【正文】 初級(jí)、博士后、博士生、碩士生人員數(shù)由申請(qǐng)者負(fù)責(zé)填報(bào)（含申請(qǐng)者），總?cè)藬?shù)自動(dòng)生成。簽字：項(xiàng)目組主要參與者承諾： 項(xiàng)目組主要參與者承諾 參與者承諾我保證有關(guān)申報(bào)內(nèi)容的真實(shí)性。申請(qǐng)項(xiàng)目如獲資助，我單位保證對(duì)研 究計(jì)劃實(shí)施所需要的人力、物力和工作時(shí)間等條件給予保障，嚴(yán)格遵守國(guó)家自然科學(xué)基金委員會(huì)有 關(guān)規(guī)定，督促項(xiàng)目負(fù)責(zé)人和項(xiàng)目組主要參與者以及本單位項(xiàng)目管理部門按照國(guó)家自然科學(xué)基金委員 會(huì)的規(guī)定及時(shí)報(bào)送有關(guān)材料。目前國(guó)內(nèi)外絕大多數(shù)學(xué)者認(rèn)為，肝星狀細(xì)胞（hepatic stellate cell，HSC）激活是肝纖維化的關(guān)鍵，抑制HSC的激活對(duì)肝纖維化的防治有重要價(jià)值[1]。然而，由于Tet的劑量安全范圍較小，以往研究發(fā)現(xiàn)的抗肝纖維化有效劑量與中毒劑量比較接近，故成為限制其臨床應(yīng)用的重要因素。部分最新研究成果已經(jīng)整理成文發(fā)表在本領(lǐng)域有一定影響力的SCI索引源期刊上，并被SCI收錄(收錄號(hào) IDS Number: 963XN)[2]（相關(guān)文章參詳見(jiàn)申請(qǐng)人簡(jiǎn)歷及附件二、三）。Smad 7是HSC TGFβ信號(hào)通路的最主要負(fù)反饋調(diào)節(jié)信號(hào)分子，上調(diào)Smad 7是抑制TGFβ對(duì)HSC不良生物效應(yīng)的有措施之一[4]。③XXXXXXXXX。RGD在抑制TGFβ激活同時(shí)，還可阻止HSC與ECM結(jié)合，阻斷整合素信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)。結(jié)合我們對(duì)Tet藥理作用的分子機(jī)制的研究結(jié)果，不難發(fā)現(xiàn)，XXXXXXXX。迄今為止，尚未見(jiàn)到XXXXXXXXXXX。XXXXXXXXXX可以設(shè)想，如能取得預(yù)期效果，經(jīng)過(guò)良好設(shè)計(jì)的基礎(chǔ)研究后，這一XXXXXX應(yīng)用于臨床的時(shí)間不會(huì)太久，前景廣闊。29(11 Suppl): Dooley S, Hamzavi J, Breitkopf K, et prevents activation of hepatic stellate cells and liver fibrosis in 2003。 不同類型脂質(zhì)體的制備、技術(shù)參數(shù)優(yōu)化、物理性質(zhì)鑒定和脂質(zhì)體藥物包封率、載藥量、配體結(jié)合率鑒定與提高。 XXXXXXXX 對(duì)膽總管結(jié)扎和CCl4大鼠肝纖維化防治作用。 擬解決的關(guān)鍵問(wèn)題： 高藥物包封率、高配體修飾率的穩(wěn)定XXXXXXXX 制備。應(yīng)用XXXXXXXXXX。XXXXXXXXXXXX。具體方法如下：XXXXXXXXXX。第三部分 XXXXX修飾長(zhǎng)循環(huán)脂質(zhì)體與HSC體外結(jié)合活性 采用兩步膠原酶灌注和密度梯度離心法分離大鼠HSC，選擇靜止態(tài)和激活態(tài)的HSC，接種于6孔板上(105/mL)。(3)競(jìng)爭(zhēng)抑制XXXXXXXXXX。新鮮分離的HSC，體外培養(yǎng)48 h后，作為靜止期HSC用于下游實(shí)驗(yàn)，或培養(yǎng)1 w后消化傳代，繼續(xù)培養(yǎng)24 h后，作為活化的HSC用于下游實(shí)驗(yàn)。第五部分 XXXXXXXXXXXX(1)XXXXXXXX 在肝纖維化大鼠體內(nèi)的器官分布XXXXXXXXXX。(2)分組及處理XXXXXXXXXXXXXX。本研究是參閱大量文獻(xiàn)并結(jié)合自身以往深厚的肝纖維化防治研究基礎(chǔ)，特別是結(jié)合近四年國(guó)家自然科學(xué)基金資助研究成果，在XXXX 化學(xué)合成及功能研究、低劑量XXX抗肝纖維化作用和機(jī)制的前期工作基礎(chǔ)上，提出的多途徑、互補(bǔ)協(xié)同與靶向治療肝纖維化的新探索。本課題組由掌握以上技術(shù)的成員組成，相關(guān)技術(shù)已應(yīng)用于科研工作。實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)指導(dǎo)者、熟練技術(shù)人員及輔助人員等各司其職，可保障研究有條不紊的進(jìn)行。 