藥品檢驗用菌種的傳代和保藏-wenkub
2023-06-10 18:20:10 本頁面
【正文】 種主要考慮其致病機理 ? 工業(yè)生產研究菌種主要考慮其發(fā)酵機理 ? 藥品微生物檢驗主要考慮其標準性 3 標準菌種的概念及其管理 ? 標準菌種是指由國家授權機構制備的具有穩(wěn)定的生物學特性并用妥善方法保藏的菌種。 ? 我國的標準菌種統(tǒng)一由 中國菌種保藏管理委員會 （ CCCCM） 管理， 涉及藥品微生物檢驗的菌種由 醫(yī)學微生物菌種保藏管理中心 （ CMCC） 提供 4 標準菌種的保藏形式 我國提供的標準菌種通常是以 凍干粉 的形式包裝于熔封的 厚玻璃容器 中 。在該細胞或孢子的生長過程種，不受其他微生物的侵犯， 不會在培養(yǎng)物中產生另外微生物種的后代，在整個生長過程中不發(fā)生變異或死亡。 10 移植（又稱接種）的兩種方式－劃線 和穿刺 劃線法是指用接種工具將微生物細胞移植在固體培養(yǎng)基斜面或平板上的一種方法 。如果是細菌，將重新形成的菌落各作穿刺培養(yǎng)，其培養(yǎng)特征應當是一致的。 14 定期移植保藏法 細菌置 4～ 6℃ 保藏，芽孢桿菌每 3～ 6個月移植一次，其他細菌每月移植一次。 擔子菌于 4～ 6℃ 保藏，每 3個月移植一次。 b:用半固體高層培養(yǎng)基穿刺培養(yǎng)，可保藏半年至一年。 液體石蠟液面以高出培養(yǎng)基上端 ～1cm為宜 4～ 6 ℃ 冰箱保藏 19 液體石蠟保藏法 ? 確保保藏環(huán)境的干燥，避免長霉。甘油冷凍管最好在 30 ℃ 貯存。 ? 對細菌、酵母菌、絲狀真菌等都有一定的效果，有些菌種最長可達 17年 。 ? 絲狀真菌于 4～ 6℃ 保藏，每 4個月移植一次。 菌種傳代次數(shù)規(guī)定： 2022版藥典規(guī)定不超過 5代。 36 實驗室菌種傳代操作步驟 ? 接種前用 1： 1000新潔爾滅擦拭工作臺面，然后開紫外燈消毒 30分鐘。 ? 接種操作：左手拿住菌種管，將管口靠近火焰旁，右手拿接種棒，將白金耳燒紅約 30秒，桿部通過火焰滅菌。 ? 細菌一個月傳代一次，枯草芽孢桿菌、短小芽孢桿菌、生孢梭菌、白色念珠菌、黑曲霉可三個月傳代一次。 b：每一子菌種都應以適當標簽、標記來表示名稱、標準號、接種日期和傳代日期。 ? 準備 10支營養(yǎng)瓊脂斜面，其中 2支用于保藏，其余 8支用于當月實驗。 ? 至 6月 22日，重復步驟 2，得第四代菌種管。 ? 涂布接種：用滅菌滴管吸取懸液滴加至改良馬丁瓊脂培養(yǎng)基斜面，每管滴加 2～ 3滴，轉動試管，使懸液與斜面表面充分接觸 41 菌種確認試驗 ? 包括以下幾個方面： 菌落生長情況：目測 染色鏡檢： 生化試驗； (1)糖醇代謝試驗 （ 2）氨基酸和蛋白質代謝試驗 （ 3）碳源和氮源利用試驗 （ 4）酶類試驗 （ 5）其他試驗 42 短小芽孢桿菌 確認該菌未發(fā)生變異的主要方法為： 通過顯微鑒別，為不呈鏈狀排列的桿菌，革蘭氏染色為陽性。 營養(yǎng)瓊脂斜面上菌苔 生長豐厚，粗糙，不透明，不閃光，蠟質，蔓延，奶油色至微褐色。 生化試驗可選做明膠穿刺和靛基質試驗、甲
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