【正文】 精液呈弱酸性。因此，牡蠣育苗的適宜水溫范圍在 20~26℃之間，采用解剖法人工授精時，取卵工作持續(xù)的時間一般不超過 4 小時。 水溶性維生素 B B B12 和維生素 C 對卵子的體外成熟具有一定的促進(jìn)作用，其最適濃度分別為維生素 B1， 5 毫克／升；維生素 B6， 6 毫克／升；維生素 B12， 0． 12 毫克／升；維生素 C，5 毫克／升。 5．胚胎的發(fā)生 (1)胚胎發(fā)生過程牡蠣的卵裂是不等全裂，經(jīng)過 6次分裂之后，胚胎發(fā)育成桑實(shí)狀，此時胚胎的內(nèi)部還沒有空腔出現(xiàn)稱為桑椹期。 擔(dān)輪幼蟲一般在受精后 12 小時左右開始出現(xiàn)，剛形成的擔(dān)輪 第 19 頁 共 72 頁 幼蟲能在膜內(nèi)轉(zhuǎn)動并在水中回旋，繼而沖破卵膜，孵化而出。后來殼頂隆起，稱為殼頂幼蟲期。此時，幼蟲殼長約270~300 微 米，殼高 310~340 微米。 (3)幼蟲的固著變態(tài)過程 當(dāng)幼蟲經(jīng)過一段時間的浮游生活以后，就必須附著在其他物體上才能變態(tài)成為稚貝。此時，幼蟲發(fā)育成殼高與殼長均為 350 微米左右近圓形的稚貝。水溫的高低也影響著牡蠣附著變態(tài)的早晚，在人工培育太平洋牡蠣幼蟲時，水溫 22。此時，分泌的足絲黏性最大，而且固著時所需的時間最短，僅用 20 分鐘左右就可完成固著動作。～ 31％。 采用顆粒固著基時，其大小不能小于幼蟲的殼長，以 400 微米以上為宜，否則幼蟲不能固著。 另外，牡蠣變態(tài)幼蟲喜歡附著在比較粗糙的固著基上，如使第 22 頁 共 72 頁 用貝殼作固著基，則大量固著在扇貝殼外面放射肋的溝凹處或文蛤殼內(nèi)面鉸合部的凹陷處，其粗糙面上的附苗量顯著多于光 6．生長 (1)生長類型牡蠣的生長可分為兩種類型，一種是階段生長型，另一種是終生生長型。軟體部一年中的增長主要在后一階段，每年冬季至第二年春季最肥滿。人工養(yǎng)殖的牡蠣，一般 2~3 齡的個體，已達(dá)收獲規(guī)格。 階段生長型的褶牡蠣也同樣存在生長的季節(jié)變化，在北方褶牡蠣的生長初期一般需要 3 個月左右才能完成，如果是夏季繁殖的褶牡蠣，生長期正值水溫適宜的 7~10 月份，因而生長旺盛，三個月后殼長達(dá) 5 厘米左右。而在養(yǎng)殖密度大的海區(qū)及貧營養(yǎng)區(qū)，由于餌料不足影響牡蠣的生長和軟體部的肥滿。這些生物與牡蠣爭奪固著基和食料，影響牡蠣的固著和生長，危害作用極大。 (2)肉食性螺類荔枝螺、紅螺、．玉螺等肉食性螺類對牡蠣的危害極為嚴(yán)重。紅螺對牡蠣的危害也極為嚴(yán)重，它們主要棲息在沙泥或沙礫底質(zhì)的低潮線以下。發(fā)生赤潮時，海水呈濃褐色，并有異常氣味。 (4)海星海星是牡蠣的大敵，能吞噬牡蠣，特別是蠣苗。幼苗受細(xì)菌感染，會大批死亡?？捎脼r青置于水中，使這些魚不敢靠近，或插上小竹片驚嚇之；也可在養(yǎng)殖場所周圍張網(wǎng)攔捕。尤其是在我國南方海區(qū)，牡蠣的半人工采苗仍然是當(dāng)前苗種來源的重要途徑。