【正文】 有帶負(fù)電荷的磷酸根與羧酸根，強(qiáng)堿性陰離子交換樹(shù)脂可吸附除去溶劑中的熱原，強(qiáng)酸性陽(yáng)離子交換樹(shù)脂效果稍差一些。 （ 4）凝膠濾過(guò)法 用分子篩陰離子交換劑（二乙氨基乙基葡聚糖凝膠 A25）濾過(guò)可除去水中熱原。 （ 5）反滲透法 如選 用三醋酸纖維膜或聚酰胺膜進(jìn)行反滲透可除去熱原。 （ 6）高溫法和酸堿法 常采用 180℃ ／ 3～ 4 小時(shí)、 250℃ ／ 30～ 45 分鐘等條件徹底破壞熱原，或采用高錳酸鉀硫酸溶液可除去容器用具上的熱原。 熱原檢查目前各國(guó)藥典仍為家兔法。 家兔法：選用家兔作試驗(yàn)動(dòng)物，是因?yàn)榧彝脤?duì)熱原的反應(yīng)和人是相同的。具體試驗(yàn)方法和結(jié)果判斷標(biāo)準(zhǔn)參看《中國(guó)藥典 2020 版》二部附錄。采用直腸熱電偶代替直腸溫度計(jì)，熱電偶在整個(gè)實(shí)驗(yàn)中固定在直腸內(nèi)，其溫度可在儀表中顯示出來(lái)。因而免除對(duì)單個(gè)家兔溫度多次測(cè)量操作。國(guó)內(nèi)四川 綿陽(yáng)醫(yī)用電子儀器廠生產(chǎn)的 RY 型熱原測(cè)試儀基本上符合這種要求，具有分辨率高，讀數(shù)精確的優(yōu)點(diǎn)，同時(shí)可測(cè)雖 16 只動(dòng)物，能滿(mǎn)足一般熱原測(cè)定需要。 鱟試驗(yàn)法：利用鱟的變形細(xì)胞溶解物與內(nèi)毒素之間的膠凝反應(yīng)，試驗(yàn)時(shí)制備或購(gòu)買(mǎi)鱟熱原試劑，即送變形細(xì)胞溶解物。然后取一定量的熱原試劑，加入一定量的供試品放入潔凈的無(wú)熱原試管中，于 37℃ 水溶液中培育 60 分鐘，觀察結(jié)果。同時(shí)作陰性對(duì)照。判斷如下：如試驗(yàn)品出現(xiàn)凝膠或粘稠度和不透明度增加者為陽(yáng)性反應(yīng)，表明供試品有熱原。若供試品無(wú)變化或僅有絮狀物者為陰性，表明供試品無(wú)熱原。 有人 比較兔試驗(yàn)與鱟試驗(yàn)法的靈敏性，結(jié)果說(shuō)明鱟試驗(yàn)法能檢出 的內(nèi)毒素，而兔試驗(yàn)法只能檢出 的內(nèi)毒素，故認(rèn)為鱟試驗(yàn)比免試驗(yàn)靈敏十倍。鱟試驗(yàn)特別適用于某些不能用家免進(jìn)行熱原檢測(cè)的品種，如放射性藥劑、腫瘤抑制劑等。因?yàn)檫@些制劑具有細(xì)胞毒性具有一定的生物效應(yīng)，用家兔檢測(cè)是不適宜的。 其對(duì)革蘭氏陰性以外的內(nèi)毒親不夠敏感，不能代替家兔熱原試驗(yàn)法。 四、滅菌法 滅菌法是指用熱力或其適宜的方法將物質(zhì)中的微生物殺死或除去的方法。 第 8 頁(yè) 共 34 頁(yè) 濕熱滅菌法 物理滅菌法 干熱滅菌法 濾過(guò)除菌法 滅菌法 紫外線滅菌法 輻射滅菌法 化學(xué)滅菌法 氣體滅菌法 化學(xué)殺菌劑滅菌法 F0值：為標(biāo)準(zhǔn)滅菌時(shí)間。表示滅菌過(guò)程賦予待滅菌物品在 121℃下的等效滅菌時(shí)間。濕熱滅菌的 F0不低于 8。 五、注射劑生產(chǎn)制備 （一） 注射劑車(chē)間的設(shè)計(jì)要求 1．位置選擇 注射劑車(chē)間必須建立在整潔的環(huán)境中，周?chē)牡孛?、路面及運(yùn)輸?shù)炔粦?yīng)對(duì)注射劑生產(chǎn)造成污染。 2．