【正文】 松材線蟲病防治技術方案（修訂版）此件為國家林業(yè)局關于印發(fā)《松材線蟲病防治技術方案（修訂版）》的通知》（林造發(fā)[]號）的附件，請結合當地實際貫徹落實。為保護我國森林資源安全和造林綠化成果，促進經濟和生態(tài)建設穩(wěn)步發(fā)展，遏制松材線蟲病嚴重發(fā)生和擴散蔓延的勢頭，提高防治成效，特制定本方案。矚慫潤厲釤瘞睞櫪廡賴賃軔朧。一、疫情普查監(jiān)測（一）疫情普查．普查范圍本行政區(qū)轄內的所有松林。重點是與疫區(qū)毗鄰地帶、交通沿線、港口、風景區(qū)、松木制品生產和使用單位、建筑工地、倉庫、駐軍營房、城鎮(zhèn)、木材集散地、移動通訊站、電視發(fā)射臺、高壓線塔、電纜線路、光纜線路及高壓線路等地區(qū)附近的松林。聞創(chuàng)溝燴鐺險愛氌譴凈禍測樅。．普查內容（）疫情發(fā)生區(qū)查清發(fā)生分布范圍、發(fā)生面積（以小班面積為準，孤立松林以實際面積統(tǒng)計）和病死樹數量，繪制發(fā)生分布圖表（省級到縣級、縣級到小班），計算病死樹株率和經濟損失，掌握疫情發(fā)生情況，為制定年度防治計劃提供依據。殘騖樓諍錈瀨濟溆塹籟婭騍東。（）非疫情發(fā)生區(qū)查清發(fā)現枯死松樹分布地點、樹種、面積、枯死株數、松褐天牛危害情況，繪制松樹枯死情況分布圖表（省級到縣級、縣級到小班）。釅錒極額閉鎮(zhèn)檜豬訣錐顧葒鈀。．普查時間一般地區(qū)每年普查工作不得少于次。在松褐天牛一年兩代的地區(qū)普查時間為－月份；松褐天牛一年一代的地區(qū)普查時間為－月份。彈貿攝爾霽斃攬磚鹵廡詒爾膚。重點區(qū)域每年普查工作至少次，除在秋季開展普查外，在春季還應開展疫情普查工作。松褐天牛一年兩代的地區(qū)在－月份進行；松褐天牛一年一代的地區(qū)在－月份進行。謀蕎摶篋飆鐸懟類蔣薔點鉍雜。．普查方法（）踏查。根據當地松林分布的特點，設計出便于觀察全部林分的踏查路線；沿踏查路線用目測方法或借用望遠鏡查找有無當年枯死樹，或針葉褪色，或針葉黃化，或針葉枯萎，或針葉呈紅褐色等癥狀的松樹，選擇取樣對象。廈礴懇蹣駢時盡繼價騷巹癩龔。（）詳查。根據踏查結果，對可疑發(fā)病林分進一步抽取一定數量的樣品，進行分離鑒定，確定是否發(fā)生疫情。（二）疫情監(jiān)測．定期巡查監(jiān)測尚未發(fā)生松材線蟲病地區(qū)，以縣（市、區(qū)）為單位，組織專業(yè)技術人員每月對重點地區(qū)（見普查范圍）的附近松林進行巡查，凡發(fā)現松樹有感病癥狀，立即取樣分離鑒定，確定是否有松材線蟲。煢楨廣鰳鯡選塊網羈淚鍍齊鈞。．定點監(jiān)測在發(fā)生區(qū)邊緣地帶設置固定監(jiān)測點，定期調查，發(fā)現松樹枯死立即取樣分離鑒定，確定是否有松材線蟲。．其他輔助監(jiān)測技術（）打孔流脂監(jiān)測在松材線蟲病發(fā)生區(qū)或其邊緣，選擇外觀正常、針葉無明顯變色的松樹，用直徑厘米－厘米的打孔器或皮帶銃子在松樹主干上打一可見木質部的圓孔（孔位盡量選擇垂直位置），觀察打孔后松脂流出情況，初步判別健康樹和疑似罹病樹。