本課題首次研究XXXXX生物小分子通過(guò)XXXXX與中藥粉防己堿相聯(lián)合，多途徑、互補(bǔ)與協(xié)同防治肝纖維化。 在體內(nèi)XXXXXXXXX，有效降低有效劑量、提高療效和降低副作用。承擔(dān)了包括國(guó)家自然科學(xué)基金在內(nèi)的各類科研項(xiàng)目20多項(xiàng)，先后獲省部級(jí)以上科技進(jìn)步獎(jiǎng)10項(xiàng)。該研究為指導(dǎo)粉防己堿在肝纖維化防治中應(yīng)用有重要價(jià)值。主要研究工作由本項(xiàng)目組成員參與并完成。已經(jīng)構(gòu)建成功的RGDM6P及相關(guān)技術(shù)要領(lǐng)，可直接用于本課題。 XXXXXXXXXXXX醫(yī)學(xué)研究所為本項(xiàng)目開(kāi)展提供了儀器、技術(shù)支持和信息服務(wù)平臺(tái)。本節(jié)將向申請(qǐng)者就申請(qǐng)書的撰寫要點(diǎn)提供若干參考建議。必須闡明申請(qǐng)者擬開(kāi)展本項(xiàng)研究工作的充足理由以及理論和學(xué)術(shù)意義。擬解決的關(guān)鍵問(wèn)題要清楚，避免漏寫此項(xiàng)。要注意研究條件的特色不能完全代表項(xiàng)目的研究特色，更不能代表新穎的學(xué)術(shù)思想。預(yù)期進(jìn)展可給出一個(gè)大致的設(shè)想。關(guān)于研究基礎(chǔ)與工作條件工作基礎(chǔ)指申請(qǐng)者和項(xiàng)目組主要成員與本項(xiàng)目有關(guān)的研究工作積累以及已取得的研究工作成績(jī)，不是指所在單位研究集體或者導(dǎo)師的工作。申請(qǐng)者和項(xiàng)目組主要成員正在承擔(dān)的科研項(xiàng)目情況，包括自然科學(xué)基金項(xiàng)目和其他國(guó)家科技計(jì)劃項(xiàng)目，要注明項(xiàng)目的名稱和編號(hào)、經(jīng)費(fèi)來(lái)源、起止年月、負(fù)責(zé)的內(nèi)容等，為了使評(píng)議人能夠了解擬申請(qǐng)的項(xiàng)目與正在承擔(dān)的項(xiàng)目的關(guān)系與區(qū)別，應(yīng)對(duì)正在承擔(dān)的項(xiàng)目的研究任務(wù)和重點(diǎn)給出簡(jiǎn)單的說(shuō)明。申請(qǐng)者簡(jiǎn)歷必須包括申請(qǐng)者和項(xiàng)目組主要成員的學(xué)歷和研究工作簡(jiǎn)歷，近期已發(fā)表與本項(xiàng)目有關(guān)的主要論著和獲得的學(xué)術(shù)獎(jiǎng)勵(lì)情況及在本項(xiàng)目中承擔(dān)的任務(wù)。研究結(jié)果要注重質(zhì)量。對(duì)基礎(chǔ)研究而言，填補(bǔ)國(guó)內(nèi)空白不是特色與創(chuàng)新。注意知識(shí)產(chǎn)權(quán)的保護(hù)，即能說(shuō)明問(wèn)題，又不暴露“技術(shù)訣竅”要從學(xué)術(shù)思想角度提出可行性分析，不能僅就研究隊(duì)伍和研究條件方面進(jìn)行介紹和分析，只有上述三方面優(yōu)勢(shì)的綜合，才是取得成果的關(guān)鍵。研究?jī)?nèi)容應(yīng)緊緊圍繞研究目標(biāo)，要集中精力解決科學(xué)問(wèn)題，避免內(nèi)容龐雜或空泛，重點(diǎn)不突出。列出國(guó)內(nèi)外同行的工作，指出需解決的共性問(wèn)題。第五篇：國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目申請(qǐng)書撰寫國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目申請(qǐng)書撰寫與項(xiàng)目評(píng)審－項(xiàng)目申請(qǐng)書撰寫 國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目主要支持研究人員在自然科學(xué)基金會(huì)每年公布的《項(xiàng)目指南》的資助范圍之內(nèi)自主選題，參與競(jìng)爭(zhēng)。工作條件 XXXXXXX設(shè)有校屬的XXXXXXXXX消化系疾病第三研究室。得益于此，他（她）們分別熟練掌握了生物小分子的化學(xué)合成相關(guān)技術(shù)（多肽合成、固相化反應(yīng)、納米技術(shù)、高效分離技術(shù)等）、免疫組織與細(xì)胞化學(xué)技術(shù)、RTPCR和定量PCR、蛋白印跡、高效液相分析、質(zhì)譜分析、肝纖維化動(dòng)物模型及生物信息學(xué)方法等與本課題相關(guān)的關(guān)鍵技術(shù)與方法（相關(guān)論文參見(jiàn)申請(qǐng)人簡(jiǎn)歷）。