無論哪種方式采苗，首先應(yīng)選擇適宜的采苗場，通過采苗預(yù)報來確定采苗時間，同時制備采苗器材，投放到采苗場進(jìn)行采苗。港灣內(nèi)牡蠣產(chǎn)卵受精發(fā)育，由于潮汐產(chǎn)生的來復(fù)流，幼蟲大都浮游于港灣內(nèi)，不易 流失，幼蟲發(fā)育到附著時，內(nèi)灣海區(qū)風(fēng)浪平靜有利于附苗。另外，采苗器材的設(shè)置要考慮到潮差，大潮期間每天露空的時間不能超過 4 小時，以免蠣苗固著后因暴曬而死亡。形成渦流的地方，對蠣苗的群聚也十分有利，但流速不能過大，如果流速在 1 米／秒以上，采苗器不易設(shè)置，也達(dá)不到采苗的目的。 ⑤ 比重：在河口附近設(shè)置采苗器，要充分考慮到降雨造成的鹽度變化。但考慮到海水溫度和鹽都的變化以及采苗密度，只選擇每年的繁 殖盛期作為生產(chǎn)上的采苗期。因半人工采苗季節(jié)性很強(qiáng)，一失時機(jī)，就會影響一個周期的生產(chǎn)，另外，采苗器的投放時機(jī)也很重要，過早投放，浮泥和附著生物大量附著，使牡蠣幼蟲無法固著；投放過晚，采不到早期苗，或錯過時機(jī)，影響采苗效果。 在牡蠣繁殖季節(jié)，每 1～ 2 天定點(diǎn)取 20~30 個牡蠣進(jìn)行性腺檢查，牡蠣在臨近繁殖時，其肉質(zhì)部幾乎全部被性腺所覆蓋，外觀肉質(zhì)部非常豐滿，鏡檢鏡子活潑，卵子呈圓形或橢圓形，表明性腺已經(jīng)成熟。 進(jìn)行牡蠣幼蟲的采集調(diào)查，一般在牡蠣產(chǎn)卵高峰的一星期開始，在不同海區(qū)每隔 l~2 天，用 25 號浮游生物網(wǎng)，分別在中下層拖網(wǎng)取樣。 使用塑料板、貝殼、毛玻璃等作為固著基，在繁殖期前后，每日或隔日在潮間帶不同潮區(qū)投放固著基，次日取回檢查，求出單位面積的采苗數(shù)量，繪制采苗曲線，找出采苗量高峰，確定采苗期。 淺灘采苗因各地區(qū)環(huán)境、底質(zhì)和地形等的不同，對場地的要求 原則上要做到有利于水流暢通、運(yùn)輸和管理操作方便。畦與畦之間以溝相隔，為了操作方便，畦與畦之間均應(yīng)有空道。橋式采苗方法增加了附著陰面，提高附苗量。這種采苗方式適合于褶牡蠣、大連灣牡蠣等。插竹法是南方進(jìn)行牡蠣采苗和養(yǎng)殖的一種普遍方法。柵架垂下式是指在淺海區(qū)設(shè)置固定架子，在水中豎立水泥樁、木樁等，上面縱橫用竹、木架設(shè)成棚，將采苗器懸掛于棚 架上進(jìn)行采苗。 (5)蠣苗抑制 蠣苗抑制是根據(jù)牡蠣營固著生活并經(jīng)常露空的生態(tài)特點(diǎn)，每天對蠣苗進(jìn)行一定時間的露空，使之處于生活最低限度的條件下，抑制其生長，鍛煉成為適應(yīng)能力強(qiáng)的優(yōu)質(zhì)苗種。每天露空 6~8 小時為半抑制，露空 8~10 小時為全抑制。上架時間不可過早，要避免高溫季節(jié)。 經(jīng)過抑制的蠣苗即可進(jìn)行養(yǎng)成。遠(yuǎn)離河 15，無大量淡水注 入，鹽度在 2． 5％以上，水質(zhì)清新。 ③預(yù)熱池：一般建在育苗室內(nèi)，要有兩個輪換使用，預(yù)熱水體與培育水體之比為 1： 6 或 1： 8，保溫條件好。 ⑥單胞藻保種室：要求光線好，可調(diào)、控溫好，保種室面積與育苗水體之比為 1／ 15~1／ 20。 ⑧加溫設(shè)備： 一座 500 立方米水體育苗室，需要配置 1噸蒸汽鍋爐一座。 (3)親貝的選擇和促熟 ①親貝的選擇：選擇 2~3 齡，殼長 10 厘米左右的作為親貝：第 34 頁 共 72 頁 親貝入池后將其分離成單體，洗刷干凈，采用浮動網(wǎng)箱或網(wǎng) 籠吊養(yǎng)，蓄養(yǎng)密度為每立方米 40~50 個。 親貝剛?cè)顺?3 天內(nèi)不升溫，之后開始每天以 0． 5~1℃的速度升至 23℃，再恒溫培育至產(chǎn)卵。餌料不足時可用螺旋藻粉代替。 這兩種方法的優(yōu)點(diǎn)是卵子成熟較好，但要防止精子過多，影響胚胎發(fā)育。先打開貝殼挑選雌貝，用吸管吸取一滴性腺組織滴于載玻片上，如果性細(xì)胞立即散開成顆粒狀 ，則為雌性。為了提高孵化率，可以采用洗卵和分池的方法來改善水質(zhì)。幼蟲培育密度為每毫升 10 個左右。每天換水兩次，每次 1／ 2，每隔 5～6 天倒池一次。 ④幼蟲篩選：由于牡蠣幼蟲的生長期長，可達(dá) 20 天左右，在這 20 天里，幼蟲生長發(fā)育出現(xiàn)生長差異，大小不同，從而影響采苗效果。 育苗場培育的眼點(diǎn)幼蟲，可以運(yùn)輸?shù)狡渌纳a(chǎn)單位進(jìn)行采苗。或?qū)⒏街恳频搅硗獾乃乩^續(xù)培養(yǎng)，原池流水改善水質(zhì)后，可以再次投放附著基進(jìn)行二次采苗。 牡蠣具有群聚的生活習(xí)性，常多個固著一起，不僅造成牡蠣間的食物競爭，影響其生長速度，而且由于生長空間的限制，大小相差懸殊，殼形極不規(guī)則，在牡蠣苗種生產(chǎn)過程中，固著基的搬運(yùn)需要花費(fèi)大量的人力物力。因此，單體牡蠣養(yǎng)殖具有廣闊的發(fā)展前途。顆粒的大小一般為附著幼蟲的殼長，如以 0． 3～ 0． 5毫米的貝殼粉或細(xì)沙粒作為附著變態(tài)幼體的固著器，直接獲得單體牡蠣。以誘導(dǎo)太平洋牡蠣為例，當(dāng)幼體即將附著變態(tài)時，將幼蟲用 100 目篩絹濃縮在水槽中，密度在每毫升 100 個左右，向水體中加人最終濃度為 10 摩爾／升的腎上腺素，持續(xù)處理時間為 1 小時，處理結(jié)束后，用篩絹濃縮沖洗，移人用 100 目篩絹制成的網(wǎng)箱中暫養(yǎng)。藥物處理后的幼蟲經(jīng)沖洗移人 100 目的網(wǎng)箱內(nèi)第 40 頁 共 72 頁 暫養(yǎng)一段時間，根據(jù)不同大小裝入 30~40 目的網(wǎng)袋在海上進(jìn)行中間育成至苗種規(guī)格。使用腎上腺素誘導(dǎo)的方法生產(chǎn)單體牡蠣，單位水體出苗量的潛力很大，稚貝在重疊積壓的情況下，只要滿足充氣條件，稚貝可以正常生長。 牡蠣的雄性配子細(xì)胞在性成熟過程中已經(jīng)完成了兩次成熟分裂。不過，與雄性配子細(xì)胞不同的是，雌性配子細(xì)胞并不最終產(chǎn)生四個相同的細(xì)胞，并且每一個細(xì)胞只含有一套染色體。