野生櫻桃李果皮色素提取及穩(wěn)定性研究畢業(yè)論文(文件)
【正文】 提取正交試驗(yàn)設(shè)計及結(jié)果因素偏差平方和自由度F比F臨界值顯著性濃度 A2**時間 B2料液比 C2*溫度 D2*誤差8表2 色素提取正交試驗(yàn)方差分析表 色素純化試驗(yàn)結(jié)果與分析 純化溫度對色素純化效果的影響情況如圖6所示。從圖7中可以看出，當(dāng)稀釋比為1:14時，樹脂的吸附度最高；之前的稀釋比由1:08開始到1:12之間，樹脂的吸附度呈下降趨勢，尤其是在1:10～1:12之間的吸附度下降最為明顯,并在1:12的稀釋比下,吸附度最低。取最高值的左右，因此，選擇30%、40%、50%的洗脫劑濃度用于正交試驗(yàn)。圖9 pH值對色素純化效果的影響 色素純化正交試驗(yàn)結(jié)果分析按L9(34)進(jìn)行正交試驗(yàn)，設(shè)計及結(jié)果分析如表3和表4所示。所在列1234因素溫度稀釋比洗脫劑pH值吸附度實(shí)驗(yàn)1301:1230%3實(shí)驗(yàn)2301:1440%4實(shí)驗(yàn)3301:1650%5實(shí)驗(yàn)4401:1240%5實(shí)驗(yàn)5401:1450%3實(shí)驗(yàn)6401:1630%4實(shí)驗(yàn)7501:1250%4實(shí)驗(yàn)8501:1430%5實(shí)驗(yàn)9501:1640%3均值1均值2均值3極差表3 色素純化正交試驗(yàn)設(shè)計及結(jié)果因素偏差平方和自由度F比F臨界值顯著性溫度 A2稀釋比 B2洗脫劑 C2pH值 D2誤差8表4 色素純化正交試驗(yàn)方差分析表 穩(wěn)定性試驗(yàn)結(jié)果分析 光穩(wěn)定性結(jié)果如圖10和圖11所示。這就提醒我們，相關(guān)色素產(chǎn)品應(yīng)該避光保存。圖12 熱穩(wěn)定性試驗(yàn)效果 pH值的影響試驗(yàn)結(jié)果 pH值的影響試驗(yàn)結(jié)果如圖13所示。 Mg2＋對色素穩(wěn)定性的影響效果Mg2＋對色素穩(wěn)定性的影響效果如圖14所示。圖15 Fe3＋對色素穩(wěn)定性的影響效果 Fe2＋對色素穩(wěn)定性的影響效果Fe2＋對色素穩(wěn)定性的影響效果如圖16所示。圖17 Cu2＋對色素穩(wěn)定性的影響效果 Ca2＋對色素穩(wěn)定性的影響效果Ca2＋對色素穩(wěn)定性的影響效果如圖18所示。在此工藝參數(shù)下提取的櫻桃李果皮色素提取液的呈色強(qiáng)度最強(qiáng)。熱穩(wěn)定性試驗(yàn)中，櫻桃李果皮色素的吸收值隨溫度升高而減小，接近于室溫穩(wěn)定性較好，但總體的趨勢表現(xiàn)出色素的穩(wěn)定性較差，說明相關(guān)色素產(chǎn)品應(yīng)該低溫保存，不易接觸高溫。 綜上所述，櫻桃李果皮色素穩(wěn)定性受pH值影響最為明顯，次之依次為溫度、光照，金屬離子影響效果最不明顯，相關(guān)色素產(chǎn)品應(yīng)該避光低溫保存。隨著pH值在酸性范圍內(nèi)增大，吸收值明顯下降，當(dāng)pH值接近或超過7時，吸光度值有所回升，因此，要保持櫻桃李原有的風(fēng)味，及色素的穩(wěn)定性，應(yīng)盡量保持它原來的酸度。在此工藝參數(shù)下純化的櫻桃李果皮色素提取液的色素純化效果最好。圖18 Ca2＋對色素穩(wěn)定性的影響效果4結(jié)論與討論櫻桃李紅色果果皮色素含量遠(yuǎn)低于紫色果果皮色素含量，而且紅色果果皮色素在可見光區(qū)光吸收值顯著低于紫色果，并在此區(qū)域沒有吸收峰，而紫色果在536nm波長處有最大吸收值。圖16 Fe2＋對色素穩(wěn)定性的影響效果 Cu2＋對色素穩(wěn)定性的影響效果Cu2＋對色素穩(wěn)定性的影響效果如圖17所示。