【正文】 特性： pH（ ）范圍寬，最適 pH JAM, X. L. Chen, Defa Li, 2022 ?mannanase protein expression level ?甘露聚糖酶蛋白 表達水平 ?mannanase activity ?甘露聚糖 酶活力 農(nóng) 業(yè) 部 飼 料 工 業(yè) 中 心 M A F I C Further research 進一步的研究 ? Pilot scale, massindustrial production 中試，實現(xiàn)工業(yè)化生產(chǎn) ? Determine the efficacy by animal feeding trials 動物試驗驗證其效果 National feed engineering technology research center Nankou fermentation base 國家飼料工程技術(shù)研究中心南口發(fā)酵實驗基地 農(nóng) 業(yè) 部 飼 料 工 業(yè) 中 心 M A F I C Enzyme Microb. Tech., P. Deng, Defa Li, 2022 Xylanase 木聚糖酶 ?Aspergillus niger MAFIC005 Xylanase gene ? 克隆黑曲霉 MAFIC005木聚糖酶 xynB基因， GenBank登錄號為 DQ174549 ? 實現(xiàn)了在大腸桿菌和畢赤酵母中的表達 ? 酶學(xué)性質(zhì)表明，與動物胃腸道環(huán)境相適應(yīng) ?Aspergillus sulphureus MAFIC001 Xylanase gene ? 克隆硫色曲霉 MAFIC001木聚糖酶 xynA和 xynB基因， GenBank 登錄號分別為 DQ355509和 DQ168666 ? 實現(xiàn)了在大腸桿菌和畢赤酵母中的表達 ? 酶學(xué)性質(zhì)表明，與動物胃腸道環(huán)境相適應(yīng) 農(nóng) 業(yè) 部 飼 料 工 業(yè) 中 心 M A F I C + Modified xynA 改造 xynA pGAPZαA 載體 Constitutive expression in Pichia pastoris 畢赤酵母中的組成型表達 Aspergillus sulphureus 硫色曲霉 Thermostability of the modified rebinant xylanase 改造的重組木聚糖酶熱穩(wěn)定性研究 02040608010010 30 50 70 90Time (min)Relative activity (%) ? Enzymatic activity: 120 U/mL 最高酶活力達 120 U/mL ? Protein concentration: mg/mL 蛋白濃度為 mg/mL ? Good stability: 80186。m/cm2) ΔGZn (ms/cm2) 農(nóng) 業(yè) 部 飼 料 工 業(yè) 中 心 M A F I C Enzyme preparations 酶制劑 農(nóng) 業(yè) 部 飼 料 工 業(yè) 中 心 M A F I C Complex enzymemutation and selection 復(fù)合酶 —— 誘變選育 ? Aspergillus sulphureusMAFIC001 可高產(chǎn)復(fù)合酶的硫色曲霉及其誘變篩育方法和固態(tài)發(fā)酵制備飼用復(fù)合酶的應(yīng)用 ? High yield of plex enzyme: xylanase, ?glucanase, pectinase, etc. 高產(chǎn)復(fù)合酶：木聚糖酶、 ?葡聚糖酶、果膠酶等 ? Industrial production 工業(yè)化生產(chǎn)，商業(yè)利潤超過 1000萬元 ? Aspergillus nigerMAFIC005 飼用非淀粉多糖酶高產(chǎn)菌種的選育及其固態(tài)發(fā)酵生產(chǎn)技術(shù) ? High yield of plex enzyme: xylanase, ?glucanase, pectinase, etc. 高產(chǎn)復(fù)合酶：木聚糖酶、葡聚糖酶、果膠酶等 農(nóng) 業(yè) 部 飼 料 工 業(yè) 中 心 M A F I C Existing questions and the methods to increase the yield of ?mannanase 存在問題及提高 ?甘露聚糖酶產(chǎn)量的方法 ? Low yield and enzymatic activity, difficult for massive application of ?mannanase 產(chǎn)量低，酶活力不高，使 ?甘露聚糖酶不能大量推廣使用 ?Screening high yielding A. sulphureus MAFIC001 ?mannanase strains by a mutant treatment 誘變選育高產(chǎn)硫色曲霉 MAFIC001 ?甘露聚糖酶菌種 ?Modifying ?mannanase gene sequence according to codon bias 根據(jù)密碼子偏好性，優(yōu)化 ?甘露聚糖酶基因序列 ?mannanaseAspergillus sulplhureus MAFIC001 ?甘露聚糖酶－硫色曲霉 MAFIC001 農(nóng) 業(yè) 部 飼 料 工 業(yè) 中 心 M A F I C RTPCR and rapid amplification of cDNA ends (RACE) technique RTPCR和 cDNA末端快速擴增技術(shù) Partial sequence Cterminal domain Nterminal domain 5’RACE (5’full RACE Core Set) 3’RACE (3’full RACE Core Set) Primer 1： 539。 177。m 341 387 14 Crypt depth, 181。農(nóng) 業(yè) 部 飼 料 工 業(yè) 中 心 M A F I C Alternatives of antibiotics for pigs 豬用抗生素的替代 Defa Li 李德發(fā) Ministry of Agriculture Feed Industry Centre 農(nóng)業(yè)部飼料工業(yè)中心 2022年 11月 30日于北京 農(nóng) 業(yè) 部 飼 料 工 業(yè) 中 心 M A F I C 豬營養(yǎng) 營養(yǎng)需要 與代謝 分子生物學(xué) Who operates MAFIC Research 植物提取物 免疫學(xué) 微生物學(xué) 分析化學(xué) 營養(yǎng)與免疫 基因工程菌 細胞生物學(xué) 分子營養(yǎng) 與肉品質(zhì) 團隊研究 農(nóng) 業(yè) 部 飼 料 工 業(yè) 中 心 M A F I C Antibiotics 抗生素 Residue 殘留 Resistance 耐藥性 Harmful to animal and human health 影響動物和人類的健康 Reduce the use of antibiotics 減少抗生素的使用 EU 歐盟 China 中國 Current situation and future development 現(xiàn)狀與展望 農(nóng) 業(yè) 部 飼 料 工 業(yè) 中 心 M A F I C Alternatives of antibiotics 抗生素替代 ?Antimicrobial peptides 抗菌肽 ?Herbal extracts 天然提取物 ?Enzyme preparations 酶制劑 ?Probiotics 益生素 農(nóng) 業(yè) 部 飼 料 工 業(yè) 中 心 M A F I C Probiotics 益生素 農(nóng) 業(yè) 部 飼 料 工 業(yè) 中 心 M A F I C Lactobacillus 乳酸桿菌 Mechanism 機理研究 Application 應(yīng)用研究 綠色熒光蛋白 (GFP)標(biāo)記 蛋白組學(xué) 粘附位點 無抗發(fā)酵飼料 蛋白差異 復(fù)合發(fā)酵培養(yǎng) 悉生動物模