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牛羊胚胎移植技術(shù)(文件)

2025-06-25 03:04 上一頁面

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【正文】 甲孕酮)、FGA(氟孕酮)和18甲基炔諾酮等。為縮短處理時間,孕激素可與PGF2a結(jié)合起來使用。在促性腺激素開始處理后2天,綿羊一次肌注PGF2a8—15mg,山羊為410mg;氯前列烯醇分別為150—250ug和100—250ug。有些學(xué)者認(rèn)為山羊?qū)MSG的反應(yīng)不同于牛和綿羊,在超排處理時需要補充注射促排激素如HCG、LH等,通常在發(fā)情后肌注HCGl00IU或注射150大白鼠單位(國產(chǎn))。據(jù)丁紅等報道,使用同一廠家生產(chǎn)的兩個批號的FSH處理綿羊,劑量和處理方法相同,排卵數(shù)分別為19.74177。 ,兩批號間無顯著差異;177。一般繁殖力高的品種對促性腺激素的反應(yīng)比繁殖力低的品種好,成年羊比幼齡羊的反應(yīng)好,營養(yǎng)狀況好的比營養(yǎng)差的反應(yīng)好。9枚,177。據(jù)丁紅等對綿羊自然排卵情況的觀察,新疆山區(qū)牧場的細(xì)毛羊發(fā)情旺期在912月份,10月份最高,%,%。在自然情況下,約99%的有腔卵泡發(fā)生閉鎖退化,只有1%左右的卵泡在排卵時排出卵子。為此,作者于1988年在供體母羊超排處理前情期的第二天,用小劑量252u的FSH肌注作預(yù)處理,可用胚12枚,、差異顯著。觀察時間:早(6:007:00),晚(18:0019:00)。羊的人工授精 共配3次,間隔為12個小時。因此要嚴(yán)格控制,使其一致,最多前后差異不得超過l天。處于活動狀態(tài)的牛方可進行同期化發(fā)情處理。受體牛發(fā)情之日計為O天,6—8天內(nèi)進行胚胎移植。受體羊發(fā)情之日計為0天,按胚齡要求進行移植。并借助直腸檢查,根據(jù)卵巢的卵泡是否發(fā)育做進一步的判斷。一般情況下,不論返情與否,都要連續(xù)觀察3~4個情期以上;2~3個月左右對受體牛進行直檢,然后初步確孕。產(chǎn)期的護理 受體牛在圍產(chǎn)期應(yīng)進入產(chǎn)房,由專人負(fù)責(zé)管理,同時配備專業(yè)獸醫(yī)人員隨時準(zhǔn)備手術(shù);做好助產(chǎn)和新生牛初乳的哺乳及保姆牛的帶乳,對無適宜保姆牛的犢牛及時用牛奶代替喂養(yǎng);要保證母牛哺乳期的營養(yǎng)需要;并認(rèn)真做好新生犢牛的稱重和詳細(xì)記錄。無異常后,分早、晚兩次用抗生素連續(xù)注射三天。對返情確定為孕的受體羊則應(yīng)配種或再次移植。個別母羊助產(chǎn)難以見效,可考慮剖腹產(chǎn)。完整的發(fā)情應(yīng)具備以下四方面的生理變化:①卵巢上功能黃體已退化,卵泡已經(jīng)成熟,繼而排卵;②外陰和生殖道變化,表現(xiàn)為陰唇充血腫脹,有粘液流出,俗稱“掛線”或“吊線”,陰道粘膜潮紅滑潤,子宮頸口勃起開張紅潤;③精神狀態(tài)變化,食欲減退,興奮或游走,正在泌乳的牛則奶量下降;④出現(xiàn)性欲,接近公?;蚺揽缙渌概?,有別的母牛對它爬跨時站立不動。 (1)發(fā)情周期 這是指相鄰兩次發(fā)情的間隔天數(shù)。除乳用品種較常出現(xiàn)“安靜發(fā)情”和“超短發(fā)情”外,中國地方品種和肉用品種都比較正常。不同品種間或同一品種間也存在一定區(qū)別,乳用品種略短,為1317小時,肉用品種稍長,為1330小時。 (4)產(chǎn)后發(fā)情時間 這是產(chǎn)犢當(dāng)天到第一次排卵的時間。母牛在產(chǎn)犢后繼續(xù)哺犢,會有相當(dāng)數(shù)量的個體不發(fā)情。這種非正常的生理反應(yīng)可以用改進飼養(yǎng)水平來克服。牛在5—10月齡時出現(xiàn)初情。2.發(fā)情鑒定方法母牛發(fā)情鑒定有外部觀察、試情、陰道檢查和直腸檢查四種,可以根據(jù)單項,也可以根據(jù)多項進行綜合的判斷。其順序是:戴上膠質(zhì)手套,將潤滑劑抹在其上,若無這類手套可將潤滑劑直接抹在手和小臂上。試用拇指、食指和中指稍分開,順著子宮頸向前緩和伸進,在子宮頸正前方由食指觸到一條淺溝,此為子宮角間溝。在檢查中若卵巢滑失,就應(yīng)重新從尋找子宮頸開始。 (1)休情期 處于休情期的母牛,在卵巢上常有1—2個或大或小的黃體;突起在卵巢的一側(cè)或一端。說明母牛已開始發(fā)情。記左2或右2。 (5)排卵期 在卵泡位置摸到凹陷,但卵泡液尚未流完,可摸到松軟的泡壁。如果未孕則又重復(fù)以上周期。這種方法的優(yōu)點是:可以擴大種牛的配種數(shù),一頭公牛在人工授精情況下一年可以配上萬頭母牛。2.人工授精操作規(guī)程授精時的衛(wèi)生要求必須嚴(yán)格。第三,在把握直腸輸精前,先用右手掏去糞便后,將手伸入直腸,摸到并握住子宮頸時,再用左手將輸精管插入陰道,達(dá)到子宮頸口(右手掌可感觸到)后,用干凈的裝有精液的注射器(若輸精管與注射器為一體時)進行注射。 (1)精液解凍 用顆粒精液時,先在小試管內(nèi)加l毫升解凍液,使溫度上升到38—40℃,然后將顆粒精液放到試管內(nèi),不停地?fù)u動,使之融化,即可使用。這些解凍液都必須經(jīng)過滅菌。如果同時配種的牛多,最好是隨使用隨解凍。(3)精液保存用具 液氮罐、恒溫箱、蒸餾器、注射器等。4.適時輸精時期精子在母牛生殖道的正常壽命是12—24小時,而大多數(shù)母牛發(fā)情持續(xù)時間是18小時左右,排卵前后最有利于受孕,一般在發(fā)情結(jié)束后7—12小時,所以最佳的輸精時機是在接近排卵時輸精。發(fā)情旺期過后8l0小時為輸精適期。因此在錯過輸精的情況下,應(yīng)在此后的l 6—20天留意母牛是否又發(fā)情。對農(nóng)民送到人工授精站的母牛,到站后必須做直腸檢查,才能提高受胎率。再如有一頭牛下午發(fā)情。生理功能正常的母牛,恰當(dāng)?shù)呐浞N時間,是在母牛發(fā)情結(jié)束或接近發(fā)情結(jié)束時。我國推廣深部輸精技術(shù),在觸摸到卵巢上卵泡已處于變軟階段或剛排過卵的階段時輸精,可取得較高的妊娠比率。但由于產(chǎn)后第一次發(fā)情容易被忽視,估計平均耽誤5天,因而一般可縮短產(chǎn)犢間隔15天。在提前配種的實驗中,沒有出現(xiàn)胚胎死亡、流產(chǎn)、子宮炎、胎盤滯留或初生犢軟 弱等問題。(1)自由交配。為了克服自由交配的弊端,多采用人工控制的方法進行集中配種。是將公、母羊分群飼養(yǎng)放牧,在配種期用試情公羊進行試情,發(fā)現(xiàn)發(fā)情母羊,拉出與指定的公羊進行交配。早晨發(fā)情的母羊,傍晚配種;下午或傍晚開始發(fā)情的母羊,第二天早晨交配。本交的方法,只能負(fù)擔(dān)25—30只母羊的配種任務(wù)。(11)每次配種后,母羊倒立10分鐘,確保精液在子宮頸停留的時間長久。移植后應(yīng)檢查移植器中是否有胚胎遺留。受體移植前24小時禁喂,只能飲水,使之空腹以便手術(shù)移植,移后觀察24時間后放群。注意對受體羊進行觀察,以站立接受爬跨為發(fā)情開始,并記錄這個時間(做好發(fā)情觀察記錄)。(7)—2cm之間,—。