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核酸的結(jié)構(gòu)與功能(10)(文件)

2025-09-03 01:49 上一頁面

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【正文】 和 3′ 端各有一段非翻譯區(qū)( untranslated region, UTR) ? 順反子 : 基因功能的單位;編碼一條多肽鏈的 一段染色體 ;一種 結(jié)構(gòu)基因 。 ? 作用:抗 5′ 核酸外切酶的降解作用;在蛋白質(zhì)合成過程中,有助于核糖體對 mRNA的識別與結(jié)合,使翻譯得以正確起始。 41 (二) DNA的二級結(jié)構(gòu) 雙螺旋結(jié)構(gòu)模型 WatsonCrick, 1953: ? 兩條 平行 多脫氧核苷鏈以 相反方向 圍繞同一軸盤繞;兩條鏈都是 右手螺旋 (圖) 。 ? 兩條鏈由堿基對之間的氫鍵相連,在空間上可能的堿基對只有 A與 T( 兩個氫鍵 )以及 G與 C( 三個氫鍵 )( 圖 ) 。 ? 3. ZDNA:細長,大溝平坦,磷酸和糖骨架呈 Z字型; 左手 DNA螺旋 。它對維持 DNA的二級結(jié)構(gòu)起 主要作用 。 ? ⑵ 正超螺旋 ( positive superhelix) :向 DNA雙螺旋的相同方向纏繞而成的超螺旋,又稱 緊密纏繞 ;使分子內(nèi)部張力加大,旋得更緊。 (圖) 58 四、 RNA的高級結(jié)構(gòu) ? RNA通常是 單鏈線形分子 ,但可自身回折形成局部雙螺旋 ( 二級結(jié)構(gòu) ),進而 折疊 ( 三級結(jié)構(gòu) )。 ( 2)組成: 4臂 4環(huán)組成 ? 4臂 :氨基酸接受臂、反密碼臂、二氫尿嘧啶臂、TΨC 臂。環(huán)中部為反密碼子,由 3個堿基組成。 ? ( 5) TψC 環(huán) :由 7個核苷酸組成。如: ? DNA在 37℃ 對水透析,可完全除去嘌呤堿,得到 無嘌呤酸 ( apurinic acid)。 69 (三)酶水解 水解核酸的酶 ( 1) 磷酸二酯酶 : 非特異性 水解磷酸二酯鍵的酶。 70 二、核酸的酸堿性質(zhì) ? 核酸的磷酸基具有酸性,堿基具有堿性,因此,核酸具有兩性電離的性質(zhì),為兩性電解質(zhì) 。 72 (二)核酸的紫外吸收特性的應(yīng)用 1. 作為定量測定核酸的方法。 ①增色效應(yīng) ( hyperchromic effect):當核酸變性或降解時,其紫外線吸收強度顯著增高 ②減色效應(yīng) ( hypochromic effect):變性的核酸在一定條件下恢復(fù)原有性質(zhì)時,其紫外線吸收強度又可回復(fù)到原有水平。 引起核酸變性的因素 ? 加熱 、 強酸 、 強堿 、 有機試劑 (尿素、甲醛、甲醇、乙醇、甲酰胺等)或 射線 等一切可以破壞核酸分子氫鍵的處理,都可使核酸變性。( 即在 260nm下光吸收達到最大光吸收一半是的溫度 ) ? DNA的 Tm值一般在82~95℃ 之間。 77 (二)核酸的復(fù)性 DNA的復(fù)性 :變性因素解除后,因變性而分開的 DNA兩條單鏈即可再聚合成原來的雙螺旋,其原有的性質(zhì),可得到部分恢復(fù)。 ( 3) DNA片段的大小 —— DNA片段越大,復(fù)性越慢。 返回 。 79 (三)核酸的雜交 ? ( hybridization):不同來源的核酸變性后,合并在一處進行復(fù)性;這時,只要這些核酸分子的核苷酸序列含有可以形成堿基互補配對的片段, 復(fù)性也會發(fā)生于不同來源的核酸鏈之間,即形成所謂的雜化雙鏈 。 ? 退火 (annealing):熱變性 DNA一般經(jīng)緩慢冷卻后即可復(fù)性,此過程稱之為 ~。因此, DNA制劑不應(yīng)保存在離子強度過低的 ? ③ 均一性 ? 均質(zhì) DNA:熱變性溫度范圍較?。? ? 異質(zhì) DNA:熱變性溫度范圍較寬。 74 DNA的熱變性 ? DNA熱變性是在一個很窄的溫度范圍內(nèi)發(fā)生的。 73 四、核酸的變性、復(fù)性和雜交 (一)核酸的變性 (denaturation) 核酸的變性 :核酸雙鏈螺旋區(qū)的氫鍵斷裂,變成單鏈,不涉及共價鍵的斷裂。 A260/A280比值:純 DN
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