【正文】 霉素產(chǎn)量有明顯促進作用。L1） 圖 10 釀酒酵母發(fā)酵液添加量對納他霉素產(chǎn)量的影響的影響 Fig 10 Effects of addition amount of Saccharomyces cerevisiae fermentation broth on the natamycin production of N5 strain 3 討論與結(jié)論 隨著人們對健康、安全問題的日益關(guān)注，食品安全問題越來越受到人們的重視，化學防腐劑的缺點逐漸暴露，納他霉素受到人們的青睞。 01CK 1% 2% 5% 8% 10% 15% 20%納他霉素產(chǎn)量（g從圖 8中可以添加 5％的產(chǎn)黃青霉發(fā)酵液對 N5 菌株納他霉素的積累效果最顯著，此時納他霉素產(chǎn)量達 ，較對照提高 %。 圖 6 黑曲霉培養(yǎng)時間對納他霉素產(chǎn)量的影響 Fig 6 Effects of culture time of Aspergillus Niger on the natamycin production of N5 strain 釀酒酵母培養(yǎng)時間對 N5菌株納他霉素產(chǎn)量的影響 釀酒酵母培養(yǎng)時間對 N5 菌株納他霉素產(chǎn)量的影響如圖 7 所示。隨著產(chǎn)黃青霉培養(yǎng)時間的延長，發(fā)酵液 對 N5 納他霉素產(chǎn)量的促進作用呈下降趨勢。由圖可見，釀酒酵母發(fā)酵液也可明顯促進 N5 菌株納他霉素的合成，最適接入時間也是菌株培養(yǎng)的 12h。從圖 3 中可以看出黑曲霉發(fā)酵液對 N5 菌株納他霉素產(chǎn)量的提高有顯著的促進作用 。 y = 489 x + 065R2 = 988010 1 2 3 4 5 6 7納他霉素濃度（ m g / L ）OD303值 圖 1 納他霉素標準溶液曲線 Fig1 The standard curve of natamyctn 發(fā)酵液加入時間對 N5 菌株納他霉素產(chǎn)量的影響 產(chǎn)黃青霉發(fā)酵液加入時間對 N5 菌株納他霉素產(chǎn)量的影響 將產(chǎn)黃青霉發(fā)酵培養(yǎng)基進行適當處理后接種于培養(yǎng)不同時間的納塔爾鏈霉菌 N5 菌株發(fā)酵液中，繼續(xù)培養(yǎng)，當菌株培養(yǎng) 4d 時用紫外分光光度法測定納他霉素產(chǎn)量，結(jié)果如圖 2 所示。確定 3 種真菌的最佳發(fā)酵時間。繼續(xù)培養(yǎng) 84h后測定菌株納他霉 3 素產(chǎn)量。培養(yǎng) 4d 后測定菌株納他霉素產(chǎn)量。 取 N5 菌株發(fā)酵液 于 5%冰乙酸的甲醇溶液中。 黑曲霉、產(chǎn)黃青霉、釀酒酵母由安徽農(nóng)業(yè)大學生命科學學院微生物學實驗室保藏。 提高納他霉素產(chǎn)量可以通過添加誘導(dǎo)子的方法。迄今為止納他霉素已經(jīng)在食品工業(yè)中得到廣泛應(yīng)用 [7]。 由于其分子上的疏水部分可以范德華力與細胞質(zhì)膜上的甾醇分子結(jié)合，形成抗生素 － 甾醇復(fù)合物，破壞細胞質(zhì)膜滲透性，引起菌體細胞內(nèi)電解質(zhì)滲出，因而可導(dǎo)致菌體死亡，起到抑菌作用 [4]。 產(chǎn)黃青霉和黑曲霉培養(yǎng) 1d 時，其發(fā)酵液對 N5 菌株納他霉素的合成促進效果最佳，而釀酒酵母在 3d 時促進效 果最好，此時菌株納他霉素產(chǎn)量較未加真菌發(fā)酵液處理樣品高出約 1 倍。 