近四年來(lái)，申請(qǐng)人承擔(dān)并完成了國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目“RGD修飾細(xì)胞生物信息調(diào)控分子和綴合基因的功能研究（編號(hào) 30170412）”，化學(xué)合成了RGDM6P，分子克隆構(gòu)建pCIRGDSmad7并成功通過(guò)脂質(zhì)體進(jìn)行基因轉(zhuǎn)染，通過(guò)體內(nèi)外實(shí)驗(yàn)觀察了RGDM6P和pCIRGDSmad7的生物學(xué)效應(yīng)。項(xiàng)目負(fù)責(zé)人率先在我國(guó)開(kāi)展鈣拮抗劑尤其是中藥粉防己堿對(duì)肝纖維化防治研究，取得豐富的粉防己堿抗肝纖維化基礎(chǔ)和臨床研究成果，在國(guó)內(nèi)外期刊發(fā)表相關(guān)論文50余篇，獲省部級(jí)以上科技進(jìn)步獎(jiǎng)5項(xiàng)。（二）研究基礎(chǔ)與工作條件 1 研究基礎(chǔ)。研究計(jì)劃及預(yù)期研究結(jié)果 研究計(jì)劃： 預(yù)期研究成果 獲得快速、有效和大量合成XXXXXXX和高藥物包封率、高配體修飾率的穩(wěn)定XXXXXXXX的技參數(shù)，并合成足量研究相關(guān)產(chǎn)物。本項(xiàng)目的特色與創(chuàng)新之處 本課題首次嘗試?yán)肵XXXXXX構(gòu)建HSC特異性受體調(diào)節(jié)藥物靶向載體。申請(qǐng)人長(zhǎng)期從事肝纖維化防治研究，先后承擔(dān)包括國(guó)家自然基金在內(nèi)的各類科研項(xiàng)目15項(xiàng)，指導(dǎo)或協(xié)助指導(dǎo)博士后、博士生及碩士生70余名。 相關(guān)實(shí)驗(yàn)技術(shù)成熟，實(shí)驗(yàn)結(jié)果可信。技術(shù)路線圖XXXXXXXXXXXXXXX。(3)XXXXXXX 在肝纖維化大鼠肝臟內(nèi)分布 采用XXXXXXXXXXXXXXXXXXXXX。(2)XXXXXX對(duì)TGFβ1效應(yīng)影響 XXXXXXXXXXXX。(5)平衡解離常數(shù)(Kd)和細(xì)胞最大結(jié)合位點(diǎn)數(shù)(Bmax)XXXXXXXXXXX。(1)配體結(jié)合的濃度效應(yīng)關(guān)系XXXXXXXXXXX。(3)均勻設(shè)計(jì)優(yōu)化處方根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果及文獻(xiàn)，確定影響包封率的主要因素。高效液相（HPLC）和質(zhì)譜分析法進(jìn)物產(chǎn)物純化與鑒定。高效液相（HPLC）、質(zhì)譜等方法鑒定合成產(chǎn)物純度及分子量。 XXXXXX 體內(nèi)HSC靶向性、抗肝纖維化效果比較與評(píng)價(jià)。 研究XXXXXX 對(duì)HSC生物活性影響及機(jī)制，為中西藥結(jié)合肝纖維化雙靶向、多靶點(diǎn)、協(xié)同治療提供理論基礎(chǔ)。 XXXXX 修飾XXXXXXXXX 對(duì)肝星狀細(xì)胞活化、增殖、XXXXXXX信號(hào)通路影響。369(Pt 2): Annes JP, Chen Y, Munger JS, et alphaVbeta6mediated activation of latent TGFbeta requires the latent TGFbeta binding Cell Biol 2004。1(2): Chen YW, Li DG, Wu JX, et inhibits activation of rat hepatic stellate cells stimulated by transforming growth factorbeta in vitro via upregulation of Smad Ethnopharmacol 2005。綜上所述，我們擬在XXXXXXXXXX。當(dāng)前，受體調(diào)節(jié)藥物靶向（receptormediated drug targeting）作為一種新型的給藥系統(tǒng)受到人們的重視[16]。我們首次證實(shí)，新型復(fù)合分子RGDM6P用于抗肝纖維化治療，無(wú)論在對(duì)HSC靶向的特異性，還是多位點(diǎn)聯(lián)合作用方面，都優(yōu)于單一的含RGD序列的肽段或M6P（參見(jiàn)基金結(jié)題摘要，相關(guān)文章參見(jiàn)申請(qǐng)人簡(jiǎn)歷及附件四）?；谝陨涎芯拷Y(jié)果，我們研究室在國(guó)家自然科學(xué)基金資助下，過(guò)去三年中應(yīng)用化學(xué)方法合成了RGD和M6P，并將RGD與M6P結(jié)合成一新型復(fù)合分子RGDM6P，研究比較了它們對(duì)HSC