《維生素與測(cè)定》ppt課件(文件)
【正文】 分離 水層 乙醚層 醚層經(jīng)無水硫酸鈉過濾，氮?dú)饬髡婵照舾? 正已烷溶解，定容。 穩(wěn)定性：在 酸性介質(zhì)穩(wěn)定 ，既使加熱也不破壞； 但在堿性介質(zhì)中不穩(wěn)定，易于分解，特別在 堿性條件下加熱，可大部或全部破壞。在給定的條件下，以及沒有其他熒光物質(zhì)干擾時(shí)，此熒光之強(qiáng)度與噻嘧色素量成正比，即與溶液中硫胺素量成正比。 （ 2）提取 ①水解 ②酶解 稱樣 三角瓶 高壓水解 鹽酸溶液 調(diào) pH值 乙酸鈉溶液 酶解 淀粉酶 定容 （ 3）凈化 樣品 熱水 酸性氯化鉀 收集酸性氯化鉀定容至 25ml （ 4）氧化 靜置 → 過濾 → 脫水 反應(yīng)瓶編號(hào) 標(biāo)準(zhǔn) A瓶 標(biāo)準(zhǔn) B瓶 樣品 A瓶 樣品 B瓶 加標(biāo)準(zhǔn)液或樣品液 標(biāo)準(zhǔn)液 5ml 標(biāo)準(zhǔn)液 5ml 樣品液 5ml 樣品液 5ml 加氫氧化鈉 3ml —— 3ml —— 加堿性鐵氰化鉀 —— 3ml —— 3ml 加正丁醇 10ml 10ml 10ml 10ml （ 5）熒光強(qiáng)度測(cè)定 激發(fā)波長(zhǎng) 365nm；發(fā)射波長(zhǎng) 435nm； 激發(fā)波狹縫 5nm；發(fā)射波狹縫 5nm。在一定條件下，該細(xì)菌生長(zhǎng)情況，以及它的代謝物乳酸的濃度與培養(yǎng)基中該維生素含量成正比，因此可以用酸度及混濁度的測(cè)定法來測(cè)定樣品中核黃素的含量。試液再加入低亞硫酸鈉 (Na2S2O4)，將核黃素還原為無熒光的物質(zhì)，然后再測(cè)定試液中殘余熒光雜質(zhì)的熒光強(qiáng)度，兩者之差即為食品中核黃素所產(chǎn)生的熒光強(qiáng)度。 ? ?? ? 1 0 0 01 0 02 ??????? fmDCSBAX。 （ 1）樣品提取 稱樣 三角瓶 高壓水解 鹽酸溶液 調(diào) pH值 氫氧化鈉溶液 酶解 淀粉酶 定容 蛋白酶 （ 2）氧化去雜 樣品提取液 具塞試管 水 雙氧水 冰乙酸 高錳酸鉀 氧化去雜 褪色 標(biāo)準(zhǔn)液按相同方法進(jìn)行 （ 3）柱層析 樣品液 水 丙酮 乙酸 水混合液 水 收集洗脫液 定容至 10ml *標(biāo)準(zhǔn)液按相 同操作進(jìn)行 （ 4）熒光測(cè)定 ? 激發(fā)光波長(zhǎng) 440nm，發(fā)射光波長(zhǎng) 525nm，測(cè)量樣品管及標(biāo)準(zhǔn)管的 熒光值 。在稀溶液中其熒光強(qiáng)度與核黃素的濃度成正比。 （一）微生物法 原理： 某一種微生物的生長(zhǎng) (繁殖 )必需某些維生素。 本方法的最小檢出限為 。 食品中水溶性維生素的測(cè)定 食品中維生素 B1的測(cè)定 食品中維生素 B2的測(cè)定 食品中維生素 C的測(cè)定 食品中煙酸的測(cè)定 食品中維生素 B6的測(cè)定 一、維生素 B1的測(cè)定 維生素 B1又稱硫胺素、抗神經(jīng)炎素。 水溶性維生素的測(cè)定 水溶性維生素 B B2和 C，廣泛存在于動(dòng)植物組織中，飲食來源充足。 維生素 E的測(cè)定方法有：比色法、熒光法、 HPLC法等 熒光法 1原理 樣品經(jīng)皂化、提取、濃縮蒸干后，用正己烷溶解不皂化物。標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制 （ 7）標(biāo)準(zhǔn)曲線制備 取 β －胡蘿卜素標(biāo)準(zhǔn)使用液 (濃度為 50μg/mL) 、 、 、 、 ，分別置于 100mL具塞錐形瓶中，按樣品測(cè)定步驟進(jìn)行操作，點(diǎn)樣體積為，標(biāo)準(zhǔn)曲線各點(diǎn)胡蘿卜素含量依次為 、 、 、 、 。 （ 5）紙層析 點(diǎn)樣： 在 18cm 30cm濾紙下端距底邊 4cm處作一基線，在基線上取 A、 B、C、 D四點(diǎn)，吸取 ～ 液 ()在 AB和 CD間迅速點(diǎn)樣。 （ 3）洗滌 提取液靜置分層，棄去下層水溶液； 反復(fù)用 5%硫酸鈉溶液振搖洗滌，直至下層水溶液清亮為止。 蔬菜與其他植物性食物 ：取可食部用水沖洗三次后，用紗布吸去水滴，切碎，用勻漿器制成勻漿，貯于塑料瓶?jī)?nèi)，冰箱內(nèi)保存?zhèn)溆谩? 胡蘿卜素易溶于有機(jī)試劑，可用有機(jī)溶劑從食物中提取。 5 計(jì)算 式中： X2—— 某種維生素的含量， mg/100g； C—— 由標(biāo)準(zhǔn)曲線上查到某種維生素含量， μg/mL； V—— 樣品濃縮定容體積， mL； m—— 樣品質(zhì)量， g。
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