潔凈廠房（室）設(shè)計(jì)要求 注射劑生產(chǎn)車(chē)間按生產(chǎn)工藝及產(chǎn)品質(zhì)量要求可分為一般生產(chǎn)區(qū)、控制區(qū)、潔凈區(qū)、無(wú)菌區(qū)。一般生產(chǎn)區(qū)無(wú)空氣潔凈度要求，控制區(qū)的潔凈度要求為 10 萬(wàn)級(jí)，潔凈區(qū)的潔凈度要求為 1 萬(wàn)級(jí)，無(wú)菌區(qū)的潔凈度要求為 100 級(jí)。人流物流應(yīng)分 開(kāi)，防止交叉污染。 （二） 注射劑的生產(chǎn)管理：按 GMP 要求必須有生產(chǎn)質(zhì)量管理文件。 生產(chǎn)管理文件包括： 工藝規(guī)程； 標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程； 批生產(chǎn)記錄等。 （三） 注射劑的容器 注射器的容器有中性玻璃制成的安瓿、抗生素小瓶（西林瓶）、輸液瓶等，也有用安瓶 洗滌 干燥或滅菌 純化水 注射用水 原輔料 配液 濾過(guò) 灌封 入庫(kù) 印字、包裝 燈檢 滅菌、檢漏 第 9 頁(yè) 共 34 頁(yè) 無(wú)毒聚氯乙烯，聚乙烯、聚丙烯等塑料制成的容器。 易折安瓿有兩種，即色環(huán)易折安瓿和點(diǎn)刻痕易折安瓿。 硬質(zhì)中性玻璃是低硼硅酸鹽玻璃，化學(xué)穩(wěn)定性高，耐熱壓滅菌性好，適用作中性或弱酸性注射液的容器，多數(shù)安瓿用無(wú)色玻璃制成，有利于檢查藥液澄明度。 安瓿的質(zhì)量要求： ①、安瓿玻璃 應(yīng)無(wú)色透明，以便于檢查澄明度、雜質(zhì)及變質(zhì)情況； ②、應(yīng)具有低的膨脹系數(shù)，耐熱性好，以耐受在熱壓滅菌時(shí)產(chǎn)生的熱沖擊； ③、要有足夠的物理強(qiáng)度以耐受熱壓滅菌時(shí)所產(chǎn)生的較高的壓力差； ④、應(yīng)具有高度的化學(xué)穩(wěn)定性 ,不改變藥液的 pH 值 ,不易被藥液所腐蝕； ⑤、熔點(diǎn)較低 ,易于熔封 。 ⑥、不得有氣泡、麻點(diǎn)和砂粒。 一般采用 120140℃ 烘箱干燥，目的是為了防止殘留的水稀釋注射液并殺死細(xì)菌及熱原。大量生產(chǎn)多用隧道式紅外線烘箱，隧道內(nèi)平均溫度約 200℃ 。 用于盛裝無(wú)菌操作的藥液或低溫滅菌制品的安瓿，須用 180℃ / 小時(shí)干熱滅菌或160170℃ /24 小時(shí)，或在隧道內(nèi) 350℃ /5min。 滅菌的安瓿應(yīng)在 24 小時(shí)內(nèi)使用，醫(yī)學(xué)教育 |網(wǎng)搜集整理存放柜應(yīng)有凈化空氣保護(hù)。 （四）注射劑的配制 原輔料的質(zhì)量要求與投料量計(jì)算 供注射用的原輔料，應(yīng)符合 “ 注射用 ” 規(guī)格，并經(jīng)化驗(yàn)合格方能投料；輔料應(yīng)符合藥用標(biāo)準(zhǔn)，若有注射用規(guī)格，應(yīng)選用注射用規(guī)格。 配液時(shí)應(yīng)按處方規(guī)定和原輔料化驗(yàn)測(cè)定的含量結(jié)果計(jì)算出每種原輔料的投料量，并應(yīng)二人核對(duì)。藥物含結(jié)晶水應(yīng)注意處方是否要求換算成無(wú)水藥物的用量。生產(chǎn)中改換原輔料 的生產(chǎn)廠家時(shí)，甚至對(duì)于同一廠的不同批號(hào)的產(chǎn)品，在生產(chǎn)前均應(yīng)作小樣試驗(yàn)。 