共聚焦課件無(wú)圖-wenkub
2023-04-06 05:15:50 本頁(yè)面
【正文】 14 Zoom 電子放大 ? 共聚焦顯微鏡術(shù)中圖像的放大倍數(shù)取決于物鏡的放大倍數(shù)和電子放大倍數(shù)。 PMT Offset） （ 5）重復(fù)掃描 數(shù)字減噪（ .、 Aver.） （ 6）掃描圖分辨率（ Format） : 除此以外 物鏡（ Objective）、 掃描速度（ Scan Speed） 掃描方向（ Unidirectional Scan / Bidirectional Scan） (XDirection) 數(shù)碼放大（ Zoom In） …………… 8 Pinhole 檢測(cè)針孔：默認(rèn)值 =1，數(shù)值 1解像度較好， 數(shù)值 1訊燥比較好 Pin= Pin=1 Pin=2 9 光電倍增管 PMT PMT gain /PMT ffset 10 體會(huì)值： 480 ~ 500 Gain 680 ~760 8 ~ 0 Offest + 0 ~ + 2 0 255 0 255 0 255 11 用線平均法進(jìn)行線掃描 用線平均法進(jìn)行線掃描 Line Aversge的作用是使用平均法線掃描的圖像 ， 即對(duì)每條線進(jìn)行重復(fù)多次的掃描 ， 并求每個(gè)采樣點(diǎn)的算術(shù)平均值 。 體會(huì)值 ：常用 4， ACCU掃描模式選 8。物鏡的放大產(chǎn)生的原是圖像本身就一個(gè)放大倍數(shù)，還可以通過(guò)電子放大進(jìn)一步提高放大倍數(shù)。 ? 對(duì)于易于漂白的樣本、樣本的熒光強(qiáng)度很低的樣本、多光子掃描模式，建議少用電子放大。 。 例如 FITC：在 pH68時(shí) ， 很難跨過(guò)完整的活細(xì)胞膜使之染色 ， 但在 。 。 。 Fluo3的激發(fā)波長(zhǎng)是 506nm， 最大發(fā)射波長(zhǎng)為 526nm。 ， 例如 。 有時(shí) ， 雖然樣品已經(jīng)標(biāo)記了熒光 ， 但是如果觀察樣品所使用的條件不適宜 ， 也會(huì)觀察不到熒光 。 ⑥ 其他原因：例如 ， 加入試劑種類 、 順序錯(cuò)誤 、 漏加試劑及不當(dāng)?shù)牟僮骶蓪?dǎo)致熒光標(biāo)記失敗 。 25 （四）厚片樣本（ Thick Samples） 對(duì)于厚樣本（ 20－ 2mm）在使用中應(yīng)注意： ? 蓋玻片要貼緊樣本，不要留有空隙，以免工作距
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