廣大土壤中分離芽胞桿菌副本(已修改)
2025-07-08 20:59 本頁面
【正文】 綜合性實驗方案土壤中產淀粉酶芽孢桿菌的篩選及淀粉酶活力的測定 一、摘要 本實驗通過從土壤中分離出能產淀粉酶的芽孢桿菌并對其進行鑒定、保存，試驗中涉及菌株的分離純化、菌株的形態(tài)學鑒定和生理生化鑒定，根據(jù)伯杰氏細菌手冊鑒定其中的種屬。 實驗中通過80℃水浴20min預處理，殺死無芽孢菌體，篩選出芽孢桿菌；再用稀釋涂布平板法對芽孢桿菌進行初步篩選；又通過分區(qū)劃線對初篩選菌株進一步分離純化；然后再用選擇性淀粉培養(yǎng)基進行篩選，得到純培養(yǎng)的產淀粉酶，以及產芽孢的桿菌，最后通過對產淀粉酶芽孢桿菌做相關的生理生化實驗，將篩選出來的菌株進行鑒別，鑒別到了地衣芽孢桿菌和環(huán)狀芽孢桿菌。 關鍵詞：芽孢桿菌 淀粉酶 酶活測定二、實驗目的要求 了解微生物分離純化的原理及微生物分離純化常用的方法和技術； 掌握從土壤中篩選產淀粉酶菌株的原理及方法； 掌握微生物的搖瓶培養(yǎng)方法及淀粉酶活力測定的原理及方法； 培養(yǎng)學生自行設計實驗方案流程、綜合分析解決問題及判斷實驗結果的能力； 對所學習過的微生物實驗方法井陘綜合技能訓練； 從不同環(huán)境土壤樣品中篩選出能產淀粉酶的芽孢桿菌，并分析比較各種淀粉酶菌株的產淀粉酶活力及總結各芽孢桿菌在土壤中的分布情況；三、實驗原理 土壤是微生物生活的大本營，它所含微生物無論是數(shù)量還是種類都是極其豐富的。因此，土壤是微生物多樣性的重要場所，是發(fā)掘微生物資源的重要基地，可以從中分離、純化得到許多有價值的菌株。 從混雜微生物群體中獲得只含有某一種或某一株微生物的過程稱為微生物分離與純化。平板分離法普遍用于微生物的分離與純化。其基本原理是選擇適合與待分離微生物的生長條件，如營養(yǎng)成分、酸堿度、溫度和氧等要求，或加入某種抑制劑造成只利于該微生物生長，而抑制其他微生物生長的環(huán)境，從而淘汰一些不需要的微生物。 微生物在固體培養(yǎng)基上生長形成的單個菌落，通常是由有一個細胞繁殖而成的集合體。因此可通過挑取單菌落而獲得一種純培養(yǎng)。獲取單個菌落的方法可通過稀釋涂布平板法或平板劃線等技術完成。值得指出的是，從微生物群體中經分離生長在平板上的單的菌落并不一定保證是純培養(yǎng)。因此，純培養(yǎng)的確定除觀察其菌落特征外，還要結合顯微鏡檢測個體形態(tài)特征后才能確定，有些微生物的純培養(yǎng)要經過一系列分離與純化過程和多種特征鑒定才能得到。 芽孢桿菌是土壤細菌中最具活力的部分之一，也是土壤細菌的主要種群之一。 芽孢桿菌屬實一類好氧或兼性厭氧、產生抗逆性內生孢子的桿狀細菌。多數(shù)為腐生菌，主要分布于土壤、動植物體表及水體中。由于芽孢桿菌屬的細菌可以產生多種有用代謝產物，芽孢又是菌體度過不良環(huán)境的休眠體，因此，在工、農業(yè)生產商有較高的應用價值。 實驗材料與方法 實驗材料選取廣大理南前面、廣大生化樓前小河附近兩處的土壤，五點法采集，邊長15cm。鏟去表層土，去10cm深土壤，每一個土樣約200g左右（每個點40g)。將土樣放入無菌的紙袋中，并記錄采集的時間、地點、植被類型，4℃冰箱中保存?zhèn)溆?。分別記做
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