基因工程和蛋白質(zhì)工程簡介(文件)
【正文】 with fluor dyes PCR amplification purfication hybridize target to microarray robotic printing reference 。芯片陣列中的每一個(gè)單元微點(diǎn)都是一個(gè)傳感器的探頭，所以傳感器技術(shù)的精髓往往都被用于芯片的發(fā)展。 n一循環(huán)次數(shù)。該法模仿體內(nèi) DNA的復(fù)制過程，首先使 DNA變性，兩條鏈解開，然后使引物模板退火，二者堿基配對， DNA聚合酶隨即以4種 dNTP為底物，在引物的引導(dǎo)下合成與模板互補(bǔ)的 DNA新鏈。將細(xì)胞全部 mRNA反轉(zhuǎn)錄成 cDNA并被克隆的總和稱為 cDNA文庫。 基因文庫中應(yīng)包含多少 DNA克隆才能使任意所需要的基因以極高的概率存在于該文庫中？其計(jì)算公式如下： N=ln(1p)/ln(1f) N ? 基因文庫所包含克隆的數(shù)目； p ? 任意所需基因存在于基因文庫中的概率，要求大于99%； f ? 克隆的 DNA片段大小（ bp） 占基因組大小 (bp)的分?jǐn)?shù)。反應(yīng)中包含分別帶 4色熒光標(biāo)記的 ddNTP(終止子 ) unlabeled primer template DNA + AmpliTaq FS dATP, dCTP, dGTP, dTTP ddCTP ddATP ddGTP ddTTP 測序反應(yīng)結(jié)束后，采用乙醇沉淀法進(jìn)行純化，除去過量的 ddNTP后上樣。 3180。 3180。 5180。 5180。 研究得多，取得成果最顯著的是生物技術(shù)藥（激素、細(xì)胞因子、酶、酶的激活劑、受體和配體、細(xì)胞毒素和殺菌肽以及抗體等）和工業(yè)用酶的 蛋白質(zhì)工程 。這些蛋白質(zhì)只是適應(yīng)生物自身的需要，而對于它們的產(chǎn)業(yè)化開發(fā)往往并不合意，需要加以改造。 一、 DNA重組 的技術(shù)路線 二、 基因工程的應(yīng)用與前景 三、 DNA體外重組常用的酶 DNA重組 的 技術(shù)路線 Foreign DNA to be inserted Plansmid vector Joining Rebinant DNA molecule Introduction into host cells by transformation of viral infection Host chromateme Slection for cells coteining a rebinant DNA molecule Cloning + 目的基因的制備 載體 的構(gòu)建 目的基因與載體的重組 重組 體 導(dǎo)入 宿主細(xì)胞進(jìn)行擴(kuò)增 克隆基因的鑒定 Ti質(zhì)粒結(jié)構(gòu) 植物冠癭瘤 pBR322質(zhì)粒的結(jié)構(gòu) 以 ?噬菌體為載體進(jìn)行 DNA克隆 ?DNA 用限制性內(nèi)切酶除去中間一段 與外源 DNA連接 重組載體的體外包裝 帶有外源 DNA的?噬菌體 太小不能被包裝 頭部前體 多聯(lián)體DNA A蛋白 COS COS COS 成熟的顆粒 在宿主細(xì)胞內(nèi)進(jìn)行DNA的裝配過程 ?噬菌體感染
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