1什么是感受態(tài)？細菌處于0℃，01mcacl2低滲溶液中，使菌細胞膨脹成-wenkub
2022-09-02 14:24:37 本頁面
【正文】 機都有最高轉(zhuǎn)速限制，不通轉(zhuǎn)子的最高轉(zhuǎn)速不一樣，轉(zhuǎn)子越小最高轉(zhuǎn)速越高，注意不要超過最高轉(zhuǎn)速。 (3) 開蓋：盡量縮短開蓋時間，因為時間太長，一方面使離心機內(nèi)溫度升高較大，另一方面也會增加離心機內(nèi)的水汽凝結(jié)，加重了離心機的損耗。 4. 什么是基因重組？ 從廣義上講 ,任何造成基因型變化的基因交流過程 ,都叫做基因重組。？ 細菌處于 0℃， CaCl2 低滲溶液中，使菌細胞膨脹成球形，處于容易吸收外源 DNA的狀態(tài)，該狀態(tài)稱為感受態(tài)。而狹義的基因重組僅指涉及 DNA 分子內(nèi)斷裂 — 復(fù)合的基因交流。 (4) 上轉(zhuǎn)子：上轉(zhuǎn)子時切忌用力過大，上的過緊，如果很緊的話會造成緩沖環(huán)的損耗。 (8) 善后工作：離心完畢后一定要把離心機的轉(zhuǎn)子卸下來，擦干離心機里的水滴，然后在關(guān)機。 (3)濃度和粘度大的液體，會產(chǎn)生誤差，為消除其誤差的補償量，可由試驗確定，補償量可用調(diào)節(jié)旋鈕改變讀數(shù)窗的讀數(shù)來進行設(shè)定。?數(shù) 字清清楚楚在顯示窗中， ?旋轉(zhuǎn)到所需量程 ?(7)在設(shè)置量程時，請注意 (8)移液器嚴禁吸取有強揮發(fā)性、強腐蝕性的液體（如濃酸、濃堿、有機物等）。 轉(zhuǎn)化后在含抗生素的平板上長出的菌落即為轉(zhuǎn)化子，根據(jù)此皿中的菌落數(shù)可計算出轉(zhuǎn)化子總數(shù)和轉(zhuǎn)化頻率，公式如下： 轉(zhuǎn)化子總數(shù)＝菌落數(shù) 稀釋倍數(shù) 轉(zhuǎn)化反應(yīng)原液總體積／涂板菌液體積 轉(zhuǎn)化頻率（轉(zhuǎn)化子數(shù)／每 mg 質(zhì)粒 DNA）＝轉(zhuǎn)化子總數(shù)／質(zhì)粒 DNA 加入量 (mg) 感受態(tài)細胞總數(shù)＝對照組２菌落數(shù) 稀釋倍數(shù) 菌液總體積／涂板菌液體積 感受態(tài)細胞轉(zhuǎn)化效率＝轉(zhuǎn)化子總數(shù)／感受態(tài)細胞總數(shù) 8. 簡述影響 轉(zhuǎn)化效率 的因素 提高轉(zhuǎn)化效率 , 實驗中要考慮以下幾個重要因素： (1). 細胞生長狀態(tài)和密度 : 不要用經(jīng)過多次轉(zhuǎn)接或儲于４ ℃ 的培養(yǎng)菌，最好從－ 70℃ 或20℃ 甘油保存的菌種中直接轉(zhuǎn)接用于制備感受態(tài)細胞的菌液。 (2). 質(zhì)粒的質(zhì)量和濃度 : 用于轉(zhuǎn)化的質(zhì)粒 DNA 應(yīng)主要是超螺旋態(tài) DNA(cccDNA)。 (3). 試劑的質(zhì)量 : 所用的試劑 ,如 CaCl2 等均需是最高純度的 ( AR.),并用超純水配制 ,最好分裝保存于干燥的冷暗處。 當加入 的乙酸鉀高鹽緩沖液恢復(fù) pH 至中性時，共價閉合環(huán)狀的質(zhì)粒 DNA 的兩條互補鏈仍保持在一起，因此復(fù)性迅速而準確，而線性的染色體 DNA 的兩條互補鏈彼此已完全分開，復(fù)性就不會那么迅速而準確，它們纏繞形成網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，通過離心，染色體 DNA 與不穩(wěn)定的大分子 RNA，蛋白質(zhì) SDS 復(fù)合 物等一起沉淀下來而被除去。 11. 加入溶液Ⅰ，Ⅱ，Ⅲ的目的和作用？ 堿裂解法提取質(zhì)粒
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