春、夏、秋季，打孔后小時即可進行觀察，冬季打孔后小時－小時進行觀察，對流脂情況進行判別：鵝婭盡損鵪慘歷蘢鴛賴縈詰聾。一級流膠（健康樹）：松脂從孔口流下，超過孔口邊緣；二級流膠（疑似罹病樹）：松脂沉積在孔口下緣；三級流膠（疑似罹病樹）：松脂滲出到圓孔壁上，呈粒狀；四級流膠（疑似罹病樹）：孔壁上無松脂流出。對疑似罹病樹進行取樣分離鏡檢，確認是否有松材線蟲。要注意松樹樹種之間的流脂差異，馬尾松要較黑松表現遲緩?；[叢媽羥為贍僨蟶練淨櫧撻曉。（）誘捕器監(jiān)測于松褐天牛羽化期在林間設置誘捕器誘捕松褐天?；铙w進行監(jiān)測。每個誘捕器之間距離為米，誘捕器下端距地面米左右。將誘捕到的松褐天牛成蟲活體剪碎后用貝爾曼漏斗法進行分離，再鑒定是否攜帶松材線蟲。預頌圣鉉儐歲齦訝驊糴買闥齙。一旦發(fā)現松褐天牛攜帶松材線蟲，則在誘捕點周圍米范圍內對枯死松樹和瀕死松樹進行取樣分離鑒定，確定疫情發(fā)生地點。滲釤嗆儼勻諤鱉調硯錦鋇絨鈔。禁止在疫情發(fā)生林分邊緣使用，防止疫情向外擴散蔓延。（）線蟲檢測管監(jiān)測在樹干上用電鉆（木工鉆）鉆一可見木質部的圓孔，插入線蟲檢測管。－天后拔出檢測管，通過檢視管壁凝結水內有無蠕動線蟲，再鑒定是否為松材線蟲。具體技術操作規(guī)程參見附錄。鐃誅臥瀉噦圣騁貺頂廡縫勵羆。（）航空遙感監(jiān)測對地面不易調查的高山密林地區(qū)，采用航空遙感技術進行監(jiān)測，發(fā)現枯死樹后，再根據全球定位系統(tǒng)指示位置開展實地調查。實施航空遙感監(jiān)測，要運用差分方法對機上顯示的地理位置進行校正。擁締鳳襪備訊顎輪爛薔報贏無。（三）取樣．取樣方法（）取樣部位一般情況下在樹干下部（胸高處）、上部（主干與主側枝交界處）、中部（上、下部之間）個部位取樣。如僅部分枝條表現癥狀的，要在樹干上部和死亡的枝條上取樣。如外部表現癥狀明顯的可在胸高處取樣。在春季松褐天?；计?，可在蛹室周圍取樣。贓熱俁閫歲匱閶鄴鎵騷鯛漢鼉。（）取樣時在取樣部位剝凈樹皮，直接砍取克－克木片；或剝凈樹皮，用手搖鉆從木質部至髓心鉆取克－克木屑；或在取樣部位分別截取 厘米厚的圓盤。壇摶鄉(xiāng)囂懺蔞鍥鈴氈淚躋馱釣。（）取樣時應排除人畜破壞、森林火災、其他病蟲害等原因造成的枯死樹。（）取樣時應考慮以下因素：——松材線蟲病發(fā)病高峰期一般在－月，從表現出針葉變黃、樹脂分泌減少甚至停止至死亡約個月至個半月。蠟變黲癟報倀鉉錨鈰贅籜葦繯?！谒闪种幸话闶莾?yōu)勢木先發(fā)病?！捎诓煌貐^(qū)種源的松材線蟲的致病性、松樹的抗性差異等原因，一些松樹僅部分枝條表現感病外部癥狀。這種癥狀在混交林中表現尤其明顯。買鯛鴯譖曇膚遙閆擷凄屆嬌擻。———抽取樣品要及時并重點抽取尚未完全枯死或剛枯死的優(yōu)勢木（針葉呈黃綠或黃褐色，尚未完全枯萎，樹皮尚未脫落，材質尚未腐朽）。綾鏑鯛駕櫬鶘蹤韋轔糴飆鈧麥。（）所取的樣品要及時貼上標簽（記錄樣品號、采集地點、樹種、樹齡、取樣時間和取樣人等）。．