【正文】 高效液相色譜儀確認(rèn)方案文件編號(hào)：頁(yè)數(shù)：第 43 頁(yè) 共 43 頁(yè)質(zhì)量控制部高效液相色譜儀確認(rèn)方案設(shè)備編碼：QCDJY001方案編號(hào)：XXXXX藥業(yè)有限公司目錄1 目的2 范圍3 職責(zé)4 參考文件5 系統(tǒng)描述6 確認(rèn)的實(shí)施 人員及人員培訓(xùn)確認(rèn) 安裝確認(rèn) 運(yùn)行確認(rèn) 性能確認(rèn)7 偏差報(bào)告8 偏差清單9 安裝確認(rèn)結(jié)論和報(bào)告10 變更控制起草審核審核批準(zhǔn)生效日期部門質(zhì)量控制部質(zhì)量控制部質(zhì)量保證部質(zhì)量管理負(fù)責(zé)人職務(wù)檢驗(yàn)員負(fù)責(zé)人負(fù)責(zé)人副總簽名日期1. 目的為了確認(rèn)本公司質(zhì)量控制部XXXX高效液相色譜儀的安裝、運(yùn)行和性能是否符合《藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范（2010年修訂）》的要求和檢測(cè)要求。通過(guò)確認(rèn)，證明此設(shè)備安裝、運(yùn)行、性能等符合設(shè)備要求和使用維護(hù)要求，根據(jù)風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估的結(jié)果，對(duì)XXXX高效液相色譜儀的安裝、運(yùn)行及性能提出要求，并能有效達(dá)到，降低檢測(cè)風(fēng)險(xiǎn)。2. 范圍本確認(rèn)范圍為安裝在質(zhì)量控制部的的XXXX高效液相色譜儀的安裝、運(yùn)行、性能確認(rèn)。3. 職責(zé)序號(hào)部門驗(yàn)證職責(zé)1質(zhì)量控制部QC負(fù)責(zé)起草驗(yàn)證方案，實(shí)施驗(yàn)證方案，出具驗(yàn)證報(bào)告。2質(zhì)量保證部QA負(fù)責(zé)驗(yàn)證方案的數(shù)據(jù)收集審核，監(jiān)控驗(yàn)證過(guò)程。3質(zhì)量管理負(fù)責(zé)人負(fù)責(zé)驗(yàn)證方案與報(bào)告的批準(zhǔn)。4. 參考文件《藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范（2010年修訂）》《藥品GMP指南 質(zhì)量控制實(shí)驗(yàn)室與物料管理》 （中國(guó)醫(yī)藥科技出版社）《藥品生產(chǎn)驗(yàn)證指南2003》 (化學(xué)工業(yè)出版社)《中國(guó)藥典》2010年版 （中國(guó)醫(yī)藥科技出版社）國(guó)家計(jì)量檢定規(guī)程：高效液相色譜儀 JJG70520025. 系統(tǒng)描述XXXX型高效液相色譜儀，主要由輸液系統(tǒng)、進(jìn)樣系統(tǒng)、柱溫控制系統(tǒng)和檢測(cè)系統(tǒng)組成，全部由XXXX公司生產(chǎn)。主要用于公司原輔料、中間產(chǎn)品和成品的鑒別、含量、有關(guān)物質(zhì)的檢測(cè)。6 確認(rèn)的實(shí)施 人員確認(rèn)列出和確認(rèn)所有執(zhí)行本方案的人員，并確保每個(gè)參與確認(rèn)的人員都得到了培訓(xùn)。標(biāo)準(zhǔn)要求和確認(rèn)記錄見(jiàn)附表1。 安裝確認(rèn) 硬件、資料的確認(rèn)和售后服務(wù)保障查看儀器的各部件是否齊全。檢查儀器所帶資料是否齊全。記錄儀器設(shè)備的售后聯(lián)系方式。標(biāo)準(zhǔn)要求和確認(rèn)記錄見(jiàn)附表2。 安裝條件確認(rèn)對(duì)照使用說(shuō)明書(shū)要求安裝，確認(rèn)環(huán)境、電源等符合要求。