【正文】 凈工作臺上。將沖洗干凈的種子 用 75％酒精浸泡消毒處理 45s，取出后用無菌水沖洗 3次，移入活性氯含量為 8%～ 9%的 NaClO振蕩消毒 4min，將種子再次取出置于無菌水中振蕩重復(fù)沖洗 5次，而后瀝干置于接種盤上備用。 在無菌操作室中，將滅菌后的銀斑百里香種子，接種 于含有不同濃度 NAA、 2,4D與 6BA配比的 MS培養(yǎng)基中， 每處理 重復(fù) 3次，每重復(fù) 接種 10瓶，隨機(jī)抽取 10株進(jìn)行數(shù)據(jù)的采集 。隨時移除被污染培養(yǎng)基 。 不同濃度的 NAA與 6BA配合使用對銀斑百里香的影響 NAA 與 6BA 配合使用對銀斑百里香種子發(fā)芽率的影響 以 MS為基本培養(yǎng)基，使用不同濃度的 NAA和 6BA配合使用 ， 1520d后 統(tǒng)計 銀斑百里香種子的發(fā)芽情況 (見表 1)。 表 1 NAA、 6BA對銀斑百里香種子發(fā)芽率 (%)的影響 Table 2 The effects of NAA and 6BA on the germination rate of Thymus vulgaris ‘Silver Posie’ seed 處理 發(fā)芽時間(月 日 ) 重復(fù) 1 重復(fù) 2 重復(fù) 3 平均 發(fā)芽率 % 顯著水平 顯著水平 A1B1 105 18 16 12 a AB A1B2 106 20 12 23 ab AB A1B3 106 18 16 17 ab ABC A1B4 105 20 17 15 ab ABC A2B1 105 18 24 16 a A A2B2 105 20 20 18 a A A2B3 105 18 19 18 ab AB A2B4 105 21 18 19 a A A3B1 105 18 16 16 ab ABC A3B2 106 12 21 20 ab AB A3B3 105 16 16 17 ab ABC A3B4 106 16 14 18 abc ABC A4B1 106 14 16 17 abc ABC A4B2 106 12 14 16 bc BC A4B3 106 16 15 15 abc ABC A4B4 108 9 12 14 c C 農(nóng)業(yè)與生物技術(shù)學(xué)院園藝專業(yè) 2021 屆本科生畢業(yè)論文 6 Ck 108 4 1 0 d D 注：表中所列數(shù)字為對應(yīng)培養(yǎng)基中 種子 的 發(fā)芽個數(shù)。 由 表 1可知， 在 NAA與 6BA各濃度配合使用下，對發(fā)芽率的影響 A4B4和 對照 外其它各組合均無顯著差異性 。 結(jié)果 表明 ， 當(dāng) NAA在 （ ～ ） 和 6 BA在 （ ～ ）時，各處理組合之間的發(fā)芽率無顯著差異性， 對銀 斑 百里香種子萌芽 的 影響 較小 ， 但與 對照相比，激素的使用 提前了種子的發(fā)芽時間和 提高 了種子的發(fā)芽率。 NAA 與 6BA 配合使用 對銀斑百里香無菌苗生長的影響 表 2 NAA和 6BA交互作用效果方差分析結(jié)果 Table 2 The results of variance analysis of the Interaction of NAA and 6BA 變異來源 DF SS MS F 處理組合間 15 ** 6BA 3 ** NAA 3 NAAｘ 6BA 9 ** 實(shí)驗誤差 32 見表 2可知，在 NAA和 6BA的處理組合之間、 6BA及 NAA和 6BA互作，均達(dá)到了極顯著水平， NAA作用無差異顯著性。 表 3 NAA和 6BA配合使用 對銀斑百里香無菌苗的影響 Table 3 The effects of NAA and 6BA on the seedlings of Thymus vulgaris‘Silver Posie’ 序號 6BA mg/L NAA//mg/L A1() A2() A3() A4() 1 B1() cC cBC cBC bcBC 2 B2() cBC aA bAB cBC 3 B3() cBC cBC cC bcBC 4 B4() cBC cC cBC cBC 注：表中所列數(shù)字為對應(yīng)培養(yǎng)基中無菌苗的平均高度（ cm） 。 