在投料之前，應(yīng)根據(jù)處方規(guī)定用量、原料實(shí)際含量、成品含量及損耗等計(jì)算所有成分的實(shí)際投料量。 原料實(shí)際用量＝原料理論用量 成品標(biāo)示量／原料實(shí)際含量 原料理論用量＝實(shí)際配液數(shù) 成品含量％ 實(shí)際配液數(shù)＝實(shí)際灌裝數(shù)＋實(shí)際灌裝時(shí)損耗量 配制用具的選擇與處理 配液用的器具均應(yīng)用化學(xué)穩(wěn)定性好的材料制成，常用的有玻璃、不銹鋼、耐酸堿搪瓷或無(wú)毒聚氯乙烯桶等。鋁制品不宜選用。大量生產(chǎn)可選用夾層的不銹鋼鍋，并裝有攪 第 10 頁(yè) 共 34 頁(yè) 拌器。 供配制用的所有器具使用前須用新鮮注射用水燙洗或滅菌后備用，膠管、膠塞先用肥皂水浸泡并充分搓揉以除去管內(nèi)的附著物，再用飲用水揉搓沖洗，洗去堿液，再用注射用水加熱煮沸 15 分鐘，然后沖洗干凈備用。廣口容器可用擦有肥皂并搓成泡沫的紗布擦洗，不要直接用肥皂擦器壁，以免肥皂進(jìn)入孔隙，難以洗凈，再依次用飲用水、注射用水洗凈備用。 藥液配制方法 （ 1）稀配法：凡原料質(zhì)量好，藥液濃度不高或配液量不大時(shí)，常用稀配法，即一次配成所需的濃度。 （ 2）濃配法：當(dāng)原料質(zhì)量較差，則常采用濃配法，醫(yī)學(xué) `教育網(wǎng) 搜集整理即將全部原輔料加入部分溶媒中配成水溶液，經(jīng)加熱或冷藏、過(guò)濾等處理后，根據(jù)含量測(cè)定結(jié)果稀釋至所需濃度。溶解度小的雜質(zhì)在濃配時(shí)可以濾過(guò)除去；原料藥質(zhì)量差或藥液不易濾清時(shí)，可加入配液量 %針用一級(jí)活性炭，煮沸片刻，放冷至 50℃ 再脫炭過(guò)濾。另外，活性炭在微酸性條件下吸附作用強(qiáng)，在堿性溶液中有時(shí)出現(xiàn)脫吸附，反而使藥液中雜質(zhì)增加。 若為油溶液，注射用油應(yīng)在用前經(jīng) 150160℃ /12 小時(shí)干熱滅菌后冷卻待用。 配制應(yīng)在潔凈的環(huán)境中進(jìn)行，一般不要求無(wú)菌；配好后，應(yīng)進(jìn)行半成品質(zhì)量檢查，包括 pH、含量等，合格后才能濾過(guò)。 三、注射液的過(guò)濾 鈦濾器：用于粗濾除去活性炭和大的微粒雜質(zhì)。 聚醚砜濾器用于濾除﹥ 的微粒。 ： （ 1）表面（篩析）截留作用，粒徑大于濾過(guò)介質(zhì)孔徑的固體粒子被截留在濾過(guò)介質(zhì)的表面。常用的篩析作用的濾過(guò)介質(zhì)有微孔濾膜、超濾膜、反滲透膜等。 （ 2）深層截留作用，粒徑小于濾過(guò)介質(zhì)孔徑的固體粒子在濾過(guò)過(guò)程中進(jìn)入到介質(zhì)的內(nèi)部，被截留在介質(zhì)的深層而分離的作用。如砂濾棒、垂熔玻璃濾器、石棉濾過(guò)板等遵循深層截留作用機(jī)理。 ：固體粒子聚集在濾過(guò)介質(zhì)的 表面之上，濾過(guò)的攔截作用主要由所沉積的濾餅起作 用。 四、注射液的灌封 第 11 頁(yè) 共 34 頁(yè) 灌封是將 過(guò) 濾 的藥液，定量地灌裝到安瓿中并加以封閉的過(guò)程。包括灌注藥液和封口兩步，是注射劑生產(chǎn)中保證無(wú)菌的最關(guān)鍵操作。 藥液灌封要求做到劑量準(zhǔn)確，藥液不沾瓶口，以防熔封時(shí)發(fā)生焦頭或爆裂，注入容器的量要比標(biāo)示量稍多，以抵償在給藥時(shí)由于瓶壁粘附和注射器及針頭的吸留而造成的損失，一般易流動(dòng)液體可增加少些，粘稠性液體宜增加多些。 （一）注射劑灌裝灌裝時(shí)要求容量準(zhǔn)確，每次灌裝前必須先試灌若干支，按照藥典規(guī)定的注射液的裝量測(cè)定進(jìn)行檢查，符合 規(guī)定后再進(jìn)行灌注。灌注時(shí)還注意不使灌裝針頭與安瓿頸內(nèi)壁碰撞，以防玻璃屑落入安瓿中，如灌裝針頭外面沾濕時(shí)，可用處理過(guò)的潔凈稠布拭干后再用。 大量生產(chǎn)時(shí)可改裝為雙針或多針灌裝器，也可采用安瓿自動(dòng)灌封機(jī)。 易氧化藥物溶液灌裝后，需向安瓿中通入惰性氣體，驅(qū)逐藥液上面的空氣以防藥物氧化。安瓿通入惰性氣體的方法很多，一般認(rèn)為兩次通氣較一次通氣效果好。 12ml 的安瓿常在灌裝藥液后通入惰性氣體，而 5ml 以上的安瓿則在藥液灌裝前后各通一次，以盡可能驅(qū)盡安瓿內(nèi)的殘余空氣。 （二）注射劑熔封已灌裝好的安瓿應(yīng)立 即熔封。安瓿熔封應(yīng)嚴(yán)密、不漏氣、安瓿封口后長(zhǎng)短整齊一致，頸端應(yīng)圓整光滑、無(wú)尖頭和小泡。封口方法有拉封和頂封兩種，由于拉封封口嚴(yán)密，不會(huì)象頂封那樣易出現(xiàn)毛細(xì)孔，故目前主張拉封，特別是裝粉末或具有廣口的其它類(lèi)型安瓿，都必須拉封。目前國(guó)內(nèi)藥廠常用的是拉絲灌封機(jī)。 灌封時(shí)常發(fā)生的問(wèn)題有劑量不準(zhǔn)、焦頭、鼓泡、封口不嚴(yán)等，醫(yī)學(xué)教育 |網(wǎng)搜集整理但最易出現(xiàn)的問(wèn)題是產(chǎn)生焦頭。產(chǎn)生焦頭的主要原因是灌液太猛，藥液濺到安瓿內(nèi)壁；針頭回藥慢，針尖掛有液滴且針頭不正，針頭碰安瓿內(nèi)壁；安瓿口粗細(xì)不勻，碰到針頭；灌注與針頭行程未配合 好；針頭升降不靈等等。封口時(shí)火焰燒灼過(guò)度引起鼓泡，燒灼不足導(dǎo)致封口不嚴(yán)。 我國(guó)現(xiàn)已有洗、灌、封聯(lián)動(dòng)機(jī)和割、洗、灌、封聯(lián)動(dòng)機(jī)，不僅提高生產(chǎn)效率，而且提高成品質(zhì)量。 五、注射劑的滅菌和檢漏 （一）滅菌 灌封后應(yīng)立即滅菌，從配液到滅菌要求在 12 小時(shí)內(nèi)完成。除無(wú)菌操作生產(chǎn)的注射劑外，所有的注射劑灌封后都應(yīng)及時(shí)滅菌。滅菌方法有多種，但流通蒸汽滅菌法是最常用的方法。主要根據(jù)藥液中原輔料的性質(zhì)，來(lái)選擇不同的滅菌方法和時(shí)間。必要時(shí)，采 第 12 頁(yè) 共 34 頁(yè) 取幾種滅菌方法聯(lián)合使用。在避菌條件較好的環(huán)境中生產(chǎn)的注射劑，一般 15ml 安 瓿多用流通蒸氣 100℃ /30 分鐘滅菌； 1020ml 安瓿采用 100℃ /45 分鐘滅菌；對(duì)熱不穩(wěn)定的產(chǎn)品，可適當(dāng)縮短滅菌時(shí)間；對(duì)熱穩(wěn)定的品種、輸液，均應(yīng)采用熱壓滅菌。 以油為溶劑的注射劑，選用干熱滅菌。 （二）檢漏 檢漏一般應(yīng)用一種能滅菌檢漏兩用的滅菌器，一般于滅菌后待溫度稍降，抽氣至真空度 ，再放入有色溶液及空氣，由于漏氣安瓿中的空氣被抽出，當(dāng)空氣放入時(shí)，有色溶液即借大氣壓力壓入漏氣安瓿內(nèi)而被檢出。 采用鋁蓋壓封的輸液瓶，壓緊的鋁蓋經(jīng)滅菌可頂起或松動(dòng)，應(yīng)逐瓶檢查。 六、注射劑的質(zhì)量檢查 注射液