酶聯(lián)免疫吸附測定法(文件)
【正文】 品在含蛋白保護(hù)劑的緩沖液中加入一定量的待檢物質(zhì) ，含量約為最低檢測敏感度的 10~20倍。 (同時做空白孔，陰性對照孔及陽性對照孔 )。 4. 終止反應(yīng)：于各反應(yīng)孔中加入 2M硫酸 。D值，若大于規(guī)定的陰性對照 OD值的 ，即為陽性。也可測 O 37℃ 孵育 ～ 1小時，洗滌。 ?酶反應(yīng)終止液 HRP反應(yīng)終止液為硫酸，一般采用 2mol/L AP用 NaOH終止 實(shí)驗(yàn)方法 : ? 1. 加樣：加一定稀釋的待檢樣品 孔中，置 37℃ 孵育 1小時。產(chǎn)物為黃色的對硝基酚，在 405nm波長處有吸收峰。具有酶促反應(yīng)，顯示出生物放大作用。 微量滴定板，量滴定板為 8 12的 96孔式。測定復(fù)合物中的酶作用于加入的底物后生成的有色物質(zhì)量 (OD值 )，即可確定
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