11dna重組技術(shù)的基本工具1-wenkub
2023-03-18 16:56:38 本頁面
【正文】 T4 D NA 連接酶。當限制酶在它識別序列的中心軸線兩側(cè)將 DNA 的兩條鏈分別切開時 ,產(chǎn)生的是 黏性末端 ,而當限制酶在它識別序列的中心軸線處切開時 ,產(chǎn)生的則是平末端。 3 . 你 能用圖示表示出 E co R Ⅰ 限制酶是如何切割 DN A 片段的嗎 ? 提示 :如下圖 : 二、基因工程的三種工具 活動與探究 1 . 切割 DNA 的工具是什么 ? 其作用特性是什么 ? 提示 :限制性核酸內(nèi)切酶。限制酶就是細菌的一種防御性工具 ,當外源 DNA 侵入時 ,限制酶會將外源 DNA 切割掉 ,以保證自身的安全。 ? 要想獲得某個特定性狀的基因必須要用限制酶切幾個切口？可產(chǎn)生幾個黏性末端？ 要切兩個切口，產(chǎn)生四個黏性末端。 特點： 特異性 。 ( 3 ) 堿基配對方式相同 :不同生物的 DNA 分子中兩條鏈之間的堿基配對方式均是 A 與 T 配對 , G 與 C 配對。 3 . 基因工程的目的或結(jié)果是什么 ? 基因工程是定向的嗎 ? 提示 :得到人類所需要的基因產(chǎn)物。 問題 導(dǎo)學(xué) 一、理解基因工程的概念 活動與探究 1 . 基因工程另外的名稱是什么 ? 它應(yīng)用的技術(shù)有哪些 ? 提示 :基因拼接技術(shù)或 DNA 重組技術(shù)。 ② 有一個至多個 限制酶切割位點 , 便于外源 DN A 片段 ( 基因 ) 的插入 。 ( 2 ) 種類 ?? 二、基因工程的基本工具 1 .限制性核酸內(nèi)切酶 ( 限制酶 ) —— “ 分子手術(shù)刀 ” ( 1 ) 來源 : 主要是從 原核 生物中分離純化出來的。 重點 : 基因重組技術(shù)所需的三種基本工具。 目標 導(dǎo)航 學(xué)習(xí)目標 重點難點 1 . 記住 DNA 重組技術(shù)所需三種基本工具的作用。 難點 : 基因工程載體需要具備的條件。 ( 2 ) 功能 : 能夠識別雙鏈 DN A 分子的某種 特定 核苷酸序列 , 并且使每一條鏈中 特定 部位的兩個核苷酸之間的 磷酸二酯鍵 斷開。 ?? ?? ?? ?? DN A 連接酶 : 從 大腸桿菌 中分離得 到 , 只連接互補的 黏性 末端T4DN A 連接酶 : 從 T4噬菌體 中分離出來 , 對 于兩種末端都能連接 , 但對 平末端 連接效 率比較低 3 .載體 —— “ 分子運輸車 ” ( 1 ) 最常用的載體是 質(zhì)粒 , 它是一種裸露的、結(jié)構(gòu)簡單的、獨立于細菌 擬核 DN A 之外 , 并具有自我復(fù)制能力的很小的雙鏈環(huán)狀 D N A 分子。 ③ 具有 標記基因 , 供重組DNA 的鑒定和選擇 。 DNA 體外重組和轉(zhuǎn)基因等技術(shù)?；蚬こ淌前凑杖说囊庠高M行設(shè)計和施工的 ,所以它會定向改變生物的性狀。 ? 什么叫基因工程？ 基因工程又叫 基因拼接技術(shù) 或 DNA重組技術(shù) 。 即 一種 限制酶 只能識別一種 特定的 核苷酸序列 ，并且能在 特定的切點 上切割 DNA分子。 ?如果把兩種來源不同的 DNA用同一種限制酶來切割，會怎樣呢？ 會產(chǎn)生 相同的黏性末端 ，然后讓兩者的黏性末端 黏合 起來，就似乎可以合成重組的DNA分子了。所以 ,限制酶在原核生物中主要起到切割外源 DNA 使之失效 ,從而達到保護自身的目的。限制性核酸內(nèi)切酶能夠識別雙鏈 DNA分子的某種特定核苷酸序列 ,并且使每一條鏈中特定部位的兩個核苷
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