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dns-aa雙向聚酰胺薄膜層析(文件)

2025-06-03 12:51 上一頁面

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【正文】 濃度之比是個(gè)常數(shù),稱為分配系數(shù) (Kd)。 Rf = 色斑中心至原點(diǎn)中心的距離 溶劑前緣至原點(diǎn)中心的距離 親和層析法 ? 親和層析( Affinity Chromatography)是利用生物分子間專一性親和力而進(jìn)行分離的一種層析技術(shù)。 ? 親和層析純化過程簡(jiǎn)單、迅速,且分離效率高。 ? 離子交換層析的固定相是離子交換劑,它是由一類不溶于水的惰性高分子聚合物基質(zhì)通過一定的化學(xué)反應(yīng)共價(jià)結(jié)合上某種電荷基團(tuán)形成的。平衡離子是結(jié)合于電荷基團(tuán)上的相反離子,它能與溶液中其它的離子基團(tuán)發(fā)生可逆的交換反應(yīng)。 ? 展層溶劑與被分離物質(zhì)在聚酰胺離子表面競(jìng)爭(zhēng)形成氫鍵,選擇適當(dāng)?shù)恼箤尤軇?,使被分離物質(zhì)在溶劑與聚酰胺薄膜表面之間的分配系數(shù)有最大差異。因此可選擇另一溶劑系統(tǒng)進(jìn)行第二向?qū)游觥? DNSCl + AA DNSAA + HCl 實(shí)驗(yàn)操作 1. DNS氨基酸的制備(已完成) 2. 混合 DNS-氨基酸的雙向?qū)游? ? 點(diǎn)樣:在薄膜右下角距兩邊各 ,直徑控制在 2~ 3mm之間,點(diǎn)在無光澤面,可重復(fù)點(diǎn)樣 23次; ? 苯-冰醋酸層析:將點(diǎn)好樣品的薄膜用回形針固定放入展層劑中,展層劑前緣在距薄膜頂端 2mm處即可停止 ,冷風(fēng)吹干,紫外燈下觀察; ? 甲酸-水層析:調(diào)轉(zhuǎn) 90度與第一相垂直,放入展層劑中,熱風(fēng)吹干,紫外燈下觀察,用鉛筆輕輕標(biāo)記 (以免損壞薄膜表面) ; ? 分析實(shí)驗(yàn)結(jié)果; ? 將層析后標(biāo)記好的薄膜以點(diǎn)樣點(diǎn)為左下角貼于實(shí)驗(yàn)報(bào)告中。 ? 紫外光對(duì)眼睛有害不要把頭伸到燈下觀察。 ? 展層時(shí)勿將點(diǎn)樣點(diǎn)浸入展層劑中。 第一向:苯-冰醋酸溶劑 第二向:甲酸-水 顯色:二甲
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