標(biāo)準(zhǔn)要求和確認(rèn)記錄見(jiàn)附表3。 運(yùn)行確認(rèn)在不提供任何樣品的前提下，運(yùn)行儀器以確認(rèn)儀器運(yùn)行是否正常及是否符合設(shè)計(jì)要求。標(biāo)準(zhǔn)要求和確認(rèn)記錄見(jiàn)附表4。 性能確認(rèn) 泵性能確認(rèn) 泵耐壓確認(rèn)將儀器各部分連接好，以100%甲醇為流動(dòng)相，流量為1ml/min，啟動(dòng)儀器，壓力穩(wěn)后保持10min，用濾紙檢查各管路接口處應(yīng)無(wú)濕跡。卸下色譜柱，堵住泵出口端，使壓力達(dá)到最大允許值的90%，保持5分鐘無(wú)泄漏。標(biāo)準(zhǔn)要求和確認(rèn)記錄見(jiàn)附表5。 泵流量設(shè)定值誤差Ss、流量穩(wěn)定性誤差SR的確認(rèn)按要求設(shè)定流量，啟動(dòng)儀器，壓力穩(wěn)定后，在流動(dòng)相出口處用事先清洗稱重的容量瓶收集流動(dòng)相，同時(shí)用秒表計(jì)時(shí)，收集規(guī)定時(shí)間流出的流動(dòng)相，在分析天平上稱重，按下式計(jì)算Ss和SR。式中Fm－－Fm=(W2W1)/(ρtt)，流量實(shí)測(cè)值，ml/min。W2－－容量瓶+流動(dòng)相的質(zhì)量，g；W1－－容量瓶的質(zhì)量，g；ρt－－實(shí)驗(yàn)溫度下流動(dòng)相的密度，g/cm3。t－－收集流動(dòng)相的時(shí)間，min；－－同一組測(cè)量的算術(shù)平均值，ml/min；FS－－流量設(shè)定值，ml/min；Fmax－－同一組測(cè)量中流量最大值，ml/min；Fmin－－同一組測(cè)量中流量最小值，ml/min；標(biāo)準(zhǔn)要求和確認(rèn)記錄見(jiàn)附表6。 梯度誤差的確認(rèn)由梯度控制裝置設(shè)置階梯式的梯度洗脫程序，A溶劑為純水，%丙酮的水溶液，B經(jīng)由5個(gè)階梯從0變到100%，如下圖所示。將輸液泵和檢測(cè)器連接（不接色譜柱），開(kāi)機(jī)后以A溶劑沖洗系統(tǒng)，基線平穩(wěn)后開(kāi)始執(zhí)行梯度程序，畫(huà)出梯度變化曲線。求出A,B溶劑不同比例時(shí)的輸出信號(hào)值，重復(fù)測(cè)量2次，計(jì)算平均值。從B溶劑的含量及對(duì)應(yīng)的輸出信號(hào)值，按下式計(jì)算梯度誤差Gci，取Gci最大者作為儀器梯度誤差。記錄見(jiàn)下表式中：－－第i段梯度誤差（%）； －－第i段輸出信號(hào)值平均值； －－各段輸出信號(hào)平均值的平均值。標(biāo)準(zhǔn)要求和確認(rèn)記錄見(jiàn)附表7。 柱溫箱性能確認(rèn)柱溫箱溫度設(shè)定值誤差ΔTS和溫控穩(wěn)定性Tc的確認(rèn)將數(shù)字溫度計(jì)控頭固定在柱溫箱內(nèi)，選擇35℃、45℃和60℃進(jìn)行檢定。設(shè)定溫度，待溫度穩(wěn)定后，記下溫度計(jì)讀數(shù)并開(kāi)始計(jì)時(shí)，以后每隔10min記錄一次讀數(shù)，共計(jì)7次，求出平均值。平均值與設(shè)定值之差為ΔTS，7次讀數(shù)中最大值與最小值之差為控溫穩(wěn)定性Tc。標(biāo)準(zhǔn)要求和確認(rèn)記錄見(jiàn)附表8 紫外檢測(cè)器的性能確認(rèn) 紫外檢測(cè)器的波長(zhǎng)示值誤差和波長(zhǎng)重復(fù)性確認(rèn)將高效液相色譜儀開(kāi)機(jī)，正常運(yùn)行后，用注射器將紫外波長(zhǎng)標(biāo)準(zhǔn)溶液（標(biāo)準(zhǔn)波長(zhǎng)為235nm，257nm，313nm和350nm）從檢測(cè)器入口注入樣品池中沖洗，并將池流滿。