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正文內(nèi)容

20xx年醫(yī)學(xué)專(zhuān)題—第7章-細(xì)菌的遺傳分析(文件)

 

【正文】 同時(shí)轉(zhuǎn)化的概率是它們的單獨(dú)轉(zhuǎn)化的概率的乘積,這種概率是很低的。 d224。d236。 若順序是p-o-q,這樣p和o必將共轉(zhuǎn)化,因?yàn)樗鼈儽萷和q靠得更緊密。 su224。,基因(jīyīn)順序和圖距的計(jì)算:,注意:計(jì)算trp2和his2之間的重組值時(shí),685個(gè)trp2- his2-是與供體 trp2+ his2+這2個(gè)基因之間未發(fā)生交換的細(xì)胞(x236。n),受體菌 染色體DNA,3基因片段轉(zhuǎn)化(zhuǎnhu224。jūn)的轉(zhuǎn)導(dǎo): 轉(zhuǎn)導(dǎo)就是以病毒作為載體把遺傳信息從一個(gè)細(xì)菌細(xì)胞傳到另一個(gè)細(xì)菌細(xì)胞。nr249。,普遍性轉(zhuǎn)導(dǎo)(zhuǎn dǎo),在噬菌體的裂解周期接近完成時(shí),病毒DNA被包進(jìn)蛋白質(zhì)外殼。zh236。nb225。,第五十四頁(yè),共六十八頁(yè)。兩個(gè)基因同在一起轉(zhuǎn)導(dǎo)就是共轉(zhuǎn)導(dǎo)(cotranduction)。y224。,第五十六頁(yè),共六十八頁(yè)。nx249。n)圖上順序和相對(duì)距離是:,共轉(zhuǎn)導(dǎo)率越高說(shuō)明兩基因(jīyīn)靠得越近,反之,越遠(yuǎn),第六十頁(yè),共六十八頁(yè)。,由溫和噬菌體進(jìn)行的轉(zhuǎn)導(dǎo)叫做局限性轉(zhuǎn)導(dǎo)。 例:λ噬菌體。轉(zhuǎn)導(dǎo)噬菌體約喪失25%的噬菌體基因,卻獲得了整合位置附近的細(xì)菌基因gal+ 等。 在產(chǎn)生λdgal+ 的宿主細(xì)胞中,λdgal+ 能復(fù)制,因?yàn)樗?suǒyǒu)的λ基因仍然存在:一些在噬菌體染色體上,另一些在宿主染色體上。jūn)產(chǎn)生兩種類(lèi)型的轉(zhuǎn)導(dǎo)子: 第一類(lèi): 野生型λ在正常的attλ位點(diǎn)整合,接著λdgal+ 噬菌體在普通的λ序列通過(guò)交換整合,產(chǎn)生一個(gè)雙重溶源(double lysogen)。野生型λ有一套完整的基因組可用于病毒的復(fù)制,所以它控制自己和λdgal+ 的切離和復(fù)制,這里野生型病毒作為一個(gè)helper phage。這樣(zh232。,本章(běn zhānɡ)要求,掌握 相關(guān)的中英文遺傳學(xué)名詞和術(shù)語(yǔ) 細(xì)菌遺傳物質(zhì)的傳遞規(guī)律 細(xì)菌染色體作圖的方法 了解 細(xì)菌基因組的特點(diǎn) 細(xì)菌同源重組的分子(fēnzǐ)機(jī)制,第六十六頁(yè),共六十八頁(yè)。n)批改,不交,第六十七頁(yè),共六十八頁(yè)。jūn)的細(xì)胞和基因組(掌握)。選擇在腺甘酸(ade)缺乏的培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的類(lèi)型。,。這種類(lèi)型的轉(zhuǎn)導(dǎo)子(λdgal+/gal- )是不穩(wěn)定的。③ 殺死Hfr 將不同接合時(shí)間的細(xì)菌(x236。ir243。w224。ng)的轉(zhuǎn)導(dǎo)子是穩(wěn)定的,因?yàn)榧?xì)菌染色體上只有一種類(lèi)型的gal+ 基因,沒(méi)有噬菌體基因的整合。這種新的溶菌液叫做高頻轉(zhuǎn)導(dǎo)(high frequency transduction, HFT)溶菌液。這種類(lèi)型的轉(zhuǎn)導(dǎo)子(λdgal+/gal- )是不穩(wěn)定的。,第六十四頁(yè),共六十八頁(yè)。,λ噬菌體局限性轉(zhuǎn)導(dǎo)(zhuǎn dǎo)機(jī)制,第六十三頁(yè),共六十八頁(yè)。該att λ附著點(diǎn)一邊是gal+,另一邊是bio+基因。nyǒu)一個(gè)特定的位置。y224。,轉(zhuǎn)導(dǎo)(zhuǎn dǎo)作圖例子,supC+和trpA+二基因共轉(zhuǎn)導(dǎo)形成第1和第2兩種轉(zhuǎn)導(dǎo)型, 因此,supC-trpA的共轉(zhuǎn)導(dǎo)頻率是(36+114 )/ 603 =0.25 同理:supC-pyrF 的共轉(zhuǎn)導(dǎo)頻率是:36/603=0.06 三基因在遺傳(y237。