【正文】 整合到染色體上 ，隨染色體 DNA進(jìn)行同步復(fù)制。 認(rèn)真閱讀 13頁圖 16，討論： 目的基因是什么？ 受體細(xì)胞是什么？ 基因表達(dá)產(chǎn)物是什么？ 土壤農(nóng)桿菌在其中可能起什么作用？ 從基因文庫中獲取 將含有某種生物不同基因的許多 DNA片段，導(dǎo)入受體菌的群體中儲(chǔ)存，各個(gè)受體菌分別含有這種生物的不同的基因，稱為基因文庫。 人工合成 一、目的基因的獲取 _________切割 質(zhì)粒，使其出現(xiàn)一個(gè)切 口，露出 ____________。 轉(zhuǎn)錄完畢后， RNA鏈釋放出來，緊接著 RNA聚合酶也從 DNA模板鏈上脫落下來。 非編碼序列： 包括非編碼區(qū)和內(nèi)含子 原核細(xì)胞 真核細(xì)胞 不同點(diǎn) 編碼區(qū)是 _____的 編碼區(qū)是間隔的、 _____的 相同點(diǎn) 都由能夠編碼蛋白質(zhì)的 ______和具有調(diào)控作用的 ______區(qū)組成的 原核細(xì)胞與真核細(xì)胞的基因結(jié)構(gòu)比較 思考 編碼相同數(shù)目氨基酸的蛋白質(zhì)，原核細(xì)胞與真核細(xì)胞基因結(jié)構(gòu)一樣長嗎？ 連續(xù) 不連續(xù) 編碼區(qū) 非編碼 三、轉(zhuǎn)化受體細(xì)胞 轉(zhuǎn)化 —— 方法 將目的基因?qū)? 植物細(xì)胞 將目的基因?qū)? 動(dòng)物細(xì)胞 將目的基因?qū)? 微生物細(xì)胞 農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法 基因槍法 花粉管通道法 —— 顯微注射法 —— 用鈣離子處理細(xì)胞（感受態(tài)細(xì)胞） 目的基因進(jìn)入 _________內(nèi)，并且在 受體細(xì)胞內(nèi)維持 _____和 _____的過程 受體細(xì)胞 穩(wěn)定 表達(dá) 將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞 （ 1）農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法 雙子葉植物中常用方法 （ 2）基因槍法 （ 3）花粉管通道法 單子葉植物常用的轉(zhuǎn)化方法，成本較高 我國獨(dú)創(chuàng)的轉(zhuǎn)化方法 如：我國的轉(zhuǎn)基因抗蟲棉 三、轉(zhuǎn)化受體細(xì)胞 書 P16 顯微注射技術(shù) 注入的是 含有目的基因的表達(dá)載體 是轉(zhuǎn)基因動(dòng)物中采用最多、最有效的一種將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞的方法。 已問世的轉(zhuǎn)基因抗蟲植物主要有水稻、棉、玉米、馬鈴薯、番茄、大豆、蠶豆、煙草、蘋果、核桃、楊、菊花和白花三葉草等。 用于抗病轉(zhuǎn)基因植物的基因主要是： 病毒外殼蛋白（ CP）基因 病毒的復(fù)制酶基因 用于抗真菌轉(zhuǎn)基因植物的基因主要是： 幾丁質(zhì)酶基因和抗毒素合成基因 其它抗逆轉(zhuǎn)基因植物 利用調(diào)節(jié)細(xì)胞滲透壓的基因，來提高農(nóng)作物的抗鹽堿和抗干旱的能力。富含賴氨酸的轉(zhuǎn)基因玉米 用基因重組藍(lán)玫瑰 將控制番茄果實(shí)成熟的基因?qū)敕眩@得轉(zhuǎn)基因延熟番茄 。 乳腺生物反應(yīng)器： 目前科學(xué)家已在牛和山羊等動(dòng)物乳腺生物反應(yīng)器中表達(dá)畜了 抗凝血酶、血清白蛋白、生長激素和 α抗胰蛋白酶 等重要醫(yī)藥產(chǎn)品。 三、基因工程藥物異軍突起 四、基因治療曙光初照 生產(chǎn)干擾素的車間 體外基因治療 先從病人體內(nèi)獲得某種細(xì)胞，進(jìn)行培養(yǎng)，然后，在體外完成基因轉(zhuǎn)移，再篩選成功轉(zhuǎn)移的細(xì)胞擴(kuò)增培養(yǎng)，最后重新輸入患者體內(nèi)。