圖14 Mg2＋對色素穩(wěn)定性的影響效果 Fe3＋對色素穩(wěn)定性的影響效果Fe3＋對色素穩(wěn)定性的影響效果如圖15所示。說明櫻桃李在原始pH值的基礎(chǔ)上適當(dāng)調(diào)劑，色素穩(wěn)定性影響不大，都為鮮紅色，若接近或超過堿性，色素液變成深褐綠色，可能已變質(zhì)，則已經(jīng)沒有意義。從圖12中可以看出，在60℃條件下色素?fù)p失不明顯，總體上吸光度值是隨溫度的升高而逐漸降低，說明櫻桃李果皮色素的熱穩(wěn)定性不好，但在低于60℃的條件下，色素的穩(wěn)定性較好。區(qū)別在于，在室內(nèi)陽光條件下的色素吸光度值均比在室內(nèi)燈光條件下的色素吸光度值高。方差分析結(jié)果（見表4）表明，4個試驗(yàn)因素的影響順序是C＞D＞B＞A,即洗脫劑濃度對色素純化效果的影響最大，其次依次是pH值和稀釋比，影響最小的是溫度。從圖9中可以看出，在pH=2至pH=4之間，樹脂的吸附度呈明顯上升趨勢，且在pH=4時達(dá)到最高值；之后隨pH值的增大，樹脂的吸附度呈顯著的下降走勢，并在pH=8時達(dá)到最低值。圖7 稀釋比對色素純化效果的影響 洗脫劑的選擇 洗脫劑的不同濃度對色素純化效果的影響情況如圖8所示。因此，選擇30℃、40℃、50℃的溫度用于正交試驗(yàn)。方差分析結(jié)果（見表2）表明，4個試驗(yàn)因素的影響順序是A＞D＞C＞B,即乙醇濃度對色素提取效果的影響最大，其次依次是提取溫度和料液比，影響最小的是提取時間。從圖5中可以看出，～1h，隨提取時間的延長，色素提取液的吸光度值呈明顯上升趨勢；當(dāng)提取時間為1h，吸光度值最高；，吸光度值的變化不是非常明顯；當(dāng)提取時間為2h，吸光度值明顯下降。取最高值的左右值，因此，選擇1:01:1:12的料液比用于正交試驗(yàn)。從圖2中可以看出，整體吸光度值較為接近，但是在乙醇濃度為50%時，吸光度值最高，之后隨濃度的增加，吸光度值逐漸降低。另設(shè)不加離子的對照組。 pH值的影響 分別取5份2ml色素浸提液于錐形瓶中，再分別用20ml蒸餾水將其稀釋，然后分別用飽和NaHCO3溶液調(diào)pH值8，各份補(bǔ)加蒸餾水至pH=8時溶液的總體積，靜置1h。 色素純化正交試驗(yàn)以單因素試驗(yàn)結(jié)果為參考，選用L9(34)正交試驗(yàn)設(shè)計表，即4因素：溫度（A）、稀釋比（B）、洗脫劑（C）、pH值（D），從中各取3個水平來進(jìn)行正交試驗(yàn)。再取4個干凈的燒杯，分別倒入30ml的50%乙醇溶液，調(diào)pH值為8。洗脫劑的選擇：分別取2ml色素浸提液4份，倒入錐形瓶中，編號，再各取蒸餾水20ml（按1:10的稀釋比）稀釋上述色素液，然后各稱量1g樹脂加入上述稀釋液中，進(jìn)搖床，在40℃的溫度條件下?lián)u1h。抽濾后，回收樹脂，得樹脂吸附后的色素液，以50%乙醇溶液作參比，用紫外可見分光光度計于波長536nm的范圍內(nèi)測其吸光度。然后將層析柱中已活化的樹脂倒出在塑料盒中進(jìn)干燥箱40℃條件下干燥12h，得干燥的樹脂為下面的色素純化單因素試驗(yàn)及正交試驗(yàn)備用。 色素提取正交試驗(yàn)以單因素試驗(yàn)結(jié)果為參考，選用L9(34)正交試驗(yàn)設(shè)計表，即4因素：乙醇濃度（A）、料液比（B）、提取溫度（C）、提取時間（D），從中各取3個水平來進(jìn)行正交試驗(yàn)。重負(fù)3次。抽濾后得色素浸提液，以70%乙醇溶液作參比，于波長536nm的范圍內(nèi)測其吸光度。 櫻桃李紫色果果皮色素提取條件的單因素試驗(yàn) 乙醇濃度的選擇：稱量2g的櫻桃李紫色果果皮干粉5份，分別放入50ml規(guī)格的燒杯中，編號，再分別加入30%、40%、50%
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