,轉(zhuǎn)導(dǎo)(zhuǎn dǎo)作圖例子,用E.coli trpA+supC+pyrF+供體細(xì)胞和trpA-sup C-pyrF-作為受體由P1噬菌體媒介轉(zhuǎn)導(dǎo)(zhuǎn dǎo)進(jìn)行三因子轉(zhuǎn)導(dǎo)雜交實(shí)驗(yàn)結(jié)果:,問(wèn):它們(tā men)的基因順序?共轉(zhuǎn)導(dǎo)頻率?,第五十八頁(yè),共六十八頁(yè)。由于兩個(gè)基因(a+b+或b+c+)共同進(jìn)入一個(gè)轉(zhuǎn)導(dǎo)顆粒的機(jī)率和它們之間的距離成反比。 A . 兩因子轉(zhuǎn)導(dǎo)(twofactor tranduction) 計(jì)算方法與共轉(zhuǎn)化計(jì)算方法類(lèi)似 B. 三因子轉(zhuǎn)導(dǎo)(threefactor tranduction),第五十五頁(yè),共六十八頁(yè)。l237。它感染細(xì)菌細(xì)胞,并將其內(nèi)含物-細(xì)菌的DNA片斷注入其中。,普遍性轉(zhuǎn)導(dǎo)(zhuǎn dǎo),轉(zhuǎn)導(dǎo)病毒(Transducing phages),其產(chǎn)生的頻率非常低(10-5~10-7)。 他們發(fā)現(xiàn)當(dāng)一個(gè)非溶源性的細(xì)菌細(xì)胞(供體)被 P1裂解時(shí),細(xì)菌的染色體DNA斷裂成一些片段,接著在細(xì)菌細(xì)胞中合成了噬菌體的外殼蛋白。整個(gè)過(guò)程包括: 吸附?? 侵入???? 生物合成?? 裝配 裂解釋放,第五十頁(yè),共六十八頁(yè)。,第四十九頁(yè),共六十八頁(yè)。,7.5.1 細(xì)菌(x236。,供體DNA片段(pi224。ili232。 結(jié)果表明沒(méi)有p和o的共轉(zhuǎn)化,說(shuō)明基因順序肯定是p-q-o,第四十四頁(yè),共六十八頁(yè)。這兩個(gè)基因也是彼此連鎖的。)) 問(wèn) b位點(diǎn)與a位點(diǎn)共轉(zhuǎn)化的頻率是多少?,第四十三頁(yè),共六十八頁(yè)。,第四十二頁(yè),共六十八頁(yè)。 相距很遠(yuǎn)的二個(gè)基因很難同時(shí)存在于一個(gè)DNA片段中,若兩個(gè)基因的二個(gè)片段同時(shí)進(jìn)入受體,一般不能同時(shí)進(jìn)行轉(zhuǎn)化的,按照(224。n)重組,形成雜合的DNA分子(heteroduplex DNA)。,轉(zhuǎn)化過(guò)程可以分為幾個(gè)步驟: 雙鏈DNA分子和細(xì)胞表面感受位點(diǎn)可逆性的結(jié)合。目的是增加受體細(xì)胞膜對(duì)供體DNA的可透性。jūn)的轉(zhuǎn)化作圖,細(xì)菌的轉(zhuǎn)化: DNA直接轉(zhuǎn)入受體細(xì)胞的過(guò)程。,7.5 細(xì)菌的轉(zhuǎn)化(zhuǎnhu224。這種接合重組作圖在短距離內(nèi)是有效的。jiāo)以時(shí)間(T)為單位的基因間距離基本上是一致的。 所以,它們的重組率,也可代表基因間的距離,RF,第三十七頁(yè),共六十八頁(yè)。 它們表明ade基因已轉(zhuǎn)入細(xì)胞。n)之一,產(chǎn)生重組子, 但不能生長(zhǎng),因?yàn)槭窍汆堰嗜毕菪?lac和ade之間單交換之二產(chǎn)生(chǎnshēng)重組子,lac和ade 之外雙交換,但產(chǎn)生的不是lac和ade間的重組子,第三十六頁(yè),共六十八頁(yè)。,以下雜交:Hfr lac+ ade+ strs F— lac- ade- strr ↓ 重組子 ade+ strr 在含有鏈霉素的基本培養(yǎng)基上,Hfr細(xì)菌被殺死,因其為strs 未雜交的F- lac-ade-strr 也死亡,因?yàn)槭窍汆堰嗜毕菪?所以選出來(lái)的重組子都是 ade+ strr 因?yàn)閍de+ 是在lac+之后(zhīh242。nɡ zǔ)作圖,基因距離較遠(yuǎn)用中斷雜交作圖是很有效的,但是基因距離較近,基因間轉(zhuǎn)移時(shí)間在2 min之內(nèi),那么僅用中斷雜交實(shí)驗(yàn)進(jìn)行基因定位就不十分精確可靠(kěk224。n)雜交作圖,第三十二頁(yè),共六十八頁(yè)。nr249。,Hfr 菌株 thr+ leu+ azir tonr lac+ gal+ strs F 菌株 thr- leu- azis tons lac- gal- strr,第三十頁(yè)
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