抽樣數量以林業(yè)小班為單位，表現典型癥狀的松樹在株以下時全部取樣；株以上時先抽取株，再選取其余數量的－。驅躓髏彥浹綏譎飴憂錦諑瓊針。．樣品的保存與處理取回的樣品應及時分離鑒定，若需要保存可采取以下方法：將木片裝入塑料袋內，扎緊袋口，在袋上扎幾個小孔（也可直接保存木段、圓盤），放入℃冰箱。若需長期保存，要經常在樣品上噴水（一般在半個月至個月內完成分離鑒定）。貓蠆驢繪燈鮒誅髏貺廡獻鵬縮。樣品分離鑒定結束后應及時對樣品進行銷毀。注：松材線蟲普查監(jiān)測工作具體技術操作規(guī)程參見國家標準《松材線蟲普查監(jiān)測技術規(guī)程（ —）》。鍬籟饗逕瑣筆襖鷗婭薔嗚訝擯。（四）分離鑒定．線蟲分離將取回的樣品在室內采用貝爾曼漏斗法或淺盤法進行線蟲分離，分離時間一般需小時以上。將分離液體收集到試管或燒杯中，通過自然沉淀或離心后進行鏡檢。構氽頑黌碩飩薺齦話騖門戲鷯。．線蟲培養(yǎng)（）疫木保溫保濕培養(yǎng)：將樣品鋸成小段，置于燒杯中加少量清水，木段下端浸在水中，木段上端用濕紗布覆蓋，在℃條件下保溫保濕培養(yǎng)天，倒取杯中水液，可獲得較多雌雄成蟲；或將樣品木段適當浸濕，放于塑料袋里，扎緊袋口，置于℃培養(yǎng)箱中天取出重新分離，可獲得較多雌雄成蟲。輒嶧陽檉籪癤網儂號澩蠐鑭釃。（）單異活體培養(yǎng)：制備馬鈴薯－葡萄糖－瓊脂培養(yǎng)基（）平板。用盤多毛孢（ .）或鐮刀孢（ .）或灰葡萄孢（ ）培養(yǎng)線蟲。無菌條件下將多毛孢或鐮刀孢或灰葡萄孢接種在平板上，置于℃－℃恒溫培養(yǎng)－天，菌絲長滿平板時接種線蟲。多毛孢或鐮刀孢在℃恒溫條件下保濕培養(yǎng)線蟲，接種條幼蟲，小時即可分離鑒定，線蟲量少時可相應延長培養(yǎng)時間?；移咸焰咴凇婧銣嘏囵B(yǎng)線蟲，培養(yǎng)時間要加長－天。堯側閆繭絳闕絢勵蜆贅瀝紕縭。．玻片的制作（）臨時水玻片的制作：在潔凈的載玻片中央滴一水滴，水滴的量以加蓋玻片后恰好充滿蓋玻片下的空間為好。用細針挑取，或用毛細滴管吸取線蟲置于載玻片的水滴中，并使之沉底。將有線蟲的載玻片在酒精燈的火焰上往返通過－秒，殺死線蟲。用細針擺好水滴中的死線蟲，然后用鑷子夾蓋玻片從一側輕輕蓋下。識饒鎂錕縊灩筧嚌儼淒儂減攙。（）半永久玻片的制作：將分離所得的線蟲液，轉移至離心管中，轉分離心分鐘。吸去上部清水并保留底部－毫升線蟲液，置于℃熱水中 分鐘殺死線蟲，待冷卻后，加入等體積的液固定小時以上。再用上述方法再離心，用微量移液器吸取離心管底部線蟲液，滴加進裝有 毫升棉藍－乳酚油的鐘面皿中，置恒溫烘箱中℃脫水小時。凍鈹鋨勞臘鍇癇婦脛糴鈹賄鶚。在載玻片上加上封片蠟圈，用挑針加一小滴甘油于蠟圈中心位置。解剖鏡下挑取脫水后的目標線蟲于甘油中，使其沉底并位于甘油滴中心位置。在封片蠟圈上放置蓋玻片，轉移至控溫電熱平板上，保持℃使蠟完全融化，取下并自然冷卻后用透明指甲油加封一次。恥諤銪滅縈歡煬鞏鶩錦聰櫻鄶。．