由表 3可知， A2 B2 和 A2 B3處理與其他濃度組合間均達(dá)到極顯著水平， 無菌苗生長狀況較 好； A3B A1B4和 A2B1之間無差異顯著性； A4濃度下的各個濃度組合使下的幼苗生長狀況較差 。 因此 ，不同濃度的 NAA對銀斑百里香無菌苗的影響 都 較小，6BA 、 NAA和 6BA處理組合之間、 NAA對 銀斑百里香無菌苗的影響都較大，且培養(yǎng)基為 MS+ NAA()+6BA(。 不同濃度的 2,4D 和 6BA 配合使用對銀斑百里香的影響 2,4D 和 6BA 配合使用對銀斑百里香種子的影響 以 MS為基本培養(yǎng)基， 使用不同濃 度的 NAA和 6BA配合使用 ， 1520d后 統(tǒng)計 銀斑百里香種子的發(fā)芽情況 (見表 4)。 表 4 2,4D、 6BA對銀斑百里香種子發(fā)芽率 (%)的影響 農(nóng)業(yè)與生物技術(shù)學(xué)院園藝專業(yè) 2021 屆本科生畢業(yè)論文 7 Table 4 The effects of 2,4D and 6BA on the germination rate of Thymus vulgaris‘ Silver Posie’ seed 處理 發(fā)芽時間（月 日） 重復(fù) 1 重復(fù) 2 重復(fù) 3 平均數(shù) 發(fā)芽率 顯著水平 顯著水平 C1B1 109 16 14 18 abcd AB C1B2 109 19 13 14 abcd AB C1B3 108 18 18 15 abcd AB C1B4 107 17 16 21 abcd AB C2B1 108 20 19 18 ab AB C2B2 108 18 20 17 abc AB C2B3 108 11 14 15 cd B C2B4 108 15 16 19 abcd AB C3B1 108 19 21 20 a A C3B2 108 19 15 20 abcd AB C3B3 108 16 20 18 abcd AB C3B4 108 13 15 17 abcd AB C4B1 108 17 14 13 abcd AB C4B2 107 15 14 13 bcd AB C4B3 107 11 14 13 d B C4B4 109 14 13 11 d B Ck 109 1 1 2 e C 由表 4可知， 2,4D與 6BA各濃度配合使用下， 各處理組合之間對 銀 斑 百里香種子的發(fā)芽率 影響 差異不顯著，即 2,4D（ ～ ） 和 6 BA（ ～ ） 配合使用對銀斑百里香種子發(fā)芽的無明顯影響。 與對照相比，與其它各處理組合均達(dá)到極顯著水平。 不同濃度的 2,4D 和 6BA 配合使用對百里香無菌苗的影響 表 5 2, 4D和 6BA作用效果方差分析結(jié)果顯示 Table 5 The results of variance analysis of Interaction effect of NAA and 6BA 變異來源 DF SS MS F 處理組合間 15 ** 2, 4D 3 ** 6BA 3 2,4Dｘ 6BA 9 ** 實(shí)驗誤差 32 由 表 5可知，不同濃度的 2,4D和 6BA處理組合之間、 2,4D及 2,4D和 6BA互作 配合 對于銀 斑 百里香無菌苗的影響，均達(dá)到了極顯著水平， 6BA作用差異不顯著。 表 6 不同濃度的 2,4D和 6BA配 合使用 對 銀斑 百里香無菌苗的影響 Table 6 The effects of different concentrations of 2,4D and 6BA on the seedlings of Thymus vulgaris‘ Silver Posie’ 序號 2, 4D mg/L 6BA//mg/L B1() B2() B3() B4() 1 C1() bcdB cdBC eD feCD 農(nóng)業(yè)與生物技術(shù)學(xué)院園藝專業(yè) 2021 屆本科生畢業(yè)論文 8 2 C2() bB bcdB bcdBC cdfBC 3 C3() aA bcB dfBC dfBCD 4 C4() cdBC bcdBC dfBC dfBCD 注：表中所列 數(shù)字為對應(yīng)培養(yǎng)基中無菌苗的平均高度（ cm） 。 由表 6可知， C3 B3處理的顯著性高于與其他濃度組合間，達(dá)到極顯著水平，無菌苗生長狀況為最好； C3B1差異顯著性次之； C C3和 C4濃度下的個濃度組合使用下的無菌苗生長都無顯著差異性，且幼苗生長不及 C3 B3。