三倍體貝類的生長不需要特殊的維護(hù)，雖然發(fā)育階段開始時死亡率較高，但是最終三倍體的幼蟲會像二倍體一樣生長。三倍體最明顯的優(yōu)第 42 頁 共 72 頁 勢在于其具有不育性，使其只有極少能量用于性腺發(fā)育，更多的能量用于生長。 ①生長快：太平洋牡蠣二倍體在繁殖季節(jié)里由于精卵的排放，體重明顯下降 (下降 64％ )，殼的生長停止，而三倍體則保持繼續(xù)生長，養(yǎng)殖一年的三倍體太平洋牡蠣軟體重比二倍體增加 25％。繁殖季節(jié)過后，隨著二倍體的恢復(fù)和生長，三倍體與二倍體間生長差異有所降低。在繁殖季節(jié)，三倍體死亡率明顯降低，這種情況與三倍體育性差、體內(nèi)一直保持較高含量的糖水平有直接的關(guān)系。 ①常用的物理方法：有溫度休克和靜水壓等。對太平洋牡蠣采用 200~250 公斤／平方厘米的壓力，處理受精卵 10 分鐘左右，三倍體率為 57％。 CB具有特異性地破壞微絲的作用，使“收縮環(huán)”解體，通過阻止分裂溝的形成，抑制細(xì)胞質(zhì)分裂，阻止極體的排出。但 CB是一種劇毒化學(xué)藥物，經(jīng) CB 處理后的胚胎死亡率很高。有效使用濃度為 200~600 微米。在此基礎(chǔ)上確定適宜的處理強(qiáng)度、起始處理時間和持續(xù)處理時間。一般說來，直接觀察受精卵的發(fā)育速度，以極體出現(xiàn)的百分率作為處理時機(jī)的生物時間指標(biāo)是一個有效的方法，這種生物學(xué)指標(biāo)比較客觀地反應(yīng)了受精卵的發(fā)育進(jìn)程。受精卵發(fā)育的同步性主要與卵子的質(zhì)量有關(guān)，充分成熟的親貝產(chǎn)出的卵子同步性較高。 處理強(qiáng)度和持續(xù)處理時間之間有一定的聯(lián)系，在一定范圍內(nèi)高強(qiáng)度短時間的處理及較低強(qiáng)度的長時間處理有時會得到相同的誘導(dǎo)結(jié)果。 起始處理時間的確定需要對處理種類的受精卵早期發(fā)育過程進(jìn)行詳細(xì)了解，受精卵早 期發(fā)育過程包括胚泡破裂，極體形成及分裂等。這項(xiàng)研究結(jié)果表明，在貝類中采用四倍體與二倍體雜交是生產(chǎn)三倍體的最佳途徑。太平洋牡蠣卵子受精后 15 分鐘，用 450 微米的 6~DMAP 持續(xù)處理 10 分鐘，三倍體率為 85％，D 型幼蟲率為 64％。有效濃度為 0． 2~1． 0 毫克／升，一般溶解在等量的二甲亞砜中使用。 CB 是真菌的一類代謝產(chǎn)物，具有抑制胞質(zhì)分裂過程的效應(yīng)。使用的溫度一般是在該物種生存溫度范圍的上下限附近，如利用 4～ 5℃低溫抑制大連灣牡蠣第二極體排出，幼貝的三倍體率為 64％，這種方法比較節(jié)省，效果也較好。 通過抑制第一極體途徑獲得的三倍體，由于染色體在第二次成熟分裂過程中分離的復(fù)雜化，三倍體率、胚胎的孵化率和幼蟲的成活率都很低，不適合于大規(guī)模生產(chǎn)。