將檢測(cè)器波長(zhǎng)調(diào)到低于標(biāo)準(zhǔn)波長(zhǎng)5nm處，調(diào)節(jié)檢測(cè)器的波長(zhǎng)，每5～10s改變1nm,畫(huà)出如下圖所示的信號(hào)值折線，折線的最高點(diǎn)或最低點(diǎn)對(duì)應(yīng)的波長(zhǎng)與標(biāo)準(zhǔn)溶液波長(zhǎng)之差為波長(zhǎng)示值誤差。每個(gè)波長(zhǎng)重復(fù)測(cè)定3次，其中最大值與最小值之差為波長(zhǎng)重復(fù)性誤差。標(biāo)準(zhǔn)要求和確認(rèn)記錄見(jiàn)附表9。 紫外檢測(cè)器基線噪聲和基線漂移的確認(rèn)選用C18色譜柱，以100%甲醇為流動(dòng)相，紫外檢測(cè)器的波長(zhǎng)選擇254nm，待儀器穩(wěn)定后記錄基線60min，計(jì)算基線噪聲和漂移。標(biāo)準(zhǔn)要求和確認(rèn)記錄見(jiàn)附表10。 紫外檢測(cè)器最小檢測(cè)濃度的確認(rèn)選用C18色譜柱，以100%甲醇為流動(dòng)相，紫外檢測(cè)器的波長(zhǎng)選擇254nm，取10～20ul的1107g/ml的萘/甲醇溶液，記錄色譜圖，由色譜峰高和基線噪聲峰峰高，按下式計(jì)算最小檢測(cè)濃度cL（按20ul進(jìn)樣量計(jì)算）。式中： cL－－最小檢測(cè)濃度，g/ml； Nd－－基線噪聲峰峰高，AU； c－－標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度，g/ml； H－－標(biāo)準(zhǔn)溶液的色譜峰高，AU； V－－進(jìn)樣體積，ul。標(biāo)準(zhǔn)要求和確認(rèn)記錄見(jiàn)附表11 紫外檢測(cè)器的線性范圍的確認(rèn)檢測(cè)波長(zhǎng)選擇254nm，用2%的異丙醇/水溶液沖洗檢測(cè)池至平衡，記錄響應(yīng)值，再分別用丙酮/2%異丙醇系列的水溶液（%，%，%，%，%，%，%，%，%，%）沖洗檢測(cè)池，并記下各溶液對(duì)應(yīng)的穩(wěn)定的響應(yīng)值，每個(gè)溶液重復(fù)測(cè)量3次，取算術(shù)平均值。以5個(gè)丙酮含量（%，%，%，%，%）和對(duì)應(yīng)的響應(yīng)值做標(biāo)準(zhǔn)曲線，%各點(diǎn)的讀數(shù)，與對(duì)應(yīng)含量的測(cè)量值做比較，測(cè)量值低于讀數(shù)5%時(shí)，認(rèn)為曲線彎曲，此點(diǎn)的濃度作為檢測(cè)上限cH。選用C18色譜柱，以100%甲醇為流動(dòng)相，紫外檢測(cè)器的波長(zhǎng)選擇254nm，取10～20ul的1107g/ml的丙酮/甲醇溶液，記錄色譜圖，由色譜峰高和基線噪聲峰峰高，按下式計(jì)算最小檢測(cè)濃度cL（按20ul進(jìn)樣量計(jì)算）。由cH/cL算出檢測(cè)器的線性范圍。式中： cL－－最小檢測(cè)濃度，g/ml； Nd－－基線噪聲峰峰高，AU； c－－標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度，g/ml； H－－標(biāo)準(zhǔn)溶液的色譜峰高，AU； V－－進(jìn)樣體積，ul。標(biāo)準(zhǔn)要求和確認(rèn)記錄見(jiàn)附表12。 熒光檢測(cè)器性能確認(rèn) 熒光檢測(cè)器波長(zhǎng)示值誤差和重復(fù)性將高效液相色譜儀開(kāi)機(jī)，正常運(yùn)行后，用注射器將1105g/ml萘/甲醇溶液（萘在激發(fā)波長(zhǎng)290nm和發(fā)射波長(zhǎng)330nm有最大熒光強(qiáng)度）從檢測(cè)器入口注入樣品池中沖洗，并將池流滿。將檢測(cè)器激發(fā)波長(zhǎng)調(diào)到290nm處，改變發(fā)射波長(zhǎng)，從325nm到335nm，每5～10s改變1nm,畫(huà)出如下圖所示的信