結(jié)果表明，不同濃度的 6BA對銀斑百里香無菌苗的影響較小， 2,4D和 6BA的 各處理組合間、 2,4D及 2,4D和 6BA的互作都對銀斑百里香無菌 苗生長的影響較大 。 當(dāng) MS+2, 4D（ ） +6BA() 時銀 斑 百里香無菌 苗生長 的 最好。 百里香的應(yīng)用價值和經(jīng)濟(jì)價值等引起了人們的注意，關(guān)于河西地區(qū)銀 斑 百里香的應(yīng)用鮮有報道，關(guān)于銀斑百里香組織培養(yǎng)的研究資料甚少。 Furmanowa(1992)等人對百里香進(jìn)行了組織培養(yǎng)，獲得了再生植株 ， 穆丹等 (2021)獲得了相同結(jié)果。 (1999)研究了百里香的生根。我國的學(xué)者在百里香屬植物的組織培養(yǎng)方面也取得了一定的進(jìn)展 (沙紅 . 2021。 趙慶臻等 . 2021。 李曉東等 .2021)。李曉東等 (2021)分別 以普通百里香的帶腋芽的莖段和種子為外植體， 比較了不同濃度的 IAA 和 6BA 組合對不定芽的誘導(dǎo)和增殖的效果 ； 2021 年又 設(shè)計了不定芽增 殖 培養(yǎng)基 MS+NAA（ 0～ ） +6BA(0～ 2mg/L)，發(fā)現(xiàn)不定芽的增 殖 受 6BA的影響，當(dāng) NAA 濃度為 ，隨 6BA 濃度的增加，不定芽的增 殖 系數(shù)降低。當(dāng) MS+NAA（ ） +6BA()時最有利于不定芽增 殖。在本實(shí)驗的激素組合下， 6BA 也對無菌苗的生長有影響， 在所設(shè)濃度范圍內(nèi)，當(dāng) 6BA 和 NAA 組合時， 6BA 的影響不明顯；當(dāng) 6BA 和 2,4D 組合時， 6BA 的影響較大。 劉軍 (2021)采集了內(nèi)蒙古亞洲百里香的帶腋芽莖段為試材， MS+NAA(～ )+6BA()誘導(dǎo)不定芽的 增 殖 。 試 驗表明：在百里香芽和 根 的誘導(dǎo)過程中對植物生長調(diào)節(jié)劑的要求不嚴(yán)格，大部分的培養(yǎng)基都能誘導(dǎo)出芽，且出芽率高。但培養(yǎng) 10d 后 MS+NAA ()+6BA()的培養(yǎng)基長出新芽，其他均褐化。趙穎 （ 2021） 等采集內(nèi)蒙古 百里香帶腋芽的莖段作 試材，不定芽的 增 殖 培養(yǎng)基為 MS+NAA()+6BA ()和 MS+NAA() +6BA()，培養(yǎng) 4545d，發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基都形成不定芽，但繁殖系數(shù)不高。低濃度的細(xì)胞分裂素有利于不定芽的生成 。 其與本實(shí)驗有相似之處，所用的激素種類相同，均表現(xiàn)出高濃度的 6BA 不利于無菌苗的生長 ； 不同農(nóng)業(yè)與生物技術(shù)學(xué)院園藝專業(yè) 2021 屆本科生畢業(yè)論文 9 的是激素的配比和試材不同， 在 不同的濃度組合下， 6BA 的影響效果不同 。 銀斑百里香 種子 均發(fā)芽長成幼苗，雖然幼苗生長有一定的變化，但變化幅度并不大；不同種類激素的配合，影響效果不同。 這與 朱至清 (2021)無菌苗生長的培養(yǎng)基中生長調(diào)節(jié)劑的種類、濃度與組合對無菌苗形成起著至關(guān) 重要的作用 不謀而合。 綜上所述 ， 試驗 在 NAA 為 ()和 2,4D 為 ()的濃度范圍分別和 6BA 互作，銀斑百里香種子均能發(fā)芽 長成無菌苗，其中 在 MS+NAA()+ 6BA ()和 MS+2,4D()+6BA()的培養(yǎng)基中 無菌苗生長的效果最佳， NAA 在 ,4D 在 度 ， 6BA 在與 NAA 和 2,4D 組合時， 6BA 的影響效果卻不同 。 本研究 中雖獲得了無菌苗，但無菌苗的莖 較 細(xì)無明顯差異， 這可能與光照、溫度等多因素有關(guān)； 今后可以在此基礎(chǔ)上進(jìn)一步優(yōu)化培養(yǎng)基的配方 ， 來 獲得銀斑百里香無菌壯苗 。 參考文獻(xiàn) 曹軍勝 .百里香保健醬油的研制 [J].中國釀造 , 2021,2930. 段繼功 .紅枸杞百里香保健茶 [J].中國土