牡蠣在繁殖季 節(jié)由于產(chǎn)卵、排精等活動，軟體消瘦，品質(zhì)受到較大的影響；牡蠣隨著性腺的發(fā)育，體內(nèi)糖原含量下降，品味受到較大的影響，三倍體牡蠣由于性腺發(fā)育程度差，周年保持較高水平 第 43 頁 共 72 頁 的糖原含量，一年四季鮮美肥滿，深受消費(fèi)者的喜愛。三倍體群的體重生長明顯快于二倍體對照組群體，比二倍體群體重增加16％～ 42％?？杀苊庑韵侔l(fā)育階段的生長停滯和死亡率增加；縮短養(yǎng)殖周期，降低養(yǎng)殖成本；提高養(yǎng)殖種類的商品質(zhì)量。在海洋經(jīng)濟(jì)動物方面，當(dāng)前主要進(jìn)行的是三倍體育種研究。當(dāng)精卵結(jié)合后就產(chǎn)生二倍 體個體。精子細(xì)胞成熟發(fā)育為精子。一般情況下，真核生物在形成配子的過程中，經(jīng)過兩次成熟分裂過程，即染色體復(fù)制一次，細(xì)胞分裂兩次，形成四個子細(xì)胞，每個子細(xì)胞中所含染色體數(shù)目減半，成為單倍體配子。另外，在每個貝殼上附著的稚貝又不能太多，單片的稚貝太多，下海后影響生長，并給筏式養(yǎng)殖帶來不便。 誘導(dǎo)變態(tài)率與誘導(dǎo)時幼蟲的發(fā)育階段有關(guān)，腎上腺素誘導(dǎo)幼蟲變態(tài)必須是眼點(diǎn)明顯，足部發(fā)達(dá)，剛出現(xiàn)眼點(diǎn)的幼蟲不能誘導(dǎo)變態(tài)。 物理方法除 使用的固著基不同以外，其他的苗種培育過程與常規(guī)育苗方法相同。 (1)物理方法 ①先固著后脫基法：使用易彎曲的材料作采苗器，如塑料薄板、聚丙烯包裝帶等，待牡蠣固著后，生長到 0． 5 厘米左右時，通過彎曲使之從采苗器上脫落，從而獲得單體牡蠣。單體牡蠣無固著基，其生長不受空間限制，殼形規(guī)則，大小均勻，易于裝運(yùn)、放養(yǎng)、收獲和加工。 c．投附著基后，幼蟲在貝殼上附著不均，有的多，有的少或無，一般上面多下面少，所以投附著基的池子要微量充氣，讓幼蟲在池子分布均勻；光線要均勻并弱，光照強(qiáng)度在 300 勒克斯以下；長流水和換水要經(jīng)常變動方位或移動附著基的位置；對不同水層，可把附著基定期上下顛倒，以上措施可保證牡蠣苗附著均勻。 ②投附著基后的管理工作 a．投放附著基后要立即大換水，確保幼蟲處于良好的水環(huán)境中，防止幼蟲因投附著基后環(huán)境變化大而造成幼蟲下沉和死亡，使育苗失敗或不理想。 (7)投放附著基 ①附著基的投放時機(jī)：當(dāng)眼點(diǎn)幼蟲達(dá)到 40％以上時，便可投放附著基，一般采用貝殼作附著基，在扇貝殼或牡蠣殼中間穿上孔，用細(xì)塑料繩穿著，根據(jù)育苗池的深淺確定長度，懸掛在水池中，一般每立方米水體投放 5 000 片左右。 ③清底和倒池：一般采用連續(xù)微量充氣的動水培育方法，若采用不充氣的靜水培育，需每小時攪池一次。D 形幼蟲初期日投喂量為每毫升 l 萬～ 1． 5 萬細(xì)胞；殼頂期日投喂量為 1． 5 萬～ 5 萬細(xì)胞，分 2~4 次投喂。孵化過程每小時攪動一次。將卵巢取下，攪碎，用細(xì)網(wǎng)目篩絹過濾，除去多余雜質(zhì)，受精后孵化。