細胞工程制藥復習ppt課件(已修改)
2025-01-20 05:22 本頁面
【正文】 第四章 細胞融合 與 單克隆抗體 Cell Fusion and Monoclonal Antibodies ?細胞融合 ?單克隆抗體技術 第一節(jié) 細胞融合 一、細胞融合劑 二、細胞融合方式 三、細胞融合技術 四、雜種細胞的篩選 第一節(jié) 細胞融合 ?定義 ：指將不同來源的原生質(zhì)體相融合，并使之分化再生、形成新物種或新品種的過程，又稱為體細胞雜交 第一節(jié) 細胞融合 ?原理 ： 植物細胞 去細胞壁 (酶消化 ) 動物細胞 分散 (酶消化 ) 單個原生質(zhì)體 誘導融合 篩選 關鍵 ：建立細胞橋 一、細胞融合劑 病 毒 類 DNA病毒：水痘和皰疹病毒 RNA病毒：仙臺 (HVj)病毒 RNA致癌病毒： Rous肉瘤病毒 冠狀病毒 化 合 物 水溶性： PEG、 DMSO 脂溶性：溶血卵磷脂 生物制劑 昆蟲提取物 受體作用 電荷作用 二、細胞融合方式 ?完整細胞之間的融合 ?核體、胞質(zhì)體與完整細胞的融合作用 ?微小細胞與完整細胞的融合 ?脂質(zhì)體介導的細胞融合 三、細胞融合技術 ? 生物法（病毒誘導融合） ? 化學法（化學劑誘導融合） ? 物理法（電融合） 生物法 化學法：聚乙二醇（ PEG） 介導的細胞融合 原理： ①促使細胞凝結(jié) （負電荷作用） ②破壞接觸處細胞膜 （被洗脫） 影響因素： ? 分子量： 4000— 6000 ? 濃度： 20— 60% （通常： 30— 50%） ? pH： 偏堿為宜（ — ） ? 其他： 二甲亞砜、植物血凝素 ? 原理： 細胞在電場中極化成偶極子，并排列成串，然后用高強度、短時程的電脈沖擊穿細胞膜。 物理法： 細胞電融合 甜菜原生質(zhì)體電融合過程 1）在高頻電流電場下的相互接 2）脈沖刺激后 30s 3) 50秒后 4） 5） 6分鐘后 6） 15分鐘后，原生質(zhì)體融合完成。
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