纖維，可產(chǎn)生木糖、葡萄糖、阿拉伯糖等單糖，且糖含量以及糖化率較理想 [4]，酸解小麥麩皮所產(chǎn)生的單糖可作為發(fā)酵生產(chǎn) L蘋果酸的原料。近幾年，國內(nèi)外對于 L蘋果酸的需求量越來越大 [3]。以葡萄糖為碳源，添加 不同濃度的 糠醛與 5羥甲基糠醛 進(jìn)行蘋果酸發(fā)酵 ，發(fā)現(xiàn) 它們對蘋果酸發(fā)酵的抑制作用與其濃度呈正相關(guān)。通過 活性炭對 小麥麩皮酸解液 脫毒，研究活性炭濃度、溫度和時間對酸解液中糠醛、 5羥 甲 基糠醛脫毒處理效果， 發(fā)現(xiàn)在活性炭 含量 為 1%、 30℃ 、 30 min 條件下脫毒效果最優(yōu) 。目前，在高檔飲料與食品行業(yè)， L蘋果酸已經(jīng)被廣泛應(yīng)用 ，其也 用于治療肝功能不全、肝衰竭和貧血等疾病，已經(jīng)在醫(yī)藥上有著重要的作用。我國每年生產(chǎn)的小麥麩皮約有 2021萬噸，若這些小麥麩皮中的纖維物質(zhì)能夠得到有效利用，則小麥麩皮的經(jīng)濟(jì)價值和社會效應(yīng)將會得到很大提升。 通過糠醛、 5羥甲基糠醛等物質(zhì)對曲霉發(fā)酵蘋果酸的影響研究，得到這些物質(zhì)在蘋果酸發(fā)酵過程中影響的條件以及適應(yīng)濃度，對于日后利用小麥麩皮酸解后發(fā)酵有著重要的指導(dǎo)意義。 L蘋果酸最早期的生產(chǎn)方法是提取法，是從生物代謝過程中提取出的。 1959年，日本的 Kitahara等利用短乳桿菌產(chǎn)生的富馬酸酶催化化合制取富馬酸轉(zhuǎn)化成了 L蘋果酸，使得蘋果酸的研究進(jìn)入了一個新的時期 [6,7]。但是人們對食品安全 越來越關(guān)注，以及對自身的健康意識越來越強(qiáng)，人們將目光逐漸轉(zhuǎn)入到 可在生物資為原料的全生物法發(fā)酵制備 L蘋果酸。我們可以將這些 單糖用于發(fā)酵生產(chǎn)Ｌ 蘋果酸，這樣就得到一種生產(chǎn)制備 L蘋果酸的新途徑，并且原料成本低廉，工藝較簡單，設(shè)備要求低，是一種可行的生產(chǎn)路線。2H2O 分析純（ AR） 淮南市化學(xué)試劑廠 FeSO4 = 0120 2 4 6 8 10 12OD276 糠醛 （ mg/L） 合肥師范學(xué)院 2021 屆本科生畢業(yè)論文（設(shè)計） 4 從該標(biāo)準(zhǔn)曲線可以看出，糠醛濃度在 ～ mg/L 之間對應(yīng)的吸光度基本呈線性相關(guān)，得到 糠醛標(biāo)準(zhǔn) 回歸 方程為： y = 01899x ； R = ，式中： y 為吸光度： x 為糠醛的濃度。 樣品測定方法：吸取樣品 1 mg/L 樣品，用蒸餾水稀釋（稀釋后 5羥甲基糠醛含量在~ mg/L 之間） ,分光光度法測定 OD284處吸光值，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)回歸曲線方程計算出樣品中 5羥甲基糠醛糠醛含量。 y = + R178。根據(jù)所測吸光值繪制蘋果酸標(biāo)準(zhǔn)曲線，建立蘋果酸標(biāo)準(zhǔn)回歸曲線方程。對上述處理后的 小麥麩皮進(jìn)行酸解，按照下列濃度配置酸解液：硫酸濃度為
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