自此以后，蛋白質(zhì)工程迅速發(fā)展，已成為生物工程的重要組成部分。一般來說， 提高蛋白質(zhì)的穩(wěn)定性包括：延長酶的半衰期，提高酶的熱穩(wěn)定性，延長藥用蛋白的保存期，抵御由于重要氨基酸氧化引起的活性喪失等。研究人員將第 17位的半胱氨酸，通過基因定點(diǎn)突變改變成絲氨酸，結(jié)果使大腸桿菌中生產(chǎn)的 β干擾素的抗病性活性提高到 108 U/mg，并且比天然 β干擾素的貯存穩(wěn)定性高很多。 （ 4） 設(shè)計(jì)各種處理?xiàng)l件 ， 了解蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)變化 ， 包括折疊與去折疊等對其活性與功能的影響； （ 5） 設(shè)計(jì)編碼該蛋白的基因改造方案 ， 如點(diǎn)突變； （ 6） 分離 、 純化新蛋白 ， 功能檢測后投入實(shí)際使用 。采用定位誘變的方法，可以對編碼蛋白質(zhì)的基因進(jìn)行核苷酸密碼子的插入、刪除、置換和改組，其結(jié)果為分子改造提供新的設(shè)計(jì)方案。 （二）蛋白質(zhì)改造工程舉例 1．水蛭素改造 水蛭素是水蛭唾液腺分泌的凝血酶特異抑制劑，它有多種變異體，由 65或 66個(gè)氨基酸殘基組成。在治療過程中為減少副作用，需使人的重組生長激素只與生長激素受體結(jié)合，盡可能減少與其他激素受體的結(jié)合。 3．胰島素改造 天然胰島素制劑在儲(chǔ)存中易形成二聚體和六聚體，延緩胰島素從注射部位進(jìn)入血液，從而延緩了其降血糖作用，也增加了抗原性，這是胰島素B23B28氨基酸殘基結(jié)構(gòu)所致。皰疹病毒（ HSV）胸腺嘧啶激酶（ TK）可以催化胸腺嘧啶和其它結(jié)構(gòu)類似物磷酸化而使這些堿基 3’ OH缺乏 ,從而阻斷 DNA的合成，殺死癌細(xì)胞。蛋白質(zhì)工程除了用于改造天然蛋白質(zhì)或設(shè)計(jì)制造新的蛋白質(zhì)外，其本身還是研究蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)功能的一種強(qiáng)有力的工具，它在解決生物理論方面所起的作用，可以和任何重大的生物研究方法相提并論。 三、蛋白質(zhì)工程的進(jìn)展和前景 蛋白質(zhì)工程匯集了當(dāng)代分子生物學(xué)等學(xué)科的一些前沿領(lǐng)域的最新成就，它把核酸與蛋白質(zhì)結(jié)合、蛋白質(zhì)空間結(jié)構(gòu)與生物功能結(jié)合起來研究。那么轉(zhuǎn)錄成信使RNA的一段 DNA分子中應(yīng)有 C和 T A. 12個(gè) B. 18個(gè) C. 24個(gè) D. 30個(gè) D 總 (A+T)%= (A2+T2)%=RNA中 (A+U)% 謝謝觀看 /歡迎下載 BY FAITH I MEAN A VISION OF GOOD ONE CHERISHES AND THE ENTHUSIASM THAT PUSHES ONE TO SEEK ITS FULFILLMENT REGARDLESS OF OBSTACLES. BY FAITH I BY FAITH 。蛋白質(zhì)工程開創(chuàng)了按照人類意愿改造、創(chuàng)造符合人類需要的蛋白質(zhì)的新時(shí)期。1983年 “蛋白質(zhì)工程”這個(gè)名詞出現(xiàn)后，隨即被廣泛接受和采用。從大量的隨機(jī)突變中進(jìn)行篩選出一種酶 ,在酶活性部位附近有 6個(gè)氨基酸被替換，催化能力 20倍以上。該速效胰島素已通過臨床實(shí)驗(yàn)。由于人的生長激素和催乳激素受體結(jié)合需要鋅離子參與作用，而它與生長激素受體結(jié)合則無需鋅離子參與，于是考慮取代充當(dāng)鋅離子配基的氨基酸側(cè)鏈，如第 18和第 21位 His（組氨酸）和第 17位Glu（谷氨酸）。為提高水蛭素活性，在綜