人工授精:人工授精是用人工方法采取公羊精液,經(jīng)過檢查和處理后,輸入發(fā)情母羊生殖道,使其受胎的一種配種方法。家庭小規(guī)模的羊群可不用試情公羊,注意觀察母羊,發(fā)現(xiàn)發(fā)情母羊,及時牽公羊交配,以免漏配。每隔2—3年,群與群之間或村與村之間進行有計劃的調(diào)換公羊,以更新血液。這種方法的優(yōu)點是省工省事,若公母羊比例適當(dāng),也能獲得較高的受胎率。三、供體羊的配種配種方法有兩種:人工授精與自然交配自然交配:也叫本交,是公、母羊直接進行交配。受孕時間與配種或輸精的次數(shù)有如下關(guān)系:母牛產(chǎn)后30天受孕需輸精2.5次,40天需2.25次,50天需2.05次,60天需1.85次,產(chǎn)后75天受孕,平均只要輸精1.75次。5.產(chǎn)后再配母牛產(chǎn)后什么時候適宜于交配或輸精?長期以來都是到60天后才進行觀察。在人工授精的情況下,于發(fā)情結(jié)束數(shù)小時前,采用卵巢觸摸,預(yù)計排卵時間的辦法,可以比較準(zhǔn)確地掌握有效受孕機會,進行人工配種。目前對精子和卵子在母牛生殖道內(nèi)能維持多長時間的生命力還不完全清楚,已知大多數(shù)卵子從卵巢釋放后其生殖力只能維持幾小時,而精子卻能維持較長時間,為l2—24小時。實行每次發(fā)情兩次輸精,有較好的效果。有很多母牛是在半夜開始發(fā)情的,而清晨才被發(fā)現(xiàn),因此觀察發(fā)情應(yīng)該在傍晚和黎明。這時可追配。在進行人工授精時,對來站配種的母牛,不能牽來就配,而應(yīng)該讓其站在預(yù)候處,觀察一段時間,可以按以下表現(xiàn)確定輸精時間: (1)發(fā)情開始的8小時為進入發(fā)情旺期之前,征候是:哞叫比平常多,離群,靠著圍欄走,企圖跳到相鄰的牛群中去;企圖爬跨其他牛;尾巴在靠近外陰的部位濕潤;外陰光滑腫脹,濕而且紅,分泌出清亮的粘液;嗅聞其他母牛的尾根;但不讓其他母牛爬跨;食欲減退。(5)一般的玻璃器皿 如大小試管、離心管、滴管、燒杯(100一500毫升)、大玻璃瓶(10000毫升)、漏斗。3.人工授精站的必要設(shè)備人工授精站必須有一套必要的設(shè)備,包括:(1)授精用器材 開陰(腔)器、輸精器、陰道照明器等。使用解凍12小時以后的精液,胎兒的早期死亡率上升,大多數(shù)的死亡發(fā)生在受孕后90天之內(nèi)。以上2種凍精融化后都要做精子活力檢查,只有活力在0.4,精子很好地前進運動時,才能使用。因精液冷凍方法不同,有冷凍顆粒、細(xì)管等,輸精器也不一樣,但輸精基本要求都相同。在連續(xù)給幾頭母牛輸精時需每次重新消毒;需給母牛外陰部消毒,當(dāng)外陰很臟時,先用清水洗去污物,再用上述消毒液清洗,之后用滅菌溫水沖去消毒液。③在改良本地小體型牛時,可克服國外種公牛大體型不便交配的困難。掌握黃體的軟硬和大小的變化規(guī)律,參考發(fā)情的觀察記錄,可準(zhǔn)確判斷輸胚時間。此時尚可輸精,有相當(dāng)好的受精機會。記左3或右3。 (3)卵泡發(fā)育期 1.5厘米大小,可觸摸到球狀物,且有波動感,這種狀態(tài)約保持10—12小時。在直腸檢查時感到一側(cè)卵巢比另一側(cè)的大一些,記載左O或右0。這個方法對區(qū)別假發(fā)情與靜發(fā)情的牛很有用,對于營養(yǎng)不足、卵泡發(fā)育遲緩者確診排卵時間也十分重要。摸到后手繼續(xù)前后滑動,沿子宮角的大彎,向下向側(cè)面探摸,可以感到有扁圓、柔軟而有彈性的肉質(zhì)。大體型母?;蚨喈a(chǎn)的母
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