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共軛焦顯微鏡簡介-文庫吧

2025-07-21 03:47 本頁面


【正文】 的基本原理如圖所示。共焦顯微鏡分為 反射式 與 透射式 兩種形式。點(diǎn)光源發(fā)出的光經(jīng)物鏡后聚焦到物體的表面,再由物體反射或透射后經(jīng)聚光鏡再聚焦到探測器。 共焦顯微術(shù)原理 優(yōu)點(diǎn):具有高分辨率尤其是縱向高分辨率的 特點(diǎn) ,使得它可以對樣品的軸向進(jìn)行光學(xué) 層析,從而可以重構(gòu)出樣品的三維圖像。 原因:探測器前面放置了小孔光闌,使得雜散光被大大消除,而且小孔位于聚光鏡的焦點(diǎn)處,非物鏡焦平面上的光線被擋住,這樣探測器的信噪比就大大提高,成像有很高的對比度和清晰度。 共軛焦顯微鏡的分類 商業(yè)化的 共聚焦(共軛焦顯)顯微鏡 ( Confocal microscope) 分三類: ? ※ 共聚焦激光掃描顯微鏡 ( Confocal Laser Scanning Microscope, CLSM, LSCM) ( 點(diǎn)掃描激光共焦顯微鏡、線掃描激光共焦顯微鏡、光纖激光共焦顯微鏡) ? 轉(zhuǎn)盤共聚焦顯微鏡 ( Spinningdisk (Nipkow disk) confocal microscopes) ? 可編程序陣列顯微鏡 ( Programmable Array Microscopes (PAM)) ? 其他: 熒光共焦顯微鏡、共焦干涉顯微鏡、全息共焦顯微鏡、非掃描激光共焦顯微鏡 ( 需做說明 ) 顯微鏡成像清晰度的決定因素 : 分辨率: 指顯微鏡能將近鄰的兩個(gè)質(zhì)點(diǎn)分辨清楚的能力 ,通常是用顯微鏡所能分辨清楚最近的相鄰兩點(diǎn)間的距離來表示。 人眼及各類顯微鏡的分辨率 人眼分辨率: mm 光學(xué)顯微鏡分辨率: mm 共焦顯微鏡分辨率: mm 電子顯微鏡分辨率: nm 球差: 是由于透鏡不能把近軸光線和遠(yuǎn)軸光線在光軸上共聚焦,以至透過標(biāo)本一點(diǎn)的光線,在通過透鏡時(shí)不能聚焦成一點(diǎn) ,而是形成一個(gè)光斑 ,從而使成像模糊不清。 色差: 是由于顯微鏡透鏡類似于三棱鏡 ,對不同顏色的光線具有不同的折射率。所以光線透過透鏡后 ,不同色的光聚焦在不同點(diǎn)上 ,從而使成像模糊 ,而且像的邊緣尚帶有色暈。 共焦顯微鏡的幾個(gè)關(guān)鍵技術(shù) ? 共焦小孔光闌大小的選擇 : 當(dāng)小孔的直徑等于艾利斑大小時(shí)既能保證共焦成像的高分辨率和層析能力,又有足夠的光能通過小孔被探測器接收。 ? 高精度掃描系統(tǒng)的設(shè)計(jì): 目前主要采用的 掃描方式
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