合肥 二 o 1 3 年 5 月 目 錄 摘要 1 前言 1 1 實驗材料及方法 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 3 2 結(jié)果與分析 3 3 N5菌株納他霉素產(chǎn)量的影響 3 N5 菌株納他霉素產(chǎn)量的影響 3 酵液加入時間對 N5 菌株納他霉素產(chǎn)量的影響 4 酵液加入時間對 N5 菌株納他霉素產(chǎn)量的影響 5 N5 菌株納他霉素產(chǎn)量的影響 5 產(chǎn)黃青霉培養(yǎng)時間對 N5菌株納他霉素產(chǎn)量的影響 5 N5菌株納他霉素產(chǎn)量的影響 6 N5 菌株納他霉素產(chǎn)量的影響 6 N5菌株納他霉素產(chǎn)量的影響 7 發(fā)酵液添加量對 N5 菌株納他霉素產(chǎn)量的影響 7 發(fā)酵液添加量對 N5菌株納他霉素 產(chǎn)量的影響 8 發(fā)酵液添加量對 N5 菌株納他霉素產(chǎn)量的影響 8 3 討論與結(jié)論 9 參考文獻 9 致謝 10 英文摘要 10 1 真菌發(fā)酵液對納塔爾鏈霉菌納他霉素產(chǎn)量的影響 作者：潘 指導(dǎo)教師：曹 （安徽農(nóng)業(yè)大學生命科學學院 2021級生物技術(shù) 1班，學號 09121012） 摘要：納他霉素是由納塔爾鏈霉菌（ streptomyces natalensis） 、褐黃孢鏈霉菌（ streptomyces gilvosporeus）、恰塔努加鏈霉菌（ streptomyces chattanoogensis）等菌株發(fā)酵而產(chǎn)生的一種廣譜抗真菌劑。因其低毒和極小改變食物本身味道可作為生物防腐劑。 關(guān)鍵詞：納塔爾鏈霉菌 N5 菌株 納他霉素 產(chǎn)黃青霉 黑曲霉 釀酒酵母 前言 1955 年 struyk 等人首次從南非 natal 州土壤中分離得到納塔爾鏈霉菌（ streptomyces natalensis），并發(fā)現(xiàn)該菌種可以產(chǎn)生一種內(nèi)酯類抗生素， strnyk 將其命名為匹馬菌素（ pimaricin） [1]， 后世界衛(wèi)生組織將其統(tǒng)一命名為納他霉素。 納他霉素在室溫下溶解度僅為 30100mg/L，微溶于甲醇，易溶于稀酸、冰醋酸和二甲基甲酰胺，不溶于非極性溶劑 [5]。 由于各種因素的制約，國內(nèi)納他霉素的主要來源至今仍然是從國外進口。已有報道稱一些微生物的發(fā)酵代謝物可產(chǎn)生某種誘導(dǎo)子調(diào)節(jié)其它微生物的次級代謝，促進其次級代謝產(chǎn)物的生成 [8,9,10]。 培養(yǎng)基 種子培養(yǎng)基 (g/L)：葡萄糖 酵母浸膏 蛋白胨 氯化鈉 10， pH 發(fā)酵培養(yǎng)基 (g/L)：葡萄糖 酵母浸膏 大豆蛋白胨 淀粉 40， 實驗方法 納塔爾鏈霉菌的培養(yǎng) 用接種環(huán)刮取斜面菌種一環(huán)于裝有 25mL 種子培養(yǎng)基的 250mL 三角瓶中， 28℃、 200r/min 搖床培養(yǎng)， 40h后以 9%接種量 接種于裝有 30mL 發(fā)酵培養(yǎng)基的 250mL 三角瓶中，28℃、 200r/min 搖床培養(yǎng) 4d。在震蕩器上震蕩 5min 后 10000r/min 離心15min。確定真菌發(fā)酵液最適添加時間。確定 3 種真菌的最佳發(fā)酵時間。 2．結(jié)果及分析 納他霉素標準曲線的制作 以納他霉素濃度為橫坐標， OD303 值為縱坐標繪制納他霉素標準曲線，見圖 1。由圖 2可看 出產(chǎn)黃青霉發(fā)酵液對 N5 菌株納他霉素產(chǎn)量有明顯的促進作用 ，當在發(fā)酵培養(yǎng) 12h 時添加效果最佳，此時菌株納他霉素產(chǎn)量達 ，較對照提高 ％。當在發(fā)酵培養(yǎng) 12h 時添加效果最佳，此時菌株納他霉素產(chǎn)量達 ，較對照提高 ％。 01CK 0h 12h 24h 36h 48h 60h 72h納他霉素產(chǎn)量（g因此，產(chǎn)黃青霉的最佳培養(yǎng)時間為 1d。由圖 7 可見，當在 N5菌株發(fā)酵液中添加培養(yǎng) 3d 的釀酒酵母發(fā)酵液時，納他霉素產(chǎn)量最高，因此， 釀酒酵母的最佳培養(yǎng)時間確定為 3d。 01CK 1% 2% 5% 8% 10% 15% 20%納他霉素產(chǎn)量（gL