鑒定（）常規(guī)顯微鏡形態(tài)鑒定（僅適用于雌雄成蟲，以雌成蟲為主）：將制作好的玻片置于顯微鏡下觀察其形態(tài)，判別是否為松材線蟲。鯊腎鑰詘褳鉀溈懼統(tǒng)庫搖飭緡。注：松材線蟲分離、培養(yǎng)、鏡檢技術操作規(guī)程參見國家標準《松材線蟲病檢疫技術規(guī)程（ —）》碩癘鄴頏謅攆檸攜驤蘞鷥膠據。（）分子檢測（適用于各蟲態(tài)）：松材線蟲分子檢測技術采用實時檢測技術，操作規(guī)程見附錄。所需儀器和試劑可與國家林業(yè)局危險性林業(yè)有害生物檢驗鑒定技術培訓中心聯系。閿擻輳嬪諫遷擇楨秘騖輛塤鵜。二、疫情報告、公布與撤銷（一）疫情確認．新發(fā)現疫情的省（區(qū)、市），疫情鑒定以國家林業(yè)局全國危險性林業(yè)有害生物檢驗鑒定技術培訓中心或國家林業(yè)局林業(yè)有害生物檢驗鑒定中心鑒定結論為準，由國家林業(yè)局最后確認。氬嚕躑竄貿懇彈瀘頷澩紛釓鄧。．新發(fā)現疫情的縣級行政區(qū)，疫情鑒定以省級以上森防機構或國家林業(yè)局認可的專家鑒定結論為準，由省級林業(yè)主管部門最后確認。釷鵒資贏車贖孫滅獅贅慶獷緞。（二）疫情報告．普查結果報告：春季普查報告應在月份、秋季普查報告應在月份報告國家林業(yè)局；報告中應附年度松材線蟲病監(jiān)測普查統(tǒng)計表和年度松材線蟲病發(fā)生情況統(tǒng)計表。慫闡譜鯪逕導嘯畫長涼馴鴇撟。．月報告：各省（區(qū)、市）森防機構定期以電子郵件和書面形式同時向國家林業(yè)局森防總站報送松材線蟲病除治工作進展情況。實行定期除治（集中在秋季普查后至翌年松褐天牛羽化前開展疫木除治）的，每月報送一次；實行常年除治的，每季度報送一次。疫情監(jiān)測情況每月報送一次。諺辭調擔鈧諂動禪瀉類謹覡鸞。．新發(fā)疫情報告：在疫情監(jiān)測中，一旦經技術鑒定證實新發(fā)現松材線蟲病，當地林業(yè)主管部門應在一周內逐級將發(fā)生地點、發(fā)現日期、林分狀況、發(fā)病面積、病死樹數量等報告國家林業(yè)局和當地人民政府。嘰覲詿縲鐋囁偽純鉿錈癱懇跡。（三）疫情公布國家林業(yè)局根據全國松材線蟲病疫情調查結果，每年正式以公告或新聞發(fā)布會等形式公布松材線蟲病疫情信息。（四）疫情撤銷．當疫情發(fā)生區(qū)通過有效手段根除疫情后，由國家林業(yè)局以公告或新聞發(fā)布會等形式宣布該地解除疫情。．撤消疫情應滿足下列條件之一：——通過有效手段根除后，分布區(qū)中沒有松材線蟲的寄主植物?！ㄟ^有效手段根除后，連續(xù)年疫情普查監(jiān)測中沒有發(fā)現松材線蟲。三、防治措施（一）規(guī)劃設計．各?。▍^(qū)、市）林業(yè)主管部門根據國家林業(yè)局的總體部署和本?。▍^(qū)、市）松材線蟲病秋季普查結果，制定本?。▍^(qū)、市）松材線蟲病防治方案。熒紿譏鉦鏌觶鷹緇機庫圓鍰緘。．各縣級疫情發(fā)生區(qū)根據本省（區(qū)、市）松材線蟲病防治預案，結合本地松材線蟲病傳播規(guī)律、發(fā)生區(qū)的地