微生物的保藏技術(shù)(文件)
【正文】 35℃ 范圍內(nèi)進(jìn)行緩慢降溫，而噬菌體則必需采用上述的二階段法進(jìn)行冷凍 ； ? ⑧若進(jìn)行長(zhǎng)期保存，則貯藏溫度越低越好； ? ⑨取用冷凍保存的菌種時(shí)，應(yīng)采取速融措施，即在 35～ 40℃ 溫水中輕輕振蕩使之迅速融解。 三、干燥保藏法 沙土管保存 冷凍真空保藏 沙土管保存 主要用于能形成孢子或孢囊的微生物菌種的保藏，如：芽孢桿菌、放線菌等。 此法簡(jiǎn)單易行，并可以將微生物保藏較長(zhǎng)時(shí)間，適合一般實(shí)驗(yàn)室及以放線菌等為菌種的發(fā)酵工廠采用。 達(dá)到干燥的樣品可在真空或惰性氣體的密閉環(huán)境中置低溫保存，從而使微生物處于干燥、缺氧及低溫的狀態(tài)，生命活動(dòng)處于休眠，可以達(dá)到長(zhǎng)期保藏的目的。一般地說(shuō)，將待保存的微生物在營(yíng)養(yǎng)豐富且容易增菌的培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)為宜；菌齡以達(dá)到對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期為好；若為有芽孢或孢子的微生物，則以芽孢和孢子形成以后進(jìn)行保存為好；菌液濃度以高為好，如細(xì)菌應(yīng)達(dá)到 109～ 1010/ml。 總結(jié) 除上述方法外，各種微生物菌種保藏的方法還有很多，如紙片保藏、薄膜保藏、寄主保藏等。 謝謝觀看 /歡迎下載 BY FAITH I MEAN A VISION OF GOOD ONE CHERISHES AND THE ENTHUSIASM THAT PUSHES ONE TO SEEK ITS FULFILLMENT REGARDLESS OF OBSTACLES. BY FAITH I BY FAITH 。 因此，在具體選擇保藏方法時(shí)必須對(duì)被保藏菌株的特性、保藏物的使用特點(diǎn)及現(xiàn)有條件等進(jìn)行綜合考慮。 c、安瓶的準(zhǔn)備：將安瓶在 2%HCl中浸泡過(guò)夜，自來(lái)水沖洗 3次后，蒸餾水刷凈，干燥，塞棉塞，貼標(biāo)簽，干熱滅菌或溫?zé)釡缇螅?60℃ 恒溫干燥。因此冷凍真空干燥保藏是目前使用最普遍、最重要的微生物保藏方法。事實(shí)上，從菌體中除去大部分水分后，細(xì)胞的生理活動(dòng)就會(huì)停止，因此可以達(dá)到長(zhǎng)期維持生命狀態(tài)的目的。 沙土管保藏：用棉塞塞住安瓿管，放在能夠抽真空的干燥器中，然抽干后將真空干燥器的旋塞關(guān)閉即可。當(dāng)冷凍菌融化后，應(yīng)盡量避免再次冷凍，否則菌體的存活率將顯著下降。同樣，也可添加各種糖類、去纖維血液和脫脂牛乳等具有良好保護(hù)效果的溶劑，但對(duì)有些微生物而言，不加保護(hù)劑時(shí)更有效。此外，也可用 φ5mm的玻璃珠來(lái)吸附菌液，然后把玻璃珠置于塑料容器內(nèi)，再放入低溫冰箱內(nèi)進(jìn)行保存的。 這種方法適用范圍廣，而且是目前常用的較理想的，繁而高效。 b、熔封安瓶管：若直接貯存于氣相液氮中（－ 150℃ ～－170℃ ）時(shí)，則不需熔封。這些微生物可在其菌體細(xì)胞外遭受凍結(jié)的情況下而不受損傷，而對(duì)其它大多數(shù)微生物而言，無(wú)論在細(xì)胞外凍結(jié)還是在細(xì)胞內(nèi)凍結(jié)，都會(huì)對(duì)菌體造成損傷，使其代謝作用停止，可達(dá)到保藏的目的。培養(yǎng)溫度通常以稍低于最適生長(zhǎng)溫度為好。Institut Pasteur Of Institut Pasteur(CIP) 加拿大國(guó)家微生物健康實(shí)驗(yàn)室
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