哮喘患者誘導(dǎo)痰上清液mi-文庫吧
2024-12-31 02:12 本頁面
【正文】 12 主要儀器與試劑超聲霧化儀(中外合資南京道芬電子有限公司)、離心機(jī)(德國Stratos公司)。雙抗體夾心酶聯(lián)免疫法(ELISA)試劑盒(MCP1和MIF，美國BD公司。MIP1Α美國Biosource公司)。 13 研究方法痰液誘導(dǎo)前所有受試者均行肺功能檢查，然后吸入沙丁胺醇200Μg，10min后超聲霧化吸入3%高滲鹽水30~50ml 30min。霧化過程中鼓勵(lì)患者咳嗽、咳痰，有痰時(shí)漱口，咳痰至硅化的玻璃燒杯中，如出現(xiàn)癥狀(喘息、嚴(yán)重咳嗽或呼吸困難)，則隨時(shí)終止導(dǎo)痰。然后加入相當(dāng)于痰液4倍體積的含01%二硫蘇糖醇(DDT)的Hanks平衡鹽溶液(HBSS)，置37℃恒溫水浴箱中孵化15min，用快速液體混合器震蕩15s，搖床上搖15min，用兩層無菌紗布過濾，離心(1000g)10min，將上清液在70℃冰箱保存待測，并取少許沉淀細(xì)胞涂片瑞氏染色，進(jìn)行細(xì)胞分類計(jì)數(shù)。采用ELISA對誘導(dǎo)痰上清液中MIP1Α、MIF、MCP1的濃度進(jìn)行測定，試驗(yàn)具體步驟完全按照生物公司所推薦的路線進(jìn)行。 14 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析采用612版本的SAS軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，數(shù)據(jù)以177。s表示，兩組間比較采用兩樣本t檢驗(yàn)，相關(guān)性分析采用person相關(guān)分析。 2 結(jié)果 21 兩組誘導(dǎo)痰炎癥細(xì)胞相對計(jì)數(shù)構(gòu)成比哮喘組誘導(dǎo)痰嗜酸粒細(xì)胞、淋巴細(xì)胞相對計(jì)數(shù)構(gòu)成比均較正常組高(t=1139，P001。t=565，P001)，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。哮喘組誘導(dǎo)痰肺泡巨噬細(xì)胞相對計(jì)數(shù)構(gòu)成比較正常組低(t=439，P001)。中性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)在兩組間無差異。見表1。 表1 兩組誘導(dǎo)痰炎癥細(xì)胞相對計(jì)數(shù)構(gòu)成比(略) 與正常組比較， 1)P001。 2)P 22 上清液中MIP1Α、MIF、MCP1的質(zhì)量濃度哮喘患者誘導(dǎo)痰上清液中MIP1Α的濃度明顯高于正常人(t=176，P005)，而哮喘患者誘導(dǎo)痰上清液MIF、MCPl濃度比正常人高，但無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=085，P005。t=128，P005)。見表2。 表2 兩組上清液中MIP1Α、MIF、MCP1的質(zhì)量濃度(略) 與正常組比較， 1)P005。2)P 23 上清液MIP1Α、MIF、MCP1與誘導(dǎo)痰炎癥細(xì)胞的相關(guān)性分析 哮喘患者誘導(dǎo)痰上清液MIF與嗜酸粒細(xì)胞相對計(jì)數(shù)構(gòu)成比呈正相關(guān)(r=053，P005)，與淋巴細(xì)胞、肺泡巨噬細(xì)胞及中性粒細(xì)胞相對計(jì)數(shù)構(gòu)成比無相關(guān)關(guān)系。哮喘患者誘導(dǎo)痰上清液中MIP1Α、MCP1與肺泡巨噬細(xì)胞、嗜酸粒細(xì)胞、淋巴細(xì)胞和中性粒細(xì)胞相對計(jì)數(shù)構(gòu)成比均無相關(guān)關(guān)系。 3 討論 誘導(dǎo)痰技術(shù)在支氣管哮喘的基礎(chǔ)